Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
3.2. Khảo nghiệm quy trình đông lạnh tinh dịch bò đực giống H’Mông
3.2.1. Kết quả kiểm tra chất lượng tinh dịch bò sau khai thác
Kiểm tra chất lượng tinh dịch bò sau khai thác là kiểm tra đánh giá chất lượng của tất cả các chỉ tiêu cần thiết: màu sắc, V, A, C, pH, K. Khi các chỉ tiêu này đạt theo yêu cầu quy định thì tinh dịch mới được chọn lọc đưa vào sản xuất.
Kiểm tra chất lượng tinh dịch bò sau khai thác còn cho biết khả năng sản xuất tinh, tình trạng sức khỏe của bò là tốt hay xấu.
Kết quả cụ thể kiểm tra chất lượng tinh dịch sau chọn lọc của 05 bò đực giống H’Mông nuôi tại Trung tâm được trình bày trong bảng 3.9.
Bảng 3.9: Chất lượng tinh dịch bò đực H’Mông sau chọn lọc
Nội dung khảo sát
Số hiệu bò đực
01 02 03 04 05
SLKT
ĐTC 88 87 85 85 82
Màu sắc Trắng ngà Trắng ngà Trắng sữa Trắng sữa Trắng sữa
V (ml) 4,40b ± 0,03 4,48a ± 0,03 4,44b ± 0,03 4,60b ± 0,03 4,57b ± 0,03 A (%) 72,48b ± 0,25 73,56b ± 0,27 72,16b ± 0,21 71,85ab ± 0,22 71,66a ± 0,23
pH 6,69a ± 0,01 6,69a ± 0,01 6,67ab ± 0,01 6,66b ± 0,01 6,67b ± 0,01 C (tỷ/ml) 0,88ab ± 0,01 0,87b ± 0,01 0,90a ± 0,01 0,89ab ± 0,01 0,88ab ± 0,01
K (%) 16,15a ± 0,08 16,24a ± 0,08 16,14a ± 0,09 15,72b ± 0,08 15,96ab ± 0,09
* Ghi chú: Trong cùng một dòng các số trung bình có các chữ cái ký hiệu khác nhau thì sự sai khác giữa chúng có ý nghĩa thống kế (P≤ 0,05).
Qua bảng số liệu 3.9 cho thấy: các chỉ tiêu đánh giá chất lượng tinh dịch (lượng tinh, hoạt lực, độ pH, nồng độ tinh trùng, tỷ lệ tinh trùng kỳ hình) của các bò đực giống nuôi tại Trung tâm sau chọn lọc đều đảm bảo chất lượng theo tiêu chuẩn quy định để được đưa vào sản xuất tinh đông lạnh theo TCVN 8925:2012 của Bộ Nông nghiệp và PTNT (2012) [5]
Các chỉ tiêu này cũng thể hiện chất lượng tinh của từng bò đực giống, đồng thời nó phản ánh khả năng sản xuất tinh, tình trạng sức khỏe của bò đực là tốt hay xấu.
Sau khi kiểm tra chất lượng tinh dịch sau khai thác, tiếp tục tiến hành kiểm tra loại bỏ những lần khai thác tinh không đủ tiêu chuẩn đưa vào sản xuất tinh đông lạnh của bò đực H’Mông là khác nhau. Qua 102 lần khai thác tinh ở mỗi bò kết quả cho thấy số lần khai thác đạt tiêu chuẩn của bò đực giống 01 là 88 lần; bò đực giống 02 là 87 lần; bò đực giống 03 và 04 là 85 lần và bò đực giống 05 là 82 lần khai thác đạt tiêu chuẩn.
3.2.2. Kết quả kiểm tra chất lượng tinh dịch bò đực sau pha loãng
Pha loãng tinh dịch mục đích tăng thể tích tinh dịch, nâng cao sức sản xuất của đực giống, nhất là với những đực giống tốt. Sau khi kiểm tra chất lượng tinh dịch sau khai thác, tiếp tục tiến hành kiểm tra loại bỏ những lần khai thác tinh không đủ tiêu chuẩn đưa vào pha loãng và sản xuất tinh đông lạnh của bò đực H’Mông là khác nhau.
Kết quả cụ thể kiểm tra chất lượng tinh dịch sau pha loãng của 05 bò đực giống H’Mông nuôi tại Trung tâm được trình bày trong bảng 3.10.
