Bệnh mốc xanh do Penicillium italicum gây ra

1.2 Bệnh hại gừng

1.2.6 Bệnh mốc xanh do Penicillium italicum gây ra

1.2.6.1 Triệu chứng

Lúc đầu vết bệnh là một điểm nhỏ, mọng nước màu nâu vàng, sau đó to dần hơi lõm xuống, mô bệnh thối ủng. Bệnh mốc xanh bề mặt tương đối rắn không nhăn nheo. Lúc đầu trên bề mặt vết bệnh mọc lên một lớp mốc trắng. Sau đó ở giữa vết bệnh lớp mốc chuyển sang màu xanh lục hoặc xanh da trời (Vũ Triệu Mân, 2007).

1.2.6.2 Tác nhân

Nấm Penicillium italicum thuộc nhóm nấm bất tồn. Sợi nấm khơng màu. Nấm

phát triển ở phạm vi nhiệt độ 6-330C, thích hợp nhất là 270C. Bào tử phân sinh hình thành ở nhiệt độ 9-290C, thích hợp nhất là 200C. Nấm phát triển ở pH từ 2,9-6,5. Bệnh thường hoại sinh trên các chất hữu cơ thành vơ số bào tử , nhờ khơng khí, gió, mưa lan truyền và xâm nhập vào ký chủ qua các vết thương sây sát (Vũ Triệu Mân, 2007).

1.2.6.3 Biện pháp phòng trị

Nên thu hái quả vào những ngày khô ráo, không mưa. Tránh làm giập vỏ trái hoặc sây sát trong khi hái quả, cất trữ và vận chuyển.

Kho cất trữ phải khử trùng, làm vệ sinh sạch sẽ, thống khí và có nhiết độ thấp. Thu hái kịp thời khơng để quả q chín.

Để phịng trừ bệnh có thể xử lý bằng dung dịch Borac 5% trong 5 phút ở 430C, hoặc ngâm vào nước muối 0,4% trong thời gian 2 phút. Ngồi ra cịn dùng một số loại

20

thuốc khác như Benlate 2- 4 Thiazolin benzimidazole (tên thương phẩm là Merteet hoặc Tecto), (Vũ Triệu Mân, 2007).

1.2.7 Bệnh héo rũ do nấm Aspergillus niger Van Tiegh gây ra

1.2.7.1 Triệu chứng

Bệnh gây ra ở cổ rễ, gốc, thân ngầm sát mặt đất có vết bệnh màu nâu, biểu bì và vỏ nứt vỡ, thối mục. Cành lá héo cong, màu lá xanh vàng, mất sáng bóng. Khi nhổ cây bệnh lên rất dễ bị đứt gốc (Vũ Triệu Mân, 2007)

1.2.7.2 Tác nhân

Bệnh do nấm Aspergillus niger Van Tiegh gây ra có sợi nấm đa bào, sinh sản vơ tính bằng cành bào tử phân sinh không màu.

Bệnh lưu tồn trong đất, trên tàn dư thực vật và trong phân rác.

Bệnh phát sinh trong điều kiện nhiệt độ tương đối cao, ẩm ướt, cây sinh trưởng kém và trên đất độc canh (Vũ Triệu Mân, 2007).

1.2.7.3 Biện pháp phòng trừ

Luân canh với các loại cây trồng khác để hạ chế nguồn bệnh ở trong đất và cải tạo đất. Thời gian luân canh là 2 năm.

Bón phân hợp lý: cần bón NPK đầy đủ, cân đối để cây sinh trưởng tăng cường sức chống chịu bệnh, đặc biệt ở đất bạc màu cần bón nhiều vơi, dùng phân chuồng hoai mục để bón hoặc trộn với chể phẩm sinh học Trichoderma.

Một số thước có thể phun như: Sumi-8 12,5WP (0,02%-0.035); Topsin M- 70WP (0,4-0,6 kg/ha); Tilt super 300ND 0,2% (0,3 lit/ha) (Vũ Triệu Mân, 2007).

21

CHƯƠNG 2

PHƯƠNG TIỆN PHƯƠNG PHÁP

2.1 PHƯƠNG TIỆN 2.1.1 Địa điểm 2.1.1 Địa điểm

Địa điểm: các thí nghiệm được thực hiện trong phịng thí nghiệm và nhà lưới, Bộ môn Bảo Vệ Thực Vật, Khoa Nông Nghiệp và Sinh Học Ứng Dụng, Trường Đại Học Cần Thơ.

