THÁI VI THỂ BIỂU MÔ ĐƯỜNG RUỘT GÀ ROSS 308
Nguyễn Thị Thơm1, Nguyễn Đình Trình2, Trần Minh Hải3, Nguyễn Bá Tiếp3 và Phạm Kim Đăng2*
Ngày nhận bài báo: 08/03/2017 - Ngày nhận bài phản biện: 30/03/2017 TÓM TẮT
Tác dụng của chế phẩm probiotic Neoavi GroMax chứa Bacillus dạng bào tử chịu nhiệt đến sinh trưởng, tỷ lệ chuyển hóa thức ăn, một số chỉ tiêu vi khuẩn đường ruột, hình thái và kích thước vi thể biểu mô ruột gà ROSS 308 từ 1 đến 45 ngày tuổi đã được đánh giá trong nghiên cứu này. Kết quả cho thấy chế phẩm có cải thiện tăng trọng trung bình ngày giai đoạn 15 đến 28 ngày tuổi; cải thiện tỷ lệ chuyển hóa thức ăn trong hai tuần đầu sau nở nhưng không ảnh hưởng đến lượng thức ăn thu nhận trong thời gian thí nghiệm. Tác dụng của chế phẩm đến tăng khối lượng cơ thể không có ý nghĩa thống kê. Neoavi GroMax không làm thay đổi số lượng vi khuẩn E. coli, C. perfringen, Lactobacillus spp. và tổng số vi khuẩn hiếu khi trong manh tràng và trực tràng nhưng làm giảm số lượng E.coli và tổng số vi khuẩn hiếu khí trong kết tràng. Chế phẩm làm tăng chiều cao và giảm chiều rộng lông nhung biểu mô niêm mạc không tràng. Kết quả này là cơ sở cho ứng dụng bổ sung chế phẩm probiotic chứa Bacillus spp. dạng bào tử vì mục đích cải thiện năng suất gia cầm.
Từ khóa: Gà con, Neoavi GroMax, Ross 308, sinh trưởng, sức khỏe đường ruột ABSTRACT
Effect of heat resistance Bacillus spores as a probiotic feed supplement on growth, some large intestinal bacterium counts and small intestinal epithelial
villum measurements of ROSS 308 broilers
2 Học viện Nông nghiệp Việt Nam
2 Công ty Biospring
3Khoa Thú y, Học viện Nông nghiệp Việt Nam
Nguyen Thi Thom, Nguyen Dinh Trinh, Tran Minh Hai, Nguyen Ba Tiep and Pham Kim Dang Effects of Neoavi GroMax, a probiotic containing Bacillus spores, on growth, FCR, several large intestinal bacterium counts and small intestinal epithelial villum measurements of Ross 308 chicken after hatching to 45 days of age were assessed in the present study. The product led to an increase in average daily gain of the chickens from 15 to 28 days of age; a decrease in feed conversion ratio from hatching to 15 days of age but did not show effects on feed intake during the administration period.
The effect on body weight gain was not significantly observed. Caecum and rectum E. coli, C.
perfringens, Lactobacillus spp. and total aerobic bacterial counts were not altered but colon E.coli and total aerobic bacterial counts were decreased by the probiotic administration. Jejunum villi height was increased while jejunum vlli thickness was decreased in the chickens fed on probiotic-supplemented diet. The results can be considered as a fundament for application of Neoavi GroMax in poultry production.