Qua bảng 3.10 cho thấy, màu sắc sau khi tinh nguyên được pha loãng với môi trường không còn màu trắng đặc trưng mà chuyển thành mầu hơi vàng nhạt và màu vàng nhạt do trong môi trường pha loãng có lòng đỏ trứng gà.
Bảng 3.10: Chất lượng tinh dịch bò đực H'Mông sau pha loãng
Nội dung khảo sát
Số hiệu bò đực
01 02 03 04 05
SLKT
ĐTC 88 87 85 85 82
Màu sắc Hơi vàng nhạt Hơi vàng nhạt Vàng nhạt Vàng nhạt Vàng nhạt V (ml) 8,79a ± 0,07 8,96ab ± 0,06 8,88a ± 0,07 9,19a ± 0,06 9,15a ± 0,07
A (%) 71,41b ± 0,24 72,39a ± 0,26 71,11b ± 0,21 70,76b ± 0,21 70,59b ± 0,22 pH 6,49a ± 0,01 6,49a ± 0,01 6,48ab ± 0,01 6,47ab ± 0,01 6,46b ± 0,01 C (tỷ/ml) 0,44b ± 0,003 0,44b ± 0,003 0,45a ± 0,003 0,44b ± 0,003 0,43c ± 0,003
K (%) 16,13a ± 0,08 16,20a ± 0,08 16,09a ± 0,09 15,66ab ± 0,08 15,88b ± 0,08
* Ghi chú: Trong cùng một dòng các số trung bình có các chữ cái ký hiệu khác nhau thì sự sai khác giữa chúng có ý nghĩa thống kế (P≤ 0,05).
Pha loãng theo tỷ lệ 1:1 (1ml tinh dịch pha thêm 1ml môi trường pha loãng) làm lượng tinh (V) của bò đực tăng gấp đôi so với lượng tinh dịch trước khi pha loãng; cụ thể: bò đực giống 01 từ 4,40 ml lên 8,79 ml; bò đực giống 02 tăng từ 4,48 ml lên 8,96 ml; bò đực giống 03 tăng từ 4,44 ml lên 8,88 ml; bò đực giống 04 tăng từ 4,60 ml lên 9,19 ml và bò đực giống 05 tăng từ 4,57 ml lên 9,15 ml.
Hoạt lực tinh trùng (A %) giảm bò đực giống 01 giảm nhưng không đáng kể từ 71,48% xuống 71,41%; bò đực giống 02 từ 73,56% giảm xuống còn 72,39%; bò đực giống 03 từ 72,16% giảm 71,11%; bò đực giống 04 giảm từ 71,85% xuống 70,76%; bò đực giống 05 giảm từ 71,66 xuống 70,59%. Hoạt lực tinh trùng sống sau pha loãng có giảm nhưng không đáng kể so mới khi khai thác vì môi trường pha loãng gần như là một môi trường ổn định, không ảnh hưởng đến hoạt lực và tỷ lệ tinh trùng.
Nồng độ tinh trùng (C tỷ/ml) sống sau pha loãng bò đực giống 01 giảm từ 0,88 tỷ/ml xuống 0,44 tỷ/ml; bò đực giống 02 giảm từ 0,87 tỷ/ml xuống 0,44 tỷ/ml; bò đực giống 03 giảm từ 0,90 tỷ/ml xuống 0,45 tỷ/ml; bò đực giống 04
giảm 0,89 tỷ/ml xuống 0,44 tỷ/ml và bò được giống 05 giảm 0,88 tỷ/ml xuống 0,43 tỷ/ml.
Độ pH bò đực giống giảm bò đực giống 01 giảm từ 6,69 xuống 6,49, bò đực giống 02 giảm từ 6,69 xuống 6,49, bò đực giống 03 giảm từ 6,67 xuống 6,48, bò đực giống 04 giảm từ 6,66 xuống 6,47 và bò đực giống 05 giảm từ 6,67 xuống 6,46
Tỷ lệ tinh trùng kỳ hình (K %) sau khi pha loãng có giảm so với tỷ lệ kỳ hình của tinh dịch khi khai thác nhưng không đáng kể cụ thể bò đực giống 01 giảm 16,15 % xuống 16,13 %, bò đực giống 02 giảm từ 16,24 % xuống còn 16,20 %, bò đực giống 03 giảm từ 16,14 % xuống 16,09 %, bò đực giống 04 giảm từ 15,72 % xuống 15,66 % và bò đực giống 05 giảm từ 15,96 % xuống 15,88%.
