1.2 Bệnh hại gừng
1.2.4.4 Điều kiện phát sinh và lưu tồn
Nấm xâm nhiễm bằng đĩa áp. Mầm bệnh xâm nhiễm nhờ các bào tử phát tán và các thể lưu tồn trong tàn dư thực vật bệnh hay noãn bào tử sống trong đất. Tàn dư thực vật bị nhiễm bệnh là nhân tố quan trọng trong khả năng lây nhiễm của mầm bệnh, bào tử noãn cũng được tìm thấy trong củ giống (Ravindran và Babu, 2005).
Bệnh lây lan qua nước do các bào tử động có roi di chuyển trong nước hoặc do sợi nấm. Bào tử động theo nước đến các vết thương ở rễ gừng, ở đó nó mọc ống mầm và xâm nhiễm vào rễ. Ẩm độ đất cao và nhiệt độ tương đối thấp thuận lợi cho sự phát triển và lây lan bệnh. Gừng thường trồng vào mùa mưa, đất nhiều nước và nhiệt độ mơi trường xung quanh (25-30ºC) có lợi cho sự xâm nhiễm của bệnh (Ravindran và Babu, 2005).
18
1.2.4.5 Biện pháp phòng trị bệnh
Theo Olson (2005) có thể quản lý bệnh bằng cách:
Biện pháp cach tác: phải để cho ruộng khơ, thống nước. Phát hiện sớm, thu gom và thiêu hủy xác bã thực vật bị nhiễm bệnh ra khỏi ruộng. Sử dụng giống sạch bệnh.
Ngâm củ trong dung dịch mancozeb 0.3% trong 30 phút trước khi tồn trữ và ngâm lần nữa trước khi trồng làm giảm bệnh đáng kể (IISR, 2009).
Có thể sử dụng nấm Trichoderma harzianum, T. hamatum, G. virens và vi
khuẩn đối kháng như Bacillus hay Pseudomonas fluorescens để phòng các tác nhân gây bệnh trong đất. Phơi đất trong 30 ngày kết hợp với trộn nấm Trichoderma cộng
thêm bột cây neem (500g/m2) có thể quản lý được bệnh và kích thích sự tăng trưởng của củ (Vilasini, 1996).
Theo Trần Văn Hai (2005), phun các loại thuốc như Aliette 80WP, Ridomyl với nồng độ 0,3% có thể trị được các bệnh do nấm Pythium gây ra.
1.2.5 Bệnh thối nhũn do vi khuẩn Erwinia caratovora
1.2.5.1 Triệu chứng
Vết bệnh lúc đầu là một đốm nhỏ màu nâu xám hơi mọng nước. Sau đó vết bệnh lớn dần và ăn sâu vào bên trong làm củ bị thối. Thối củ do vi khuẩn khác với bệnh thối khô do nấm là củ bị mềm nhũn, cắt ngang chỗ thối thấy có dịch nhờn hoặc khi ấn tay vào có xì mủ hoặc nước, có mùi hơi rất khó chịu. Trên cây và mơ bệnh có dính dịch vi khuẩn màu vàng xám (trích bởi Trần Thị Diền, 2007). Cây bị bệnh lá úa vàng và đổ gục. Bệnh còn gây hại trong thời gian bảo quản.
1.2.5.2 Điều kiện phát sinh và lưu tồn
Bệnh thường phát sinh phát triển thuận lợi trong điều kiện nhiệt độ thích hợp từ 25-300C, độ ẩm cao, thời tiết nóng ẩm thay đổi thất thường. Ở những chân ruộng thoát nước kém, có nhiều tàn dư chưa hoai mục hoặc tưới nước quá nhiều, đất quá ẩm, bón phân không cân đối,... bệnh thường phát sinh phát triển gây hại nặng (Nguyễn Văn Viên và Đỗ Tấn Dũng, 2003).
Vi khuẩn tồn tại trên các bộ phận thực vật tồn trữ sau thu hoạch, trong đất, xác bã thực vật, trong nước tưới và có thể tồn tại trên nhộng của một số côn trùng. Vi khuẩn xâm nhập vào củ, rễ qua các vết thương hoặc qua các khoảng gian bào. Côn trùng cắn phá cây bệnh mang theo vi khuẩn, sau đó cắn phá các cây khỏe là điều kiện
19
thuận lợi nhất cho vi khuẩn xâm nhập (Agrios, 2005). Theo Vũ Triệu Mân (2007), thì vi khuẩn có thể tồn tại đến 24 tháng trong điều kiện khơ hạn.