2.1.2 Vật liệu và thiết bị

Các thiết bị được sử dụng:

 Kính hiển vi, đĩa petri, bình tam giác, giấy thấm, ống nghiệm, máy lắc, que cấy, que chà, micropipette, nước cất thanh trùng…

 Tủ cấy, autoclave, tủ thanh trùng khô, cân điện tử, nhiệt kế.

 Hóa chất: chlorine, hóa chất nấu mơi trường…

 Củ gừng giống được thu từ ruộng nhiễm bệnh ở An Giang, giống gừng Tàu

Một số mơi trường dùng trong thí nghiệm.

 Môi trường TZC (Atlas, 2004).

Pepton 10g Dextrose 10g Casamino acids 1g Tetrazolium 5ml Agar 20g Nước cất 1000ml pH 7.0

 Môi trường King’B lỏng (Atlas, 2004).

Peptone 20g

K2HPO4 1.5g

22

Glycerol 15ml

Nước cất 1000ml

pH 7.0

 Môi trường Potato dextrose agar (PDA) (Atlas, 2004). Khoai tây 200 g

Đường Dextrose 20 g

Agar 20 g

Nước cất 1000 ml

pH 6.5

 Môi trường Water agar (WA)

Agar 20 g

Nước cất 1000 ml

2.2 PHƯƠNG PHÁP

Thí nghiệm khảo sát khả năng kiểm soát bệnh thối củ gừng của các biện pháp xử lý hom giống

2.2.1 Nghiệm thức và bố trí thí nghiệm:

Thí nghiệm được tiến hành có 3 nhóm biện pháp gồm 6 nghiệm thức có xử lý và 1 đối chứng khơng xử lý. Thí nghiệm được bố trí khối hồn tồn ngẫu nhiên, được lặp lại 4 lần.

Ba nhóm biện pháp trong thí nghiệm bao gồm:

 Phơi nắng hom giống (15 hom giống / lặp lại): hom giống được bẻ ra cho vừa khi xuống giống, được trải đều phơi trên bao, trong quá trình phơi cần trở mặt hom giống để hom giống được phơi đều, mỗi ngày phơi từ 7-10 giờ sáng và 2- 4 giờ chiều.

- Nghiệm thức 1: Phơi nắng hom giống trong 1 ngày - Nghiệm thức 2: Phơi nắng hom giống trong 2 ngày - Nghiệm thức 3: Phơi nắng hom giống trong 3 ngày

 Ngâm hom giống với chlorine 5‰ (15 hom giống / lặp lại): hom giống sau khi được bẻ ra cho vừa khi xuống giống, để 1 ngày cho bề mặt vết hom giống được

23

khơ lại. Sau đó cho hom giioongs vào đung dịch chlorine đã pha với nước sau cho dung dịch này có nồng độ 5‰ và được ngâm theo thời gian của nghiệm thức sau đó vớt ra trải đều trên bao phơi lại cho đến khi hom giống gừng khô.

- Nghiệm thức 4: Ngâm hom giống với chlorine 5‰ 30 phút - Nghiệm thức 5: Ngâm hom giống với chlorine 5‰ 60 phút

 Ngâm hom giống với nước ấm có nhiệt độ khoảng 50 – 520C trong 15 phút (15 hom giống / lặp lại)

Nghiệm thức 6: đun sôi nước, pha 3 phần nước sôi với 2 phần nước lanh (3 sôi 2 lạnh) sau cho nước có nhiệt độ khoảng 50-520C thì cho hom giống vào ngâm trong 15 phút. Sau đó vớt ra phơi lại hom giống đến khi hom giống khô.

Nghiệm thức 7: Đối chứng không xử lý

2.2.2 Chỉ tiêu theo dõi

 Tỷ lệ nảy mầm của hom giống (%)

 Tỷ lệ hom giống bị bệnh (%)

Cách tính tỷ lệ hom giống nảy mầm và tỷ lệ hom giống bị bệnh. Số hom giống đem ủ là 100%, dựa trên số hom giống nảy mầm và số hom giống bị bệnh quy ra phần trăm.

 Mật số mầm bệnh (vi khuẩn, nấm) trên hom giống: dùng 5ml nước cất đã thanh trùng rửa bên ngoài củ gừng, sau đó rút 20l từ 5ml nước rửa củ gừng đem chà trên môi trường nuôi cấy vi khuẩn và nấm.

