V.2.1.ăMôiătr ng KIA (KLigler Iron Agar)
C ch môi tr ng
Môi tr ng KIA đ c s d ng đ nuôi c y tr c ti p cho tr c khu n Gram âm lên men đ ng glucose, đây là đ c đi m c b n trong phân lo i b c đ u c a các tr c khu n Gram âm. Môi tr ng này c ng đ ng th i th tính lên men đ ng lactose, sinh h i trong quá trình lên men carbonhydrat và sinh H2S. Khi c y vi sinh v t lên mơi tr ng này có 3 tr ng h p x y ra:
Ch s d ng đ ng glucose: acid (màu vàng) ph n đ ng và ki m (màu đ ) ph n nghiêng c a môi tr ng.
S d ng c glucose và lactose: acid (màu vàng) ph n đ ng và acid (màu vàng) ph n nghiêng c a môi tr ng.
Không s d ng glucose, lactose: ki m (màu đ ) ph n đ ng và ki m (màu đ ) ph n nghiêng môi tr ng. Vi sinh v t bi n d ng peptone đ thu l y n ng l ng v t ch t cho s t ng tr ng.
Kh n ng sinh H2S: do trong mơi tr ng có sodium thiosulfat, vi sinh v t kh sulfat có th kh ch t này, nh có enzyme thiosulfat reductase đ gi i phóng H2S, H2S s ph n ng v i ion Fe2+ c a ch th ferric ammonium citrate t o k t t a màu đen FeS.
N u có s lên men đ ng t o s n ph m khí, thì s k t t thành b t khí trong ng nghi m, mơi tr ng b chia c t ho c đ y môi tr ng lên kh i đáy ng.
Thành ph n môi tr ng(g/l)
Pepton (ngu n cacbohydrat)
lactose/glucose=10/1
d n xu t l u hu nh .
ch t ch th đ phenol
mu i s t c ng v i thiosunfate natri.
Cách pha môi tr ng
53,5g b t mơi tr ng+1lít n c c t, n u sôi h n h p trên 1000C trong kho ng th i gian kho ng 2-5 phút,sau đó ti n hành phân l p vào tube (100tube-kho ng 5ml/tube) ,ti n hành h p kh trùng trong thi t b autoclave 1210C trong 15 phút ,sau đó đem ra nghiên 200C-đ ngu i.