Bệnh rất khó phát hiện sớm, chỉ phát hiện được khi cây bị héo, lúc đó củ bị thối mềm. Bệnh rất khó trị vì bệnh gây hại ở phần củ trong đất. Bệnh gây hại chủ yếu ở phần củ ít gây hại đến thân gừng.
1.2.5.3 Biện pháp phòng trị bệnh
Vệ sinh đồng ruộng, loại bỏ các tàn dư thực vật trên ruộng. Xây dựng hệ thống thoát nước tốt và tiêu diệt côn trùng cắn phá tạo vết thương là biện pháp chủ yếu để hạn chế bệnh. Việc sử dụng thuốc hóa học khơng được đề xuất để quản lý bệnh, việc xử lý cây trước khi trồng với vi khuẩn đối kháng hoặc vi khuẩn vùng rễ đã thu được hiệu quả trong kiểm soát bệnh (Agrios, 2005). Theo Trần Văn Hai (2005), sử dụng Kasumin nồng độ 0,1-0,15% phun trừ được bệnh thối nhũn do Erwinia sp. gây ra.
1.2.6 Bệnh mốc xanh do Penicillium italicum gây ra 1.2.6.1 Triệu chứng 1.2.6.1 Triệu chứng
Lúc đầu vết bệnh là một điểm nhỏ, mọng nước màu nâu vàng, sau đó to dần hơi lõm xuống, mơ bệnh thối ủng. Bệnh mốc xanh bề mặt tương đối rắn không nhăn nheo. Lúc đầu trên bề mặt vết bệnh mọc lên một lớp mốc trắng. Sau đó ở giữa vết bệnh lớp mốc chuyển sang màu xanh lục hoặc xanh da trời (Vũ Triệu Mân, 2007).
1.2.6.2 Tác nhân
Nấm Penicillium italicum thuộc nhóm nấm bất tồn. Sợi nấm khơng màu. Nấm
phát triển ở phạm vi nhiệt độ 6-330C, thích hợp nhất là 270C. Bào tử phân sinh hình thành ở nhiệt độ 9-290C, thích hợp nhất là 200C. Nấm phát triển ở pH từ 2,9-6,5. Bệnh thường hoại sinh trên các chất hữu cơ thành vô số bào tử , nhờ khơng khí, gió, mưa lan truyền và xâm nhập vào ký chủ qua các vết thương sây sát (Vũ Triệu Mân, 2007).
1.2.6.3 Biện pháp phòng trị
Nên thu hái quả vào những ngày khô ráo, không mưa. Tránh làm giập vỏ trái hoặc sây sát trong khi hái quả, cất trữ và vận chuyển.
Kho cất trữ phải khử trùng, làm vệ sinh sạch sẽ, thống khí và có nhiết độ thấp. Thu hái kịp thời khơng để quả q chín.
Để phịng trừ bệnh có thể xử lý bằng dung dịch Borac 5% trong 5 phút ở 430C, hoặc ngâm vào nước muối 0,4% trong thời gian 2 phút. Ngồi ra cịn dùng một số loại
20
thuốc khác như Benlate 2- 4 Thiazolin benzimidazole (tên thương phẩm là Merteet hoặc Tecto), (Vũ Triệu Mân, 2007).
1.2.7 Bệnh héo rũ do nấm Aspergillus niger Van Tiegh gây ra
1.2.7.1 Triệu chứng
Bệnh gây ra ở cổ rễ, gốc, thân ngầm sát mặt đất có vết bệnh màu nâu, biểu bì và vỏ nứt vỡ, thối mục. Cành lá héo cong, màu lá xanh vàng, mất sáng bóng. Khi nhổ cây bệnh lên rất dễ bị đứt gốc (Vũ Triệu Mân, 2007)
1.2.7.2 Tác nhân
Bệnh do nấm Aspergillus niger Van Tiegh gây ra có sợi nấm đa bào, sinh sản vơ tính bằng cành bào tử phân sinh không màu.
Bệnh lưu tồn trong đất, trên tàn dư thực vật và trong phân rác.
Bệnh phát sinh trong điều kiện nhiệt độ tương đối cao, ẩm ướt, cây sinh trưởng kém và trên đất độc canh (Vũ Triệu Mân, 2007).
