CHƯƠNG II: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 2.1 Nguyờn liệu
2.2.3.1.Phương phỏp xỏc định nitrit (NO Phương phỏp xỏc định nitrit (NO2 2 ) bằng phương phỏp trắc phổ hấp thụ ) bằng phương phỏp trắc phổ hấp thụ phõn tử.
phõn tử.
phõn tử.
Nguyờn tắc
NO2- được xỏc định qua hợp chất azo mầu đỏ hồng được tạo thành tại pH từ 2 đến 2,5 bằng cỏch kết hợp sulfanilamide (NH2C6H4SO2NH2) với N-(1-naphthyl)- ethylenediamine dihydrochloride (NED dihydrochloride) (C12H16Cl2N2). Đo độ hấp thụ ở bước súng λ = 543 nm.
Húa chất
Trong quỏ trỡnh phõn tớch, chỉ dựng thuốc thử thuộc loại phõn tớch và chỉ dựng nước cất khụng chứa nitrit.
Thuốc thử
Hũa tan 10g sulfanilamide (NH2C6H4SO2NH2) trong 800 ml nước và 100 ml axit H3PO4 85%. Sau khi hũa tan hoàn toàn sulfanilamide, thờm vào 1 g N-(1-naphthyl)- ethylenediamine dihydrochloride (C12H16Cl2N2). Trộn đều rồi định mức thành 1(l). Dung dịch ổn định trong vũng 1 thỏng nếu được giữ lạnh trong chai tối màu.
Dung dịch nitrit chuẩn
Dung dịch nitrit chuẩn 1 mg/l được pha từ dung dịch gốc cú nồng độ 1000 mg/l. Dung dịch chuẩn được pha trước khi sử dụng.
Cỏch tiến hành
Dựng đường chuẩn
Lấy vào bỡnh định mức 25 ml lần lượt cỏc thể tớch 0; 1; 2; 5; 10 ml dung dịch nitrit chuẩn làm việc 1 mg/l rồi định mức bằng nước cất đến vạch.
Thờm vào mỗi bỡnh 1 ml thuốc thử NED rồi lắc đều.
Để ổn định màu sau 