Cách tính mật số nấm và vi khuẩn: rút 20l từ 5ml dung dịch huyền phù chà lên môi trường. Đếm số khuẩn lạc có trên mơi trường nhân rồi với 50 để ra được mật số vi khuẩn hoặc nấm trên 1ml.

 Số chồi: Đếm tổng số chồi phát triển trên mỗi lặp lại.

 Chiều cao (cm): Được đo từ gốc đến lá cao nhất của cây gừng

2.3 XỬ LÝ SỐ LIỆU

Số liệu được xử lý sơ bộ (chuyển đổi số liệu, tính trung bình,...) bằng chương trình Microsoft Excel 2003 trước khi phân tích thống kê (ANOVA), so sánh sự khác biệt giữa các trung bình nghiệm thức bằng phép thử DUNCAN nhờ vào chương trình MSTAT-C.

24

CHƯƠNG 3

KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN GHI NHẬN TỔNG QUÁT

Thí nghiệm được thực hiện trong điều kiện phịng thí nghiệm và nhà lưới, Bộ môn Bảo vệ thực vật, khoa Nông nghiệp và Sinh học ứng dụng, trường Đại học Cần Thơ, trong những tháng 10, 11 và 12 (có nhiệt độ khơng khí trung bình tháng 11 từ 26,40C đến 28,80C tổng lượng mưa trung bình tháng 11 dao động phổ biền từ 11mm đến 198mm, độ ẩm khơng khí trung bình phổ biến từ 74 đến 86%), phù hợp với sự sinh trưởng và phát triển của cây gừng (Viện khoa học khí tương thủy văn và mơi trường, 2012).

3.1 ẢNH HƯỞNG CỦA CÁC BIỆN PHÁP XỬ LÝ ĐẾN TÌNH TRẠNG NHIỄM

BỆNH CỦA HOM GIỐNG

3.1.1 Hiệu quả của biện pháp xử lý qua tỷ lệ (%) hom giống bị bệnh

Kết quả ở bảng 3.1, cho thấy nghiệm thức ngâm hom giống với chlorine trong 30 phút có tỷ lệ hom giống bị bệnh thấp nhất.

Bảng 3.1 Tỷ lệ (%) hom giống bị bệnh

STT Nghiệm thức Tỷ lệ hom giống bị bệnh (%)

1 Phơi nắng 1 ngày 51,67 a 2 Phơi nắng 2 ngày 33,33 b 3 Phơi nắng 3 ngày 35,00 b 4 Ngâm chlorine 30p 15,00 c 5 Ngâm chlorine 60 phút 26,67 b 6 Ngâm nước ấm 30,00 b 7 Đối chứng 53,33 a CV (%) 16,26 Ý nghĩa F **

Ghi chú: -các trung bình trong cùng một cột được theo sau bởi một hay những chữ cái giống nhau thì khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê trong phép thử Duncan.

25

Các nghiệm thức ngâm hom giống với chlorine trong 60 phút, ngâm hom giống với nước ấm, phơi nắng 2 ngày, phơi nắng 3 ngày cũng mang lại hiệu quả khá cao, khác biệt có ý nghĩa thống kê so với đối chứng. Dựa vào kết quả bảng 3.2 thì nghiệm thức ngâm hom giống với chlorine trong 30 phút có hiệu quả cao nhất, các nghiệm thức cịn lại có hiệu quả thấp.

3.1.2 Hiệu quả của biện pháp xử lý trên mật số mầm bệnh

- Ảnh hưởng của biện pháp xử lý trên mật số vi khuẩn R. solanacearum.

Kết quả trình bày ở bảng 3.2 cho thấy giữa các nghiệm thức khơng có sự khác biệt ý nghĩa khi phân tích thống kê.

Bảng 3.2 Mật số vi khuẩn Ralstonia solanacearum trên môi trường TZC (104 cfu / ml)

Nghiệm thức Ralstonia solanacearum (104cfu / ml)

Phơi nắng 1 ngày 6,70 Phơi nắng 2 ngày 14,30 Phơi nắng 3 ngày 15,60 Ngâm chlorine 30p 4,75 Ngâm chlorine 60p 5,45 Ngâm nước ấm 3,65 Đối chứng 22,80 CV (%) 12,15 Ý nghĩa F ns

Ghi chú: -số liệu được chuyển sang log(x+1) khi phân tích thống kê.

