CHƢƠNG 5 : THỰC NGHIỆM
5.1 Điều chế các loại cao
5.1.1 Chuẩn bị nguyên liệu
Mẫu rau má lá sen Hydrocotyle bonariensis L. đƣợc thu hái tại thành phố Mỹ Tho, tỉnh Tiền Giang với khối lƣợng tƣơi ban đầu đã qua các cơng đoạn xử lý, làm sạch khoảng 87 kg.
Tách riêng phần rễ, thân, lá rau má đem phơi nhẹ trong mát đến ráo nƣớc và sấy ở 45-50C đến khơ. Ở đề tài này chúng tơi chủ yếu khảo sát trên thân và lá cây.
Xay nhuyễn nguyên liệu sau khi sấy thu đƣợc 6,7 kg bột thân và lá cây. Phần trăm độ ẩm trong cây rau má lá sen là
% độ ẩm trong cây =
Hình 18 : Rau má lá sen khi phơi khơ và bột lá, thân cây
87 – 6,7
5.1.2 Điều chế cao alcol tổng
Bột cây đƣợc cho vào các túi vải nhỏ, buộc kín miệng túi và ngâm trong bình thủy tinh cĩ nắp đậy với lƣợng vừa đủ metanol sao cho dung mơi ngập ƣớt các túi vải. Sau thời gian khoảng 12 giờ/mỗi lần ngâm thu lấy dịch chiết, lọc qua giấy lọc và đem cơ quay thu hồi dung mơi. Cứ thế lặp lại quá trình này nhiều lần đến khi chiết kiệt hết các chất trong nguyên liệu bột cây và loại bỏ phần bã cịn lại. Tiến hành cơ quay đuổi dung mơi chúng tơi thu đƣợc cao metanol tổng màu xanh đen với khối lƣợng 700 g.
Hiệu suất điều chế cao metanol tổng:
Hình 19: Cao Me tổng trƣớc và sau khi cơ quay
5.1.3 Điều chế các cao cĩ độ phân cực tăng dần từ cao metanol tổng
Trong đề tài này chúng tơi quyết định chọn phƣơng pháp chiết rắn-lỏng bằng sắc ký cột nhanh để tiến hành điều chế các cao theo độ phân cực tăng dần từ cao metanol tổng nhằm khắc phục hiện tƣợng xuất hiện nhũ tƣơng do lắc nhiều lần của phƣơng pháp trích ly lỏng-lỏng. 45 , 10 100 6700 700 H %
Điều chế cao PE
Chuẩn bị phễu lọc với chất hấp phụ và một hệ thống tạo áp suất kém để thực hiện quá trình chiết. Cao metanol tổng ban đầu sau khi tiền hấp phụ đƣợc cho vào phễu chiết một cách cẩn thận và trải đều trên bề mặt chất hấp phụ. Sau đĩ đặt một lớp bơng gịn lên bề mặt phễu nhằm tránh sự xáo trộn bề mặt khi rĩt dung mơi làm ảnh hƣởng đến hiệu quả chiết tách, tiếp đĩ cho hệ thống bơm chân khơng hoạt động và tiến hành giải ly bằng PE. Kết thúc quá trình giải ly bằng cách kiểm tra trên SKLM khi khơng cịn vết hoặc nhỏ lên mặt kính đồng hồ, cho bay hết dung mơi thấy khơng cịn để lại vết mờ. Tập trung dịch chiết, cơ quay đuổi dung mơi thu đƣợc cao eter dầu hỏa với khối lƣợng là 200 g.
Hiệu suất trích cao PE từ cao alcol tổng:
H% = 700 100 200 28,57% Điều chế cao C
Sau khi giải ly sắc ký bằng dung mơi PE và thu dịch chiết cao PE, ta tiếp tục cho giải ly cột với dung mơi cloroform, tiếp tục cho máy bơm chân khơng hoạt động và thực hiện kiểm tra nhƣ trên để kết thúc quá trình giải ly. Cơ quay dịch chiết thu đƣợc 60 g cao C từ cao metanol tổng ban đầu.
Hiệu suất trích cao C từ cao alcol tổng:
H%= 700 100 60 8,57% Điều chế cao Ea
Sau khi rĩt dịch chiết C chứa trong bình tam giác ra, gắn phễu vào hệ thống, và cho giải ly với dung mơi etyl acetate, sau đĩ cho máy bơm hoạt động. Chờ cho dung mơi đƣợc rút xuống bình tam giác và phễu khơ tƣơng đối thì ngắt áp suất, thực
hiện kiểm tra tƣơng tự nhƣ đối với các cao trên rồi rĩt phần dịch chiết ra để cơ quay đuổi dung mơi. Thu đƣợc 85 g cao Ea.
Hiệu suất trích cao Ea từ cao alcol tổng:
H%=
700 100 85
12.14%
Cao Ea đƣợc chia làm ba phân đoạn với khối lƣợng lần lƣợt nhƣ sau 28 g, 30 g, 27 g. Trong đề tài này, chúng tơi thực hiện trên phân đoạn thứ ba, cao Ea3 khối lƣợng là 27 g.
Điều chế cao Me
Cuối cùng, sử dụng dung mơi metanol để giải ly sắc ký và chiết kiệt các chất trong cao metanol tổng ban đầu. Thực hiện các thao tác nhƣ trên chúng tơi thu đƣợc cao Me cuối là 300 g.
Hiệu suất trích cao Me cuối từ cao alcol tổng:
H% =
700 100 300
42.86%
Hiệu suất điều chế tất cả các cao từ cao alcol tổng:
H% =
Các quá trình điều chế các cao trên cĩ thể đƣợc tĩm tắt theo hình 21. 200 + 60 + 87 + 300
Hình 20: Điều chế cao bằng phƣơng pháp trích ly rắn-lỏng