1.2.7.3 Biện pháp phòng trừ
Luân canh với các loại cây trồng khác để hạ chế nguồn bệnh ở trong đất và cải tạo đất. Thời gian luân canh là 2 năm.
Bón phân hợp lý: cần bón NPK đầy đủ, cân đối để cây sinh trưởng tăng cường sức chống chịu bệnh, đặc biệt ở đất bạc màu cần bón nhiều vơi, dùng phân chuồng hoai mục để bón hoặc trộn với chể phẩm sinh học Trichoderma.
Một số thước có thể phun như: Sumi-8 12,5WP (0,02%-0.035); Topsin M- 70WP (0,4-0,6 kg/ha); Tilt super 300ND 0,2% (0,3 lit/ha) (Vũ Triệu Mân, 2007).
21
CHƯƠNG 2
PHƯƠNG TIỆN PHƯƠNG PHÁP
2.1 PHƯƠNG TIỆN 2.1.1 Địa điểm 2.1.1 Địa điểm
Địa điểm: các thí nghiệm được thực hiện trong phịng thí nghiệm và nhà lưới, Bộ môn Bảo Vệ Thực Vật, Khoa Nông Nghiệp và Sinh Học Ứng Dụng, Trường Đại Học Cần Thơ.
2.1.2 Vật liệu và thiết bị
Các thiết bị được sử dụng:
Kính hiển vi, đĩa petri, bình tam giác, giấy thấm, ống nghiệm, máy lắc, que cấy, que chà, micropipette, nước cất thanh trùng…
Tủ cấy, autoclave, tủ thanh trùng khơ, cân điện tử, nhiệt kế.
Hóa chất: chlorine, hóa chất nấu mơi trường…
Củ gừng giống được thu từ ruộng nhiễm bệnh ở An Giang, giống gừng Tàu
Một số môi trường dùng trong thí nghiệm.
Mơi trường TZC (Atlas, 2004).
Pepton 10g Dextrose 10g Casamino acids 1g Tetrazolium 5ml Agar 20g Nước cất 1000ml pH 7.0
Môi trường King’B lỏng (Atlas, 2004).
Peptone 20g
K2HPO4 1.5g
22
Glycerol 15ml
Nước cất 1000ml
pH 7.0
Môi trường Potato dextrose agar (PDA) (Atlas, 2004). Khoai tây 200 g
Đường Dextrose 20 g
Agar 20 g
Nước cất 1000 ml
pH 6.5
Môi trường Water agar (WA)
Agar 20 g
Nước cất 1000 ml
2.2 PHƯƠNG PHÁP
Thí nghiệm khảo sát khả năng kiểm soát bệnh thối củ gừng của các biện pháp xử lý hom giống
2.2.1 Nghiệm thức và bố trí thí nghiệm:
Thí nghiệm được tiến hành có 3 nhóm biện pháp gồm 6 nghiệm thức có xử lý và 1 đối chứng khơng xử lý. Thí nghiệm được bố trí khối hoàn toàn ngẫu nhiên, được lặp lại 4 lần.
Ba nhóm biện pháp trong thí nghiệm bao gồm:
Phơi nắng hom giống (15 hom giống / lặp lại): hom giống được bẻ ra cho vừa khi xuống giống, được trải đều phơi trên bao, trong quá trình phơi cần trở mặt hom giống để hom giống được phơi đều, mỗi ngày phơi từ 7-10 giờ sáng và 2- 4 giờ chiều.
- Nghiệm thức 1: Phơi nắng hom giống trong 1 ngày - Nghiệm thức 2: Phơi nắng hom giống trong 2 ngày - Nghiệm thức 3: Phơi nắng hom giống trong 3 ngày
Ngâm hom giống với chlorine 5‰ (15 hom giống / lặp lại): hom giống sau khi được bẻ ra cho vừa khi xuống giống, để 1 ngày cho bề mặt vết hom giống được
23
khơ lại. Sau đó cho hom giioongs vào đung dịch chlorine đã pha với nước sau cho dung dịch này có nồng độ 5‰ và được ngâm theo thời gian của nghiệm thức sau đó vớt ra trải đều trên bao phơi lại cho đến khi hom giống gừng khô.