- ns: khơng khác biệt ý nghĩa

Cũng theo kết quả từ bảng 3.2 thì mật số vi khuẩn ở nghiệm thức ngâm hom giống với chlorine trong 30 phút và nghiệm thức ngâm hom giống với nước ấm là hai nghiệm thức có mật số vi khuẩn tương đối thấp hơn so với các biện pháp xử lý còn lại. Tuy nhiên, kết quả thống kê lại không khác biệt ở mức ý nghĩa 5% (khác biệt thống kê ở mức ý nghĩa 15%), có thể do mật số vi khuẩn hiện diện trên và trong củ chưa đủ lớn để tạo nên sự khác biệt ý nghĩa.

26

Hình 3.1: Vi khuẩn R. solanacearum trên mơi trường TZC ở nghiệm thức ngâm hom giống với nước ấm (50-520C)

- Ảnh hưởng của biện pháp xử lý trên mật số nấm trên củ giống.

Dựa vào kết quả bảng 3.3, cho thấy mật số nấm ở các nghiệm thức có sự khác biệt ý nghĩa thống kê ở mức ý nghĩa 1% và 5%.

- Đối với nấm Fusarium thì 3 biện pháp ngâm hom giống với chlorine trong 30 phút và 60 phút và biện pháp ngâm hom giống với nước ấm có mật số nấm thấp hơn các biện pháp còn lại, nhưng khơng có khác biệt ý nghĩa thống kê. Tuy kết quả biện pháp phơi nắng một ngày lại có mật số nấm cao hơn đối chứng, có thể do khi phơi nắng chỉ có một ngày nhiệt độ chưa đủ để giết chết nấm mà cịn kích thích sự phát triển của nấm

- Đối với nấm Aspergillus, các biện pháp xử lý đều có hiệu quả đối với mật số nấm và khơng khác biệt nhau có ý nghĩa thống kê.

- Đối với nấm Penicillium biện pháp ngâm hom giống với chlorine không khác biệt so với các biện pháp còn lại. Ngâm hom giống với chlorine và ngâm hom giống với nước ấm, hai biện pháp nầy không khác biệt, có thể do Penicillium là nấm hoại sinh, hiện

27

Bảng 3.3 Mật số nấm trên môi trường PDA

Nghiệm thức Mật số nấm (103 bào tử / ml)

Fusarium Aspergillus Penicillium

Phơi nắng 1 ngày 8,50 a 6,00 b 0,50 b Phơi nắng 2 ngày 0,50 b 14,50 a 0,50 b Phơi nắng 3 ngày 0,50 b 8,00 b 0,50 b Ngâm chlorine 30p 0,00 b 5,00 b 0,50 b Ngâm chlorine 60p 0,00 b 5,50 b 0,00 b Ngâm nước ấm 0,00 b 5,00 b 0,50 b Đối chứng 1,50 b 21,50 a 20,50 a CV (%) 4,43 6,02 5,38 Ý nghĩa F * ** **

Ghi chú: - các trung bình trong cùng một cột được theo sau bởi một hay những chữ cái giống nhau thì khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê trong phép thử Duncan.

- ** khác biệt ở mức ý nghĩa 1%.; - * khác biệt ở mức ý nghĩa 5% - Số liệu được chuyển sang log(x+1) khi phân tích thống kê.

Hình 3.2: Nấm trên mơi trường PDA ở nghiệm thức phơi nắng 2 ngày

Fusarium sp.

Penicillium sp. Aspergillus sp.

28

Trong số các mầm bệnh có thể lưu tồn trên và trong củ gừng giống, nấm

Fusarium oxysporum và vi khuẩn R. solanacearum thường được ghi nhận là có thể lây

lan qua hom giống (CABI, 2007). Kết quả khảo sát của Trần Vũ Phến và ctv. (2013) cũng đã đánh giá tầm quan trọng của mầm bệnh lưu tồn trong củ giống trong sự phát sinh và phát triển của dịch bệnh thối củ trên cây gừng tại các vùng trồng gừng chính của tỉnh An Giang.