Keywords: Chicken, growth, intestinal health, Neoavi GroMax, Ross 308 breed 1. ĐẶT VẤN ĐỀ
Probiotic được sử dụng trong chăn nuôi nhằm kích thích sinh trưởng, tăng sức đề kháng cho vật nuôi, giảm chi phí thú y. Các cơ chế tác dụng của những chế phẩm probiotic đã được chứng minh trong hơn hai thập kỷ qua. Probiotic có tác dụng kích thích thu nhận thức ăn, tăng khả năng tiêu hóa thức ăn và hấp thu dinh dưỡng là cơ sở nâng cao năng suất chăn nuôi (Collins và ctv, 1999; Hong và ctv, 2002); tăng cường miễn dịch qua đó cải thiện sức khỏe và sức sản xuất của vật nuôi (Perdigon và ctv, 1999; Blok và ctv, 2002). Nghiên cứu của Ahmed và ctv (2013) chứng minh rằng probiotic với thành phần chính là Lactobacillus spp. làm tăng khối lượng cơ thể và giảm hệ số chuyển hóa thức ăn của lợn con. Vì vậy, probiotic được coi như một giải pháp cải thiện sức khỏe đường ruột qua đó cải thiện sức khỏe và sức sản xuất của vật nuôi. Tuy nhiên, một số nghiên cứu cho rằng bổ sung probiotic có chứa Lactobacillus hoặc Bacillus không ảnh hưởng đến khả năng tiêu hóa của lợn thí nghiệm (Kornegay và ctv, 1996).
Chính từ những kết quả trái ngược đó, quan điểm về sử dụng probiotic trong chăn nuôi vẫn chưa được thống nhất.
Khác với vi khuẩn toàn vẹn, bào tử Bacillus có khả năng chịu nhiệt cao, chịu pH thấp của dạ dày, ít chịu tác động của các enzyme đường tiêu hóa. Khi đến ruột, bào tử được giải. Những ưu điểm này là cơ sở cho phát triển probiotic thế hệ mới. Với chương trình giảm và tiến tới không cho phép bổ sung kháng sinh trong thức ăn chăn nuôi, probiotic ngày càng được người chăn nuôi Việt Nam quan tâm. Neoavi GroMax của công ty Biospring được phát triển cho chăn nuôi gà với nhiều ưu điểm được nhà sản xuất khuyến cáo. Tuy nhiên, các tác dụng cần được đánh giá và chứng minh từ thực nghiệm. Tác dụng của probiotic không chỉ phụ thuộc vào thành phần vi khuẩn và dạng bi khuẩn có trong probiotic mà còn phụ thuộc vào cơ thể động vật với các yếu tố như tuổi, giống và trạng thái sức khỏe. Nghiên cứu trước đây đã cho thấy Neovia GroMax cải thiện khối lượng cơ thể, tăng trọng trung bình/ngày, tỷ lệ chuyển hóa thức ăn của gà thịt lông màu giống Ri Ninh Hoà (Phạm Kim Đăng và cs., 2016). Trong nghiên cứu này, tác dụng của Neovia GroMax với gà con giống Ross 308 được đánh giá nhằm bổ sung cơ sở cho sử dụng chế phẩm này trong chăn nuôi gà.
2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.1. Địa điểm và thời gian thí nghiệm
Thí nghiệm được thực hiện tại Trại thực nghiệm, Khoa Chăn nuôi, Học viện Nông nghiệp Việt Nam từ tháng 10/2016 đến tháng 01 năm 2017.
2.2. Bố trí thí nghiệm
Thí nghiệm bao gồm 180 gà Ross 308, 1 ngày tuổi được sử dụng trong 3 đợt thí nghiệm. Mỗi đợt, 60 gà được phân ngẫu nhiên thành 2 nhóm. Nhóm 1 được nuôi bằng khẩu phần cơ sở (không được bổ sung probiotic); nhóm 2 được cho ăn khẩu phần cơ sở có bổ sung Neoavi GroMax 300g/1 tấn thức ăn.
Khẩu phần ăn được cân đối trên cơ sở 3 khẩu phần ăn dành cho 3 giai đoạn của gà siêu thịt từ 1 đến 14 ngày tuổi (DM 88,43%, Protein 21,96%, ME 3068 Kcal/kg, Ash 3,80%); từ 15 đến 28 ngày tuổi (DM 88,49%, Protein 19,01%, ME 3072 Kcal/kg, Ash 3,45%) và gia đoạn từ 29 ngày tuổi đến xuất bán (DM 88,35%, Protein 18,90%, ME 3161 Kcal/kg, Ash 3,43%). Công thức thức ăn sử dụng cho nhóm đối chứng (nhóm 1) là khẩu phần cơ sở có chứa BMD (ở cả ba giai đoạn) và chất chống cầu trùng Diclazuril (ở hai giai đoạn đầu) đây là 3 mã thức ăn dùng cho gà siêu thịt đang được thương mại trên thực tế. Còn thức ăn dùng cho nhóm 2 được xây dựng trên cơ sở khẩu phần cơ sở chỉ thay thế BMD bằng Neoavi GroMax 0,3%.