- Nghiệm thức 4: Ngâm hom giống với chlorine 5‰ 30 phút - Nghiệm thức 5: Ngâm hom giống với chlorine 5‰ 60 phút
Ngâm hom giống với nước ấm có nhiệt độ khoảng 50 – 520C trong 15 phút (15 hom giống / lặp lại)
Nghiệm thức 6: đun sôi nước, pha 3 phần nước sôi với 2 phần nước lanh (3 sôi 2 lạnh) sau cho nước có nhiệt độ khoảng 50-520C thì cho hom giống vào ngâm trong 15 phút. Sau đó vớt ra phơi lại hom giống đến khi hom giống khô.
Nghiệm thức 7: Đối chứng không xử lý
2.2.2 Chỉ tiêu theo dõi
Tỷ lệ nảy mầm của hom giống (%)
Tỷ lệ hom giống bị bệnh (%)
Cách tính tỷ lệ hom giống nảy mầm và tỷ lệ hom giống bị bệnh. Số hom giống đem ủ là 100%, dựa trên số hom giống nảy mầm và số hom giống bị bệnh quy ra phần trăm.
Mật số mầm bệnh (vi khuẩn, nấm) trên hom giống: dùng 5ml nước cất đã thanh trùng rửa bên ngoài củ gừng, sau đó rút 20l từ 5ml nước rửa củ gừng đem chà trên môi trường nuôi cấy vi khuẩn và nấm.
Cách tính mật số nấm và vi khuẩn: rút 20l từ 5ml dung dịch huyền phù chà lên mơi trường. Đếm số khuẩn lạc có trên mơi trường nhân rồi với 50 để ra được mật số vi khuẩn hoặc nấm trên 1ml.
Số chồi: Đếm tổng số chồi phát triển trên mỗi lặp lại.
Chiều cao (cm): Được đo từ gốc đến lá cao nhất của cây gừng
2.3 XỬ LÝ SỐ LIỆU
Số liệu được xử lý sơ bộ (chuyển đổi số liệu, tính trung bình,...) bằng chương trình Microsoft Excel 2003 trước khi phân tích thống kê (ANOVA), so sánh sự khác biệt giữa các trung bình nghiệm thức bằng phép thử DUNCAN nhờ vào chương trình MSTAT-C.
24
CHƯƠNG 3
KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN GHI NHẬN TỔNG QUÁT
Thí nghiệm được thực hiện trong điều kiện phịng thí nghiệm và nhà lưới, Bộ môn Bảo vệ thực vật, khoa Nông nghiệp và Sinh học ứng dụng, trường Đại học Cần Thơ, trong những tháng 10, 11 và 12 (có nhiệt độ khơng khí trung bình tháng 11 từ 26,40C đến 28,80C tổng lượng mưa trung bình tháng 11 dao động phổ biền từ 11mm đến 198mm, độ ẩm khơng khí trung bình phổ biến từ 74 đến 86%), phù hợp với sự sinh trưởng và phát triển của cây gừng (Viện khoa học khí tương thủy văn và mơi trường, 2012).
3.1 ẢNH HƯỞNG CỦA CÁC BIỆN PHÁP XỬ LÝ ĐẾN TÌNH TRẠNG NHIỄM
BỆNH CỦA HOM GIỐNG
3.1.1 Hiệu quả của biện pháp xử lý qua tỷ lệ (%) hom giống bị bệnh
Kết quả ở bảng 3.1, cho thấy nghiệm thức ngâm hom giống với chlorine trong 30 phút có tỷ lệ hom giống bị bệnh thấp nhất.
Bảng 3.1 Tỷ lệ (%) hom giống bị bệnh
STT Nghiệm thức Tỷ lệ hom giống bị bệnh (%)
1 Phơi nắng 1 ngày 51,67 a 2 Phơi nắng 2 ngày 33,33 b 3 Phơi nắng 3 ngày 35,00 b 4 Ngâm chlorine 30p 15,00 c 5 Ngâm chlorine 60 phút 26,67 b 6 Ngâm nước ấm 30,00 b 7 Đối chứng 53,33 a CV (%) 16,26 Ý nghĩa F **
Ghi chú: -các trung bình trong cùng một cột được theo sau bởi một hay những chữ cái giống nhau thì khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê trong phép thử Duncan.