Sau khi pha loãng các chỉ tiêu mầu sắc, V, A, C, pH và K vẫn đảm bảo điều kiện được đưa vào bảo quản và sản xuất tinh đông viên theo theo TCVN 8925:2012 của Bộ Nông nghiệp và PTNT (2012) [5] đã quy định. Sau khi pha loãng kiểm tra hoạt lực tinh trùng, những lần khai thác có hoạt lực tinh trùng sau pha loãng kém loại bỏ ngay trước khi đưa vào cân bằng.
3.2.3. Kết quả kiểm tra chất lượng tinh dịch bò đực sau cân bằng
Sau khi pha loãng với môi trường, tinh dịch được làm lạnh đến nhiệt độ 4- 50C, đây là khoảng thời gian để tinh trùng thích nghi với quá trình giảm trao đổi chất, tránh sốc lạnh làm tổn thương màng tế bào. Việc giảm nhiệt độ nhanh làm rối loạn trao đổi chất của tinh trùng, tuy nhiên sử dụng môi trường pha loãng có khả năng đệm lý tưởng thì tinh trùng sẽ không bị ảnh hưởng bởi sự sốc lạnh.
Kết quả cần bằng hoạt lực tinh trùng bò đực giống H’Mông được trình bày qua bảng 3.11 và sơ đồ 3.9
Bảng 3.11: Hoạt lực tinh trùng sau cân bằng Số hiệu bò đực Số lần kiểm tra (n) Hoạt lực A (%)
01 85 71,33b ± 0,24
02 84 72,24a ± 0,25
03 83 71,02bc ± 0,21
04 83 70,64bc ± 0,20
05 79 70,42c ± 0,21
* Ghi chú: Trong cùng một cột nếu các số trung bình có các chữ cái ký hiệu khác nhau thì sự sai khác giữa chúng có ý nghĩa thống kế (P ≤ 0,05).
Qua bảng 3.11 và biểu đồ 3.9 cho thấy, hoạt lực tinh trùng sau cân bằng của bò đực giống trung bình là 71,13%, cao nhất 72,24% (bò đực giống 02) thấp nhất là 70,42% (bò đực giống 05). Hoạt lực tinh trùng sau cân bằng có giảm nhưng không đáng kể so với hoạt lực sau khi pha loãng. Vì hoạt lực tinh trùng bò đực giống sau khi pha loãng và cân bằng đã được bảo quản trong môi trường 50C.
Số lần kiểm tra hoạt lực sau cân bằng có giảm hơn so với số lần kiểm tra sau pha loãng, vì khi pha loãng những hoạt lực tinh trùng không đảm bảo tiêu chuẩn không thực hiện tiếp quá trình cân bằng hoạt lực.
Kết quả cho thấy sau khi cân bằng hoạt lực của tinh trùng giảm đi không đáng kể so với hoạt lực tinh trùng sau pha loãng và vẫn đảm bảo tiêu chuẩn (A ≥ 40%).
Biểu đồ 3.9: Hoạt lực tinh dịch bò H’Mông sau cân bằng 3.2.4. Kết quả kiểm tra chất lượng tinh dịch bò đực sau giải đông
Hoạt lực tinh trùng sau giải đông có tầm quan trọng rất lớn trong kết quả thụ thai ở bò cái, nếu hoạt lực tinh trùng sau giải đông cao thì tỷ lệ thụ thai cao và ngược lại. Hoạt lực tinh trùng sau một thời gian bảo quản được kiểm tra trình bầy chi tiết tại bảng 3.12 và biểu đồ 3.10.
Bảng 3.12: Hoạt lực tinh trùng sau giải đông Số hiệu bò đực Số lần kiểm tra
ĐTC (n)
Hoạt lực A (%) 250C - 300C 350C - 370C
01 85 34,26b ± 0,24 41,91a ± 0,20
02 84 35,25a ± 0,25 41,90a ± 0,22
03 83 33,28bc ± 0,21 41,84a ± 0,20
04 83 33,63bc ± 0,20 41,46a ± 0,20
05 79 33,28c ± 0,21 41,32a ± 0,21
* Ghi chú: Trong cùng một cột nếu các số trung bình có các chữ cái ký hiệu khác nhau thì có ý nghĩa thống kế (P ≤ 0,05).
