Quy trình nhân giống sản xu t của n m mốc Aspergillus oryzae đƣợc trình ày nhƣ hình 3.6
36
Hình 3.6 Quy trình nhân giống n m mốc Aspergillus oryzae c p 1 và c p 2 theo thời gian
A- Nhân giống c p 1 sau 24h; B- Nhân giống c p 2 sau 24h; C- Nhân giống c p 2 sau 48h; D- Nhân giống c p 2 sau 72h; E- Giống sản xu t
A B
C D
37
Độ ẩm là một yếu tố quan trọng trong q trình ni c y n m mốc mà thực ch t là hoạt độ nƣớc [20, 23]. Trong khảo sát này, độ ẩm môi trƣờng nhân giống sơ c p 1 và sơ c p 2 là 52% (đo ằng máy đo độ ẩm MB25 thuộc phịng NC&PTSP cơng ty cổ phần Nosafood) độ ẩm môi trƣờng nuôi c y n m mốc trong nghiên cứu này lớn hơn độ ẩm môi trƣờng dùng cho n m mốc Aspergillus oryzae 3.042 của J.Feng và
cộng sự [57] là 35%, sự khác biệt này có thể là do chủng loại n m mốc sử dụng khác nhau.
Mật độ tế bào nấm mốc Aspergillus oryzae trên 1g giống sản xuất 3.2.2
Quá trình xác định mật độ tế bào của giống sản xu t đƣợc tiến hành nhƣ sơ đồ quy trình hình 2.2, giống sản xu t đƣợc pha loãng đến các nồng độ 10-5, 10-6, 10-7 và mật độ tế bào n m mốc đƣợc xác định nhƣ ảng 3.2.
Bảng 3.2 Kết quả xác định mật độ tế bào n m mốc trên 1g giống sản xu t/môi trƣờng PGA
Nồng độ pha loãng 10-5 10-6 10-7
Lần 1 138 78 55
Lần 2 142 81 50
Lần 3 150 91 48
Mật độ tế bào n m mốc Aspergillus oryzae tính theo cơng thức (2-1) dùng để thực
hiện các khảo sát tiếp theo là 3×108
(CFU/g giống sản xu t).
Các yếu tố ảnh hƣởng đến quá trình lên men nấm mốc Aspergillus oryzae 3.3
Xác định tỷ lệ nấm mốc Aspergillus oryzae sử dụng 3.3.1
Tiến hành khảo sát tỷ lệ giống mốc sản xu t ở các mức 0,5%, 1,0% và 1,5 % so với nguyên liệu đậu đen theo sơ đồ bố trí thí nghiệm tổng qt hình 2.4. Kết quả khảo sát tỷ lệ n m mốc Aspergillus oryzae sử dụng so với nguyên liệu đậu đen đƣợc thể hiện nhƣ ảng sau:
38
Bảng 3.3 Tỷ lệ mốc giống sử dụng và hàm lƣợng protein hòa tan
Tỷ lệ nấm mốc Aspergillus oryzae (%) Mật độ tế bào giống (CFU) Hàm lƣợng protein hòa tan (%) 0,5 7,5×108 2,01a ± 0,63 1,0 15×108 2,92b ± 0,16 1,5 22,5×108 2,90b ± 0,09
(Số liệu trình bày dạng Mean ± SD, các chỉ số mũ a, b biểu thị sự khác biệt có ý nghĩa của các nghiệm thức khảo sát theo kiểm định LSD ở mức độ tin cậy 95%).
Từ bảng 3.3 đồ thị thể hiện mối quan hệ giữa tỷ lệ giống mốc sử dụng so với nguyên liệu đậu đen nghiên cứu đƣợc thể hiện nhƣ hình 3.7
Hình 3.7 Đồ thị thể hiện tỷ lệ giống và hàm lƣợng protein hòa tan thu đƣợc Từ bảng kết quả 3.3 và đồ thị hình 3.7, cho th y ở nồng độ n m mốc Aspergillus