CHƯƠNG 4 : KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
4.7. THÍ NGHIỆM 2C: KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA NỒNG ĐỘ MÍT ĐẾN HOẠT
HOẠT TÍNH ENZYME GLUCOAMYLASE, XÁC ĐỊNH ĐỘNG HỌC PHẢN ỨNG ENZYME GLUCOAMYLASE TRÊN CƠ CHẤT MÍT
Ngồi bốn yếu tố nhiệt độ, pH, nồng độ enzyme và thời gian thủy phân ảnh hưởng đến hoạt tính của enzyme glucoamylase, thì yếu tố nồng độ pha lỗng mít cũng có ảnh hưởng rất lớn đến khả năng thủy phân tinh bột của nguyên liệu và chất lượng dịch thu nhận được sau thủy phân. Vì vậy, để thu được dịch sau thủy phân có chất lượng tốt và đạt hiệu quả kinh tế, thí nghiệm tiến hành khảo sát ảnh hưởng của nồng độ pha lỗng mít đến hoạt tính enzyme glucoamylase và xác định động học phản ứng enzyme glucoamylase trên cơ chất mít.
Thí nghiệm được tiến hành với các giá trị nồng độ mít được pha lỗng với nước ở tỉ lệ 0% mít, 5% mít, 10% mít, 15% mít, 20% mít, 25% mít, 30% mít, 35% mít, 40% mít, chọn thời gian thủy phân 20 phút vì thời gian xác định càng ngắn càng tốt. Vì một số enzyme bị ức chế bởi cơ chất ở nồng độ quá cao; hoặc bị giảm hoạt độ nhanh chóng theo thời gian ở nhiệt độ phân tích, thơng thường thời gian xác định hoạt độ từ 5 đến 30 phút. Kết quả thí nghiệm được thể hiện trong bảng 15.
Bảng 15. Hàm lượng đường khử thu được sau quá trình thủy phân bằng enzyme glucoamylase ở các nồng độ mít khác nhau Nồng độ mít (%) Vận tốc phản ứng 0 5 10 15 20 25 30 35 40 0a 17,39b 24,26b 32,05c 35,55cd 35,56cd 40,30d 39,37cd 39,36cd Ghi chú
Các số liệu có cùng chữ cái đi kèm thể hiện sự khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê ở mức độ ý nghĩa 1 %. Chữ số in
Các giá trị ghi trong bảng là kết quả trung bình của 2 lần lặp lại.
Kết quả ở bảng 15 cho thấy, với cùng nồng độ enzyme glucoamylase (0,1%), thời gian thủy phân (20 phút), pH tối ưu 3,6, nhiệt độ tối ưu (54,50C) nhưng với nồng độ mít khác nhau hàm lượng đường khử sinh ra khác nhau và tăng đồng biến với nồng độ mít từ 0 – 30%, có xu hướng giảm ở nồng độ mít trên 30%
Tuy nhiên khi xét về mặt ý nghĩa thống kê ta thấy hàm lượng đường khử thu nhận được khi thủy phân với nồng độ mít 30%, 35%, 40% khơng có sự khác biệt ý nghĩa ở mức 5%, hàm lượng đường khử thu nhận được khi thủy phân ở các nồng độ mít cịn lại có sự khác biệt ý nghĩa ở mức 5%, trừ nồng độ 20%, 25% khác biệt khơng ý nghĩa.
Chứng tỏ có sự ảnh hưởng của nồng độ cơ chất đến phản ứng thủy phân bởi enzyme, hàm lượng đường thu được ở nồng độ 30%, 35%, 40% khác biệt không ý nghĩa do ở nồng độ 35%, 40% quá đặc, enzyme tiếp xúc với cơ chất khó, khơng thủy phân được triệt để dẫn đến vận tốc phản ứng giảm.
Hình 19. Đồ thị biểu diễn sự ảnh hưởng của nồng độ mít hoạt tính enzyme glucoamylase enzyme glucoamylase
Hình 19 cho thấy ở nồng độ 30% vận tốc phản ứng đạt cực đại (vmax= 49,378 ±1,5297). Km= 8,5562 ± 0,9067.
Vmax = 49,3780 ± 1,5297 (IU) Km= 8,5562 ± 0,9067