25
Các nghiệm thức ngâm hom giống với chlorine trong 60 phút, ngâm hom giống với nước ấm, phơi nắng 2 ngày, phơi nắng 3 ngày cũng mang lại hiệu quả khá cao, khác biệt có ý nghĩa thống kê so với đối chứng. Dựa vào kết quả bảng 3.2 thì nghiệm thức ngâm hom giống với chlorine trong 30 phút có hiệu quả cao nhất, các nghiệm thức cịn lại có hiệu quả thấp.
3.1.2 Hiệu quả của biện pháp xử lý trên mật số mầm bệnh
- Ảnh hưởng của biện pháp xử lý trên mật số vi khuẩn R. solanacearum.
Kết quả trình bày ở bảng 3.2 cho thấy giữa các nghiệm thức khơng có sự khác biệt ý nghĩa khi phân tích thống kê.
Bảng 3.2 Mật số vi khuẩn Ralstonia solanacearum trên môi trường TZC (104 cfu / ml)
Nghiệm thức Ralstonia solanacearum (104cfu / ml)
Phơi nắng 1 ngày 6,70 Phơi nắng 2 ngày 14,30 Phơi nắng 3 ngày 15,60 Ngâm chlorine 30p 4,75 Ngâm chlorine 60p 5,45 Ngâm nước ấm 3,65 Đối chứng 22,80 CV (%) 12,15 Ý nghĩa F ns
Ghi chú: -số liệu được chuyển sang log(x+1) khi phân tích thống kê.
- ns: khơng khác biệt ý nghĩa
Cũng theo kết quả từ bảng 3.2 thì mật số vi khuẩn ở nghiệm thức ngâm hom giống với chlorine trong 30 phút và nghiệm thức ngâm hom giống với nước ấm là hai nghiệm thức có mật số vi khuẩn tương đối thấp hơn so với các biện pháp xử lý còn lại. Tuy nhiên, kết quả thống kê lại không khác biệt ở mức ý nghĩa 5% (khác biệt thống kê ở mức ý nghĩa 15%), có thể do mật số vi khuẩn hiện diện trên và trong củ chưa đủ lớn để tạo nên sự khác biệt ý nghĩa.
26
Hình 3.1: Vi khuẩn R. solanacearum trên môi trường TZC ở nghiệm thức ngâm hom giống với nước ấm (50-520C)
- Ảnh hưởng của biện pháp xử lý trên mật số nấm trên củ giống.
Dựa vào kết quả bảng 3.3, cho thấy mật số nấm ở các nghiệm thức có sự khác biệt ý nghĩa thống kê ở mức ý nghĩa 1% và 5%.
- Đối với nấm Fusarium thì 3 biện pháp ngâm hom giống với chlorine trong 30 phút và 60 phút và biện pháp ngâm hom giống với nước ấm có mật số nấm thấp hơn các biện pháp cịn lại, nhưng khơng có khác biệt ý nghĩa thống kê. Tuy kết quả biện pháp phơi nắng một ngày lại có mật số nấm cao hơn đối chứng, có thể do khi phơi nắng chỉ có một ngày nhiệt độ chưa đủ để giết chết nấm mà cịn kích thích sự phát triển của nấm
- Đối với nấm Aspergillus, các biện pháp xử lý đều có hiệu quả đối với mật số nấm và không khác biệt nhau có ý nghĩa thống kê.
- Đối với nấm Penicillium biện pháp ngâm hom giống với chlorine khơng khác biệt so với các biện pháp cịn lại. Ngâm hom giống với chlorine và ngâm hom giống với nước ấm, hai biện pháp nầy khơng khác biệt, có thể do Penicillium là nấm hoại sinh, hiện
27
Bảng 3.3 Mật số nấm trên môi trường PDA
Nghiệm thức Mật số nấm (103 bào tử / ml)
Fusarium Aspergillus Penicillium
Phơi nắng 1 ngày 8,50 a 6,00 b 0,50 b Phơi nắng 2 ngày 0,50 b 14,50 a 0,50 b Phơi nắng 3 ngày 0,50 b 8,00 b 0,50 b Ngâm chlorine 30p 0,00 b 5,00 b 0,50 b Ngâm chlorine 60p 0,00 b 5,50 b 0,00 b Ngâm nước ấm 0,00 b 5,00 b 0,50 b Đối chứng 1,50 b 21,50 a 20,50 a CV (%) 4,43 6,02 5,38 Ý nghĩa F * ** **
Ghi chú: - các trung bình trong cùng một cột được theo sau bởi một hay những chữ cái giống nhau thì khác biệt