Biểu đồ 3.10: Hoạt lực tinh trùng sau giải đông của bò H’Mông Hoạt lực tinh trùng giải đông nhiệt độ (250C - 300C)
Hoạt lực tinh trùng giải đông nhiệt độ (350C - 370C)
Chúng tôi đã tiến hành nghiên cứu hoạt lực của tinh trùng sau giải đông theo 2 mức nhiệt độ khác nhau: mức 1 nhiệt độ trong khoảng (250C - 300C), mức 2 nhiệt độ trong khoảng (350C - 370C), nhằm xem xét đánh giá xem nhiệt độ thích hợp, phù hợp và có ảnh hưởng tới quá trình giải đông hay không.
Qua bảng 3.12 và biểu đồ 3.10 cho thấy, hoạt lực tinh trùng sau giải đông ở tất cả những lần kiểm tra tinh dịch đủ điều kiện TTNT, Asgđ của các bò đực H’Mông giải đông nhiệt độ (250C - 300C) dao động từ 33,28% (bò đực giống 05) đến 35,23% (bò đực giống 02) và nhiệt độ giải đông trong khoảng (350C - 370C ) dao động trong khoảng 41,32% (bò đực giống 05) đến 41,91%
(bò đực giống 01).
Hoạt lực tinh trùng sau giải đông của 414 mẫu ở nhiệt độ 250C-300C đều không đạt điều kiện đưa vào TTNT. Hoạt lực tinh trùng sau giải đông của 414
mẫu trong khoảng nhiệt độ 350C-370C đều đạt Asgđ ≥ 40% và đủ điều kiện chất lượng để TTNT.
Thông thường những bò đực giống có hoạt lực tinh trùng cao thì tinh dịch khi đưa vào bảo quản, sản xuất tinh đông lạnh sẽ có hoạt lực tinh trùng sau giải đông cao. Tuy nhiên, cũng có những bò đực giống bình thường tinh dịch có hoạt lực tinh trùng cao nhưng hoạt lực tinh trùng sau giải đông lại thấp. Theo chúng tôi, nguyên nhân có thể vì khả năng chịu lạnh của tinh trùng bò đực giống không giống nhau. Theo Maria (1995) trích từ Hà Văn Chiêu (1999) [9], trong quá tình làm lạnh để đóng băng tinh trùng, có khoảng 10-50% tinh trùng bị chết do quá trình đông băng xẩy ra. Nước ngoại bào đông băng làm cho nồng độ chất tan tăng lên, áp suất thẩm thấu thay đổi, nước nội bào thoát ra ngoài làm cho tinh trùng teo lại kết hợp với pH thay đổi gây ra các rối loạn các phản ứng hóa - sinh khác trong tinh trùng làm cho tinh trùng bị chết. Hiện tượng đóng băng làm giãn nở tinh thể nước làm chèn ép tinh trùng, làm tinh trùng biến đổi hình dạng, làm mất sức hoạt động hoặc quá trình trao đổi chất bị rối loạn theo Nguyên Xuân Hoàn (1994) [14].
3.2.5. Kết quả sản xuất tinh đông viên
Qua những lần kiểm tra và đánh giá hoạt lực tinh trùng sau khai thác đảm bảo các tiêu chuẩn sản xuất tinh đông lạnh. Mỗi bò đực giống có hàng chục ngàn viên tinh được sản xuất và bảo quản, sau đó để phối giống cho bò ở địa phương và các tỉnh lân cận.
Số lượng viên tinh được sản xuất của năm bò đực giống trong thí nghiệm được trình bầy tại bảng 3.13
Bảng 3.13: Khả năng sản xuất tinh đông viên của bò H'Mông
ĐVT: viên/lần khai thác
Số hiệu bò Số lần kiểm tra ĐTC (n)
Kết quả
X m x Cv %
01 85 71,46a ± 0,85 7,84
02 84 72,10a ± 0,84 7,58
03 83 69,39a ± 0,86 7,84
04 83 69,95a ± 0,86 7,88
05 79 68,87a ± 0,86 7,67
Trung bình 70,35 ± 0,85 7,76
* Ghi chú: Trong cùng một cột các số trung bình có các chữ cái ký hiệu khác nhau thì sự sai khác giữa chúng có ý nghĩa thống kế (P≤ 0,05).
Qua bảng số liệu 3.13 cho thấy trung bình số viên tinh được sản xuất của năm bò đực giống là 70,35 viên/lần khai thác. Dao động khoảng 68,87 viên/lần khai thác (bò đực 05) đến 72,10 viên/lần khai thác (bò đực 02).
Biểu đồ 3.11. Khả năng sản xuất tinh đông viên của bò H’Mông