Tất cả gà thuộc 2 nhóm được phòng bệnh theo chương trình vacxin của gà thịt.
2.3. Phương pháp đánh giá các chỉ tiêu
Các chỉ tiêu năng suất được đánh giá theo Bùi Hữu Đoàn và cs. (2011). Gà được cân kiểm tra khối lượng hàng tuần. Hệ số chuyển hóa thức ăn được tính toán dựa trên lượng thức ăn thu nhận hàng ngày.
Kết thúc thí nghiệm ở 45 ngày tuổi, 6 gà/nhóm được mổ để lấy mẫu chất chứa trong manh tràng, kết tràng và trực tràng để xác định mật độ (Log CFU/g) của vi khuẩn
ISO/Dis 11290/1994 và ISO 4833/2003
Tiêu bản vi thể mẫu (trong formalin 10%) được làm theo quy trình chuẩn. Hình thái biểu mô ruột trên tiêu bản nhuộm HE được quan sát với kính hiển vi Kniss MBL-2000T (Olympus, Japan). Chiều cao và chiều rộng lông nhung biểu mô ruột được đo bằng phần mềm Infinity Analysis.
2.4. Phương pháp phân tích số liệu
Tất cả số liệu thí nghiệm được phân tích bằng phần mềm thống kê SAS 9.1. Sai khác có ý nghĩa được xác định bằng Duncan’s Multiple Range Test.
3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1. Ảnh hưởng của Neovia GroMax đến tăng khối lượng gà
Khối lượng gà thí nghiệm được xác định vào các ngày tuổi 1; 17; 28 và 45. Kết quả (hình 1) cho thấy sau nở (ngày tuổi 1), gà ở cả hai nhóm có khối lượng khoảng 40g.
Trong 45 ngày theo dõi, tốc độ tăng khối lượng của nhóm gà được bổ sung chế phẩm Neoavi GroMax và nhóm đối chứng tương đương nhau, đạt 2691g (với nhóm đối chứng) và 2803g (nhóm được bổ sung NeoAvi GroMax. Tương tự, tại thời điểm 14, 28 ngày tuổi, các giá trị khối lượng cơ thể của gà được bổ sung chế phẩm đều cao hơn so với nhóm gà đối chứng. Tuy nhiên, sai khác này không có ý nghĩa.
Hình 1. KL gà Ross 308 ĐC và bổ sung chế
phẩm Neoavi GroMax Hình 2. TKL của gà Ross 308 ĐC và bổ sung chế phẩm Neoavi GroMax
Chỉ số tăng khối lượng trung bình của gà của hai nhóm trong hai tuần đầu, tương đương nhau (28,15g/con/ngày của nhóm đối chứng và 29,16g/con/ngày của nhóm thí nghiệm). Hai tuần tiếp theo (15 đến 28 ngày tuổi), gà nhóm được bổ sung chế phẩm có tốc độ tăng khối lượng cơ thể cao hơn gà đối chứng (84,94 g và 79,48g; P<0,05). Từ tuần 29 đến 45 ngày tuổi, tốc độ tăng khối lượng của hai nhóm gà tương đương nhau.
Như vậy có thể thấy chế phẩm có tác dụng rõ đến sinh trưởng của gà Ross 308 từ 15 đến 28 ngày tuổi (hình 2).
Một số tác giả đã chứng minh Bacillus subtilis và Lactobacillus reuteri trong probiotic cải thiện tăng trọng gà thịt (Khaksefidi và ctv, 2006; Liu và ctv, 2007). Nghiên cứu của Mountzouris và ctv (2007) cho thấy Pediococcus, Enterococcus, Lactobacillus và Bifidobacterium làm giảm trị số FCR. Nghiên cứu trước đây của Phạm Kinh Đăng và cs.