3.2 ẢNH HƯỞNG CỦA CÁC BIỆN PHÁP XỬ LÝ ĐẾN SỨC SỐNG CỦA HOM GIỐNG VÀ SINH TRƯỞNG CỦA CÂY CON GIỐNG VÀ SINH TRƯỞNG CỦA CÂY CON

3.2.1 Ảnh hưởng của biện pháp xử lý trên tỷ lệ nảy mầm của hom giống

Dựa vào kết quả ở bảng 3.4 nghiệm thức ngâm hom giống với chlorine trong 30 phút có hiệu quả cao nhất.

Bảng 3.4 Tỷ lệ hom giống nảy mầm

Nghiệm thức Tỷ lệ nảy mầm Phơi nắng 1 ngày 47,67 c Phơi nắng 2 ngày 57,89 b Phơi nắng 3 ngày 61,07 b Ngâm chlorine 30p 80,00 a Ngâm chlorine 60p 68,55 b Ngâm nước ấm 59,58 b Đối chứng 54,99 c CV (%) 8,79 Ý nghĩa F **

Ghi chú: - các trung bình trong cùng một cột được theo sau bởi một hay những chữ cái giống nhau thì khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê trong phép thử Duncan.

- ** khác biệt ở mức ý nghĩa 1%.

- Số liệu được chuyển sang arcin xkhi phân tích thống kê.

Tỷ lệ hom giống nảy mầm có tương quan nghịch với tỷ lệ hom giống bị bệnh, nghiệm thức xử lý với chlorine 5‰ trong 30 phút cũng có tỷ lệ hom giống bị bệnh thấp

29

nhất (Bảng 3.2). Nghiệm thức ngâm hom giống với chlorine trong 60 phút có tỷ lệ hom giống nảy mầm thấp hơn nghiệm thức ngâm hom giống với chlorine trong 30 phút. Điều này có thể do thời gian ngâm hom giống trong chlorine lâu hơn đã ảnh hưởng đến khả năng nảy mầm của hom giống. Ở nghiệm thức ngâm hom giống với nước ấm nhiệt độ từ 50-52oC trong 15 phút, có thể do nhiệt độ này cộng thêm thời gian đã làm ảnh hưởng đến khả năng nảy mầm của hom giống. Nghiệm thức phơi nắng 1 ngày có tỷ lệ nảy mầm thấp hơn có ý nghĩa thống kê so với các biện pháp còn lại.

Hình 3.3: Hom giống nảy mầm ở nghiệm thức ngâm hom giống với chlorine 5‰ trong 60 phút

3.2.2 Ảnh hưởng của biện pháp xử lý trên số chồi nảy mầm của hom giống

Qua bảng 3.5 cho thấy số chồi gừng của các nghiệm thức ở các thời điểm khác nhau có sự khác biệt ý nghĩa thống kê ở mức 1%. Ở thời điểm 7NSKT nghiệm thức ngâm hom giống với nước ấm có số chồi cao hơn so với đối chứng và nghiệm thức phơi nắng 1 ngày, và không khác biệt ý nghĩa thống kê so với các nghiệm thức còn lại. Các biện pháp có hiệu quả đối với sự phát triển của số chồi, có số chồi cao hơn và khác biệt có ý nghĩa thống kê so với đối chứng.

30

Bảng 3.5 Số chồi của các nghiệm thức ở các thời điểm sau khi trồng

Nghiệm thức Số chồi của các nghiệm thức ở các thời điểm sau khi trồng (NSKT)

7 14 21 28 35 42 49 56 Phơi nắng 1 ngày 2,40 bc 2,60 bc 3,00 b 3,00 bc 4,00 a 4,00 b 4,20 b 5,20 a Phơi nắng 2 ngày 3.60 ab 4,00 ab 5,00 a 5,20 a 5,60 a 4,80 ab 5,00 ab 5,20 a Phơi nắng 3 ngày 4,00 ab 4,00 ab 4,40 ab 5,00 a 5,80 a 5,60 ab 5,40 ab 5,60 a Ngâm chlorine 30p 3,80 ab 4,20 ab 4,80 ab 5,20 a 6,20 a 7,20 a 7,20 a 7,40 a Ngâm chlorine 60p 3,80 ab 4,60 a 4,20 ab 4,80 ab 5,00 a 5,20 ab 5,40 ab 5,40 a Ngâm nước ấm 4,20 a 4,80 a 5,60 a 5,80 a 6,40 a 6,40 ab 6,40 ab 6.40 a