Chương 2. VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.1. Vật liệu nghiên cứu
Thức ăn nuôi rầy: Mạ khay - giống lúa TN1( Taichung Native 1), 5-10 ngày tuổi.
2.1.2 Sâu hại
- Rầy lưng trắng thí nghiệm: Bắt rầy trưởng thành ở các địa phương cần nghiên cứu đưa về phòng nhân nuôi, dùng rầy cái trưởng thành 2 ngày tuổi ở thế hệ F2 làm thí nghiệm thử tính kháng thuốc.
- Rầy mẫn cảm: nguồn rầy mẫn cảm được nhập về từ Nhật Bản và được nhân nuôi cách ly với các hoá chất tại phòng thí nghiệm Viện BVTV từ 2005.
Hình 2.1. Mạ khay (Thức ăn nuôi rầy lưng trắng - Giống lúa TN1)
Hình 2.2. Lồng nhân nuôi các quần thể rầy lưng trắng nghiên cứu 2.1.3 Dụng cụ và thiết bị thí nghiệm
- Dụng cụ thu thập mẫu: ống hút rầy, được thiết kế chuyên dùng cho hút rầy ở ngoài đồng ruộng cũng như trong phòng thí nghiệm; lồng lưới nuôi rầy bao gồm cả khay gieo lúa để khi thu thập rầy có sẵn nguồn thức ăn.
- Dụng cụ nhân nuôi côn trùng: Lồng lưới bao gồm lồng to có kích thước (60 x 60 x 120) cm, các lồng lưới nhỏ có kích thước (40 x 40 x 60) cm, (30 x 30 x 30) cm, khay gieo mạ, giá thể, ống tuýp, điều hòa nhiệt độ, các dụng cụ đo nhiệt độ, độ ẩm v.v..
- Dụng cụ thử tính kháng thuốc: Bộ micropipettes các loại có thể hút chớnh xỏc tới 10 àl, lọ thủy tinh, bỡnh CO2 (SGA) để gõy mờ rầy trưởng thành, đĩa petri, bút lông, hộp nhựa (được thiết kế thoáng khí để có thể nuôi được rầy nâu sau khi xử lý thuốc tối thiểu 1 ngày), kính lúp cầm tay v.v..
QUẦN THỂ RLT ĐẠI ĐỒNG, THẠCH THẤT
QUẦN THỂ RLT HẢI BỐI, ĐÔNG ANH
QUẦN THỂ RLT CỔ BI, GIA LÂM
- Dụng cụ phục vụ cho thiết kế và điều tra thí nghiệm ngoài đồng ruộng:
Khay tráng dầu, ống hút, dây, cọc tre, bình bơm tay đeo vai 16 lít, cốc đong, bô can thủy tinh và một số dụng cụ để pha thuốc trừ sâu có độ chính xác cao.
- Cân phân tích: Cân phân tích Mettler toledo AG 245 (có độ chính xác đến 10-5), dùng cân trọng lượng rầy và cân thuốc thử nghiệm.
2.1.4 Hóa chất nghiên cứu
* Các hoạt chất thuốc thử nghiệm tính kháng của rầy lưng trắng ở trong phòng thí nghiệm là dạng thuốc kỹ thuật có độ tinh khiết > 95%. Bao gồm 3 thuốc kỹ thuật sau:
+ Fenobucarb dạng kỹ thuật 98%. Thuốc thuộc nhóm độc II (WHO), thuộc nhóm Carbamate, thuốc tác dụng ức chế enzim Cholinesterase trong hệ thần kinh côn trùng. Thuốc có tác dụng tiếp xúc và vị độc, diệt trừ sâu có miệng chích hút [6].
+ Fipronil dạng kỹ thuật là 95%. Thuốc thuộc nhóm độc II (WHO), thuộc nhóm Phenylpyrazole. Thuốc ức chế hoạt động của GABA (Gamma Amino Butyric Axit) một amino axit có trong hệ thần kinh trung ương, nhất là trong não. Amino axit này hoạt động như một chất ức chế dẫn truyền thần kinh. Thuốc có tác dụng tiếp xúc và vị độc [6].
+ Thiamethoxam dạng kỹ thuật 97%. Thuốc thuộc nhóm độc III (WHO), thuộc nhóm Neonicotinoid. Trong cơ thể côn trùng thuốc không bị phân ly, dễ dàng xâm nhập vào hệ thần kinh trung ương; tác động như một chất đối kháng bằng cách gắn với những thụ quan nicotenic sau khớp thần kinh trong hệ thần kinh trung ương côn trùng. Thuốc trừ sâu nội hấp, có tác động tiếp xúc và vị độc. [6].
* Thuốc được dùng để xử lý hạt giống là: Cruiser Plus 312.5FS (Thiamethoxam 262.5g/l + Difenoconazole 25g/l + Fludioxonil 25g/l
* Hóa chất được sử dụng trong thí nghiệm pha loãng nồng độ các thuốc kỹ thuật dùng cho thử nghiệm: Acetone (CH3OH) do Merck (Đức) sản xuất và 3 hoạt chất có độ tinh khiết > 95% để thử nghiệm tính kháng.
* Các thuốc được sử dụng trong thử nghiệm trên đồng ruộng bao gồm các thuốc sau:
+ Thuốc thương phẩm có hoạt chất Fipronil (Regent 800WG: chứa 800 g hoạt chất Fipronil/ 1kg thương mại).
+ Thuốc thương phẩm có hoạt chất Fenobucarb (Bassa 50EC: chứa 500 g hoạt chất Fenobucarb/llít thương mại).
+ Thuốc thương phẩm có hoạt chất Thiamethoxam (Actara 25WG: chứa 250 gr hoạt chất Thiamethoxam/ 1kg thương mại)
+ Thuốc có hoạt chất Buprofezin thuộc nhóm điều hoà sinh trưởng côn trùng (IGR): tác động đến quá trình lột xác của sâu hại (ức chế tổng hợp kitin, ức chế hormon lột xác để chuyển sang giai đoạn phát triển khác của sau hại).
Thuốc thương phẩm được dùng trong thí nghiệm là Butyl 10EC (chứa 100 g hoạt chất Buprofezin/ 1kg thương mại).
+ Thuốc hỗn hợp: Penalty gold 50EC (chứa 40% Chlorpyrifos Ethyl + 10% Buprofezin).
Hình 2.4. Các hoá chất thí nghiệm