(2016) cũng đã đánh giá tác dụng NeoAvi GroMax thấy chế phẩm này cải thiện khả năng tăng trọng và hệ số chuyển hóa thức ăn của gà Ri Ninh Hòa trong 13 tuần thí nghiệm, Với gà Ross 308 trong thí nghiệm này, tác dụng cải thiện tăng trưởng chỉ thấy rõ ở gà 16 đến 28 ngày tuổi; hệ số chuyển hóa thức ăn được cải thiện ở hai tuần đầu sau nở. Như vậy, yếu tố giống và độ tuổi gà có thể ảnh hưởng đến tác dụng của probiotic.
3.2. Ảnh hưởng của Neovia GroMax đến thu nhận thức ăn của gà thí nghiệm Khả năng thu nhận thức ăn (g/con/ngày) của hai nhóm gà tăng theo tuổi và khối lượng cơ thể. Trong hai tuần đầu sau nở, chỉ số này ở nhóm đối chứng là 43,14; nhóm được bổ sung Neoavi GroMax là 38,2 g/con/ngày. Tuy nhiên, sai khác này không có ý nghĩa thống kê. Hai tuần tiếp theo, thu nhận thức ăn của cả hai nhóm tăng xấp xỉ hai lần so với hai tuần đầu (tương ứng là 79,38 và 78, 67). Mức độ tăng lượng thức ăn thu nhận thấp hơn ở hai tuần tiếp theo. Không có sự sai khác giữa hai nhóm gà thí nghiệm (hình 3).
Hình 3. Thu nhận thức ăn gà Ross 308 Hình 4. Tỷ lệ chuyển hóa thức ăn của gà
Neoavi GroMax Neoavi GroMax
Hệ số chuyển hóa thức ăn (FCR) trong hai tuần sau nở của nhóm đối chứng là 1,53 cao hơn của nhóm được bổ sung chế phẩm (1,24) (hình 4). Như vậy, trong giai đoạn này Neoavi GroMax có khả năng làm tăng hiệu quả sử dụng thức ăn cua gà con. Trong hai tuần tiếp theo, FCR của nhóm đối chứng vẫn cao hơn của nhóm bổ sung chế phẩm (các giá trị tương ứng là 1,48 và 1,38). Tuy nhiên, sai khác này không có ý nghĩa thống kê.
Hai tuần cuối cùng, FCR của hai nhóm tương đương nhau.
3.3. Ảnh hưởng của Neovia GroMax đến số lượng một số vi khuẩn đường ruột Tổng số vi khuẩn trong chất chứa ruột già là những chỉ tiêu quan trọng đánh giá tác dụng của chế phẩm probiotic.
Bảng 1. Số lượng một số vi khuẩn trong chất chứa đường ruột gà thí nghiệm Vị trí
mẫulấy
Vi khuẩn (Log10
CFU/g)
Số lượng (Log10
CFU/g)
ĐC BSCPNG
Manh tràng
E.coli 4,43 ±
0,73 4,30
±0,79 C. perfringens 4,44 ±
1,01 4,29 ± Lactobacillus 5,57 ± 0,88
0,56 5,01 ± Vi khuẩn tổng 0,77
số 5,21 ±
0,77 4,64 ± 0,89
Kết tràn g
E.coli 7,35 ±
0,50a 6,02 ± 0,75b C. perfringens 6,63 ±
1,70 6,17 ± Lactobacillus 4,72 ± 1,72
0,74 4,80 ± Vi khuẩn tổng 1,01
số 7,75 ±
1,01a 6,04 ± 0,63b
Trực tràng
E.coli 5,00 ±
0,72 4,57 ± C. perfringens 5,89 ± 0,56
1,09 5,10 ± Lactobacillus 5,99 ± 0,85
0,33 5,79 ± Vi khuẩn tổng 1,20
số 6,21 ±
0,99 5,79 ± 0,29
Ghi chú: Các số trong cùng một hàng mang các chữ cái khác nhau thì sai khác có ý nghĩa thống kê (P<0,05)
Các chỉ tiêu vi khuẩn đường ruột bao gồm số lượng vi khuẩn E. coli, số lượng vi khuẩn C. perfringens, tổng số Lactobacillus spp. và tổng số vi khuẩn hiếu khí trong chất chứa manh tràng và trực tràng của nhóm gà đối chứng và nhóm được bổ sung NeoAvi GroMax không có sự khác biệt. Chế phẩm này cũng không có tác dụng đến số lượng C.
perfringens và Lactobacillus spp. trong kết tràng. Tuy nhiên, tổng số E. coli và tổng số vi khuẩn tổng số trong chất chứa kết tràng của nhóm gà được bổ sung Neoavi GroMax thấp hơn trong chất chứa kết tràng nhóm gà đối chứng (P<0,05); tỷ lệ giảm tương ứng là 18% và 22%.
Mountzouris và ctv (2010) và Alkhalf và ctv (2010) cùng nhiều tác giả khác cho rằng tác dụng của probiotic có thể do khả năng điều hòa miễn dịch và hỗ trợ các vi sinh vật có lợi trong hệ vi sinh vật đường ruột, cải thiện khả năng biến đổi thức ăn và hấp thu chất dinh dưỡng của vật chủ. Các nghiên cứu khác nhau cho những kết quả không thống nhất về tác động của vi khuẩn trong probiotic đến hệ vi khuẩn đường ruột. Phạm Kim Đăng và cs. (2016) cho thấy NeoAvi GroMax ảnh hưởng tích cực đến vi khuẩn đường ruột, giảm số lượng E.coli và Salmonella spp. ở hồi tràng; tăng số lượng Lactobacillus spp, giảm số lượng E.coli và Salmonella spp. trong phân. Nghiên cứu của Jin và ctv (1996); Li và ctv (2014); Chen và ctv (2013); Zhang và ctv ( 2004) cũng cho thấy tác dụng cải thiện hệ vi khuẩn ở các đoạn ruột khác nhau khi được bổ sung các chủng vi khuẩn probiotic khác nhau. Tác dụng của các vi khuẩn trong probiotic còn thể hiện qua khả năng điều hòa miễn dịch; chống mất năng lượng do các phản ứng miễn dịch từ đó kích thích tăng trưởng (Mountzouris và ctv, 2010; Alkhalf và ctv, 2010). Tác dụng của NeoAvi GroMax thay đổi số lượng E. coli và tổng số vi khuẩn hiếu khí trong kết tràng của gà thí nghiệm là một trong những cơ sở khẳng định tác dụng của chế phẩm này.
3.4. Ảnh hưởng của bổ sung chế phẩm Neovia GroMax đến hình thái và kích thước lông nhung biểu mô ruột non gà thí nghiệm
Lông nhung biểu mô tá tràng và không tràng của gà thuộc lô đối chứng và lô thí nghiệm có phần đỉnh nguyên vẹn, phần kẽ giữa các lông nhung rõ ràng. Rất hiếm thấy lông nhưng đứt nát (hình 5a,b,c,d). Như vậy, niêm mạc ruột non của gà thí nghiệm ở trạng thái tốt, đảm bảo cho quá trình tiêu hóa thức ăn, hấp thu dinh dưỡng và chức
Chiều cao và chiều rộng lông nhung tá tràng của gà được bổ sung NeoAvi GroMax và của nhóm gà đối chứng không có sai khác (bảng 2). Kết quả đo kích thước lông nhung không tràng cho thấy nhóm gà được bổ sung chế phẩm có lông nhung cao hơn gà đối chứng (tỷ lệ tăng chiều cao lông nhung là 23%). Ngược lại, chế phẩm có tác dụng làm giảm chỉ số chiều rộng lông nhung tá tràng (tỷ lệ giảm 24%).
Hình 5a. Lông nhung tá tràng gà
đối chứng (HEx100)
Hình 5b. Lông nhung tá tràng gà
bổ sung Neoavi GroMax (HEx100)
Hình 5c. Lông nhung không tràng gà đối chứng (HEx100)
Hình 5d. Lông nhung không tràng gà bổ sung Neoavi GroMax
(HEx100)
Biểu mô ruột đóng vai trò quan trọng trong tiêu hóa, hấp thu và miễn dịch. Diện tích bề mặt biểu mô toàn vẹn và có diện tích lớn sẽ đảm bảo cho các chức năng trên. Chiều cao và chiều rộng của lông nhung là những chỉ tiêu đánh giá chức năng này (Erfani và ctv, 2013). Theo Chichlowski và ctv (2007), probiotic chứa Lactobacilli bifidobacterium ther-mophilum và Enterococcus faecium làm tăng chiều cao lông nhung không tràng ở gà thịt. Chiều cao của lông nhung còn liên quan đến các độc tố (Awad và ctv, 2006).
Nhiều chế phẩm probiotic và symbiotic có tác dụng làm tăng chiều cao lông nhung biểu mô niêm mạc ruột (Erfani và ctv 2013). NeoAvi GroMax làm tăng chiều cao, chiều rộng lông nhung tá tràng và không tràng gà Ri Ninh Hòa (Phạm Kim Đăng và cs. (2016). Tuy nhiên, trong nghiên cứu này, kích thước lông nhung tá tràng không thay đổi dưới tác dụng của chế phẩm. Đặc biệt, chiều rộng lông nhung tá tràng giảm ở gà được bổ sung NeoAvi GroMax. Theo nhiều nghiên cứu, lông nhung cao và hẹp mà toàn vẹn có chức năng hấp thu và bảo vệ tốt hơn những lông nhung thấp và rộng.
Bảng 2. Kích thước lông nhung biểu mô niêm mạc ruột non gà thí nghiệm Vị trí
đo KT
nhunglông (mm)
chứngĐối BS NeoAvi GroMax Tá tràng
Cao 1,27±0,
125 1,36±0, Rộng 0,29± 26
0,04 0,33±0.
09 Không
tràng
Cao 0,69±0,
03a 0,85±0, 04b Rộng 0,25+0,
03a 0,19±0, 06b
Ghi chú: Các số trong cùng một hàng mang các chữ cái khác nhau thì sai khác có ý nghĩa thống kê với P<0,05
Ở gà, hệ tiêu hóa gần như được hoàn chỉnh trong thời kỳ phôi và phát triển nhanh hơn các hệ cơ quan khác, hoàn thiện chức năng trong vài ngày sau nở (Iji và ctv, 2001).
Đặc điểm phát triển này đóng vai trò quan trọng đối với tăng trưởng và chuyển hóa thức ăn nhưng chịu ảnh hưởng của nhiều yếu tố như dinh dưỡng, vi sinh vật gây bệnh và các stress môi trường (Faria và ctv, 2005).
Tác dụng của NeoAvi GroMax với lông nhung biểu mô ruột non cùng với thay đổi một số chỉ tiêu vi khuẩn đường ruột là cơ sở cho tác dụng cải thiện chức năng tiêu hóa, khả năng tăng trưởng và sức đề kháng của gà và, quan trọng hơn, có tác dụng “chuẩn bị”
cho các giai đoạn sau.
4. KẾT LUẬN
Neovia GroMax có tác dụng cải thiện tỷ lệ chuyển hóa thức ăn 2 tuần sau nở và khả năng tăng trưởng trong giai đoạn 15 đến 28 ngày tuổi của gà Ross 308.
Chế phẩm làm giảm số lượng vi khuẩn E.coli và tổng số vi khuẩn hiếu khí trong chất chứa kết tràng.
Kích thước lông nhung biểu mô không tràng của gà được cải thiện khi được bổ sung Neoavi GroMax từ đó có thể làm tăng hiệu quả hấp thu thức ăn, là cơ sở cho tăng cường chức năng miễn dịch của niêm mạc ruột.
TÀI LIỆU THAM KHẢO
1.Alkhalf A., Alhaj M. and Al-homidan I (2010), Influence of probiotic supplementation on blood parameters and growth performance in broiler chickens. Saudi J. Biol. Sci.., 17: 219-225.
2.Ahmed S.T., Hoon J., Mun HS. and Yang C.J. (2014), Evaluation of Lactobacillus and Bacillus-based probiotics as alternatives to antibiotics in enteric microbial challenged weaned piglets. Americam Journal of Microbiology