- Chọn cây biểu hiện gen chuyển nạp (cây chuyển gen)
3 Mô tả và nhận biết giống cây trồng
3.1 Nguyên tắc và phương pháp xác ựịnh một số tắnh trạng quan trọng ựể nhận biết
giống cây trồng
Nguyên tắc
để mô tả nhân nhận biết giống cần trồng trọt trong ựiều kiện môi trường ựồng ựều và kỹ thuật phù hợp
Số lượng mẫu ựủ lớn ựể ựại diện cho quần thể giống Phương pháp lấy mẫu phải chắnh xác
Áp dụng phương pháp xác ựịnh phù hợp cho tắnh trạng hoặc ựặc ựiểm cần mô tả nhận
biết
3.2 Phương pháp ựánh giá và xác ựịnh tắnh trạng và ựặc ựiểm của giống
đánh giá trực tiếp: Là phương pháp ựo, ựếm, quan sát, phân tắch trực tiếp các tắnh
trạng và ựặc ựiểm của giống. Vắ dụ ựánh giá tắnh trạng chiều cao cây, số lá, tuổi thọ của lá, số quả trên cành, số hạt hàm lượng Amylose, protein, ựộ ựường, vitamin.. bằng quan sát ựo
ựếm trực tiếp trên ựồng ruộng hay phân tắch trong phòng thắ nghiệm.
đánh giá gián tiếp: đánh giá tắnh trạng cần ựánh giá thông qua một tắnh trạng khác
vắ dụ ựánh giá tắnh chống ựổ thông qua ựường kắnh gốc thân, tỷ lệ khối lượng bộ phân trên mặt ựất và phần gốc. Phương pháp ựánh giá gián tiếp ựộ chắnh xác không cao nên cần có phương pháp chuẩn mực ựảm bảo ựộ chắnh xác trong quá trình ựánh giá
đánh giá tự nhiên: ựánh giá giống trực tiếp gieo trồng trong ựiều kiện sinh thái
thắch hợp ựể ựánh giá . Vi dụ trồng trong ựiều kiện hạn ựể ựánh giá tắnh chịu hạn, trồng trong ựiều kiện mặn ựể ựánh giá tắnh chịu mặn.
đánh giá nhân tạo: Sử dụng các phương pháp tạo ra ựiều kiện ựể ựánh giá. Thơng
qua các biện pháp hố học kỹ thuật ựể ựánh giá vắ dụ ựánh giá khả năng chịu hạn của lúa bằng xử lý KClO3 với hạt, rễ mạ ựể ựánh giá.
đánh giá ở các vùng sinh thái khác nhau: đánh giá nhận biết giống ở các vùng sinh
thái khác nhau với mục tiêu tìm ra vùng sinh thái tối ưu cho vật liệu chọn giống ựồng thời rút ngăn thời gian ựánh giá cũng như q trình chọn tạo giống
Ứng dụng cơng nghệ sinh học ựánh giá giống : ứng dụng phương pháp RAPD
(Randomly Emplifield Polymorphic DNA). Các ựoạn DNA ựặc trưng cho kiểu gen của ựối tượng nghiên cứu ựược khuyếch ựại về số lượng bằng kỹ thuật PCR ( Polymerase Chain Reaction) Các mẫu cùng lồi có kiểu gen khác nhau sẽ khuyếch ựại các ựoạn có kắch thước giống nhau khi sử dụng bất kỳ mồi ngẫu nhiên nào ựể chạy PCR. Sau khi khuyếch ựại bằng PCR người ta ựiện di ựể ựọc kết quả PCR Dựa vào kỹ nghệ này sẽ so sánh mẫu giống với một mẫu tiêu chuẩn. Vắ dụ ựánh giá tắnh chống chịu bạc lá của giống ứng dụng với lúa có thể so sánh với các giống chống bạc lá ựã xác ựịnh ựể kết luận giống có khả năng chống bệnh bạc lá hay khơng? ( Taq Polymerase là một loại DNA Polymerase chịu nhiêt lấy từ vi khuẩn Thermocellus quaticus ựược dùng ựể tổng hợp các ựoạn DNA mới trong môi trường dư thừa 4 deoxynucleotid và hai ựoạn mồi)
3.3 Phương pháp lấy mẫu ựánh giá
Lượng mẫu và cỡ mẫu ựánh giá cần ựảm bảo theo mẫu thống kê n ≥ 30, lượng mẫu quy ựịnh cho mỗi tắnh trạng khác nhau. Với những mẫu nhỏ lượng mẫu theo dõi
ựánh giá cả ô hay cả hàng, mẫu lớn có thể lấy mẫu thống kê, mẫu ngẫu nhiên ựể ựánh giá
giống
Vắ dụ : đánh giá năng suất giống với các vật liệu là giống trong giai ựoạn thắ nghiệm so sánh bằng thu hoạch tồn bộ ơ thắ nghiệm, Nhưng giai ựoạn khu vực hố có thể thu mẫu thơng kê ựể ựánh giá.
3.4 Thời ựiểm ựánh giá
Mỗi tắnh trạng, mỗi phương pháp ựánh giá cho kết quả chắnh xác ở một giai ựoạn sinh trưởng nhất ựịnh của giống. Do vậy tuỳ tắnh trạng và phương pháp ựể xác ựịnh thời
ựiểm ựánh giá phù hợp là thời ựiểm mà tắnh trạng hay ựặc ựiểm ựánh giá biểu hiện rõ và ựiển hình nhất.
Vắ dụ ựánh giá chiều cao cây phải ựánh giá ở giai ựoạn trỗ cờ ựối với ngô , giai
ựoạn chắn sữa hay chắn sáp ựối với lúa.