Chương 5 : BÁO CÁO THÍ NGHIỆM VI SINH VÀ HÓA SINH
5.1 Báo cáo thí nghiệm vi sinh
Mẫu được lấy từ sản phẩm Cá viên nhân phômai của thương hiệu Rich Mama
Bước 1: Chuẩn bị môi trường thạch đếm đĩa
+ Trypton 5,0 g
+ Chất chiết nấm men 2,5 g
+ Dextrose 1,0 g
+ Thạch 15,0 g
+ Nước 1 000 ml
Phân phối môi trường vào các ống hoặc bình thủy tinh có dung tích thích hợp. Khử trùng 15 min ở 121 °C. Chỉnh pH sao cho sau khi khử trùng, pH đạt 7,0 ± 0,2, nếu cần.
Bước 2: Chuẩn bị ống nghiệm chứa dung dịch loãng
+ Lấy 1,25 ml dung dịch gốc thêm nước đến 1 lít. Phân phối vào các chai 90 ml hoặc 99 ml. Khử trùng 15 min ở 121°C.
Bước 3: Chuẩn bị mẫu thử
+ Mẫu được trộn đều để thu được các phần mẫu thử đồng nhất.
Bước 4: Cấy và ủ
+ Dùng các pipet vô trùng để chuẩn bị các dung dịch pha loãng thập từ mẫu đã đồng nhất bằng cách chuyển 10ml dung dịch đã được pha loãng vào 90ml chất pha loãng. Tránh tạo bọt. Lắc các dung dịch pha loãng 25 lần với biên độ 30cm trong 7 giây.
+ Dùng pipet lấy 1ml mỗi dung dịch pha loãng cho vào từng cặp đĩa Petri riêng rẽ, được đánh dấu thích hợp. Nếu sau 3phút mới cấy mẫu thì lắc lại các chai pha lỗng 25 lần với biên độ 30cm trong 7 giây trước khi dùng pipet chuyển phần mẫu thử sang đĩa Petri.
+ Cho vào mỗi đĩa từ 12ml đến 15ml môi trường PCA, đã làm nguội trước về nhiệt độ 44°C đến 46°C, trong vịng 15 phút sau lần pha lỗng đầu tiên. Cho ngay thạch vào các đĩa Petri nếu chất pha lỗng có chứa chất hút ẩm. Rót thạch và nước pha lỗng vào đĩa kiểm chứng cho mỗi dãy mẫu. Trộn ngay các dung dịch pha lỗng mẫu với mơi trường thạch, trộn kỹ và trộn đều bằng cách xoay đĩa và di chuyển đĩa tới lui trên bề mặt phẳng.
+ Khi thạch đông đặc, lật ngược đĩa Petri và ủ ngay trong 48 h ± 2 h ở 35 °C.
Bước 5: Đếm khuẩn lạc
+ Ở đĩa thạch có độ pha lỗng 10-7 có 226 khuẩn lạc. Vậy trên 1g sản phẩm mẫu thì có 226x107 vi sinh vật hiếu khí vượt quá mức cho phép tổng số vi sinh hiếu khi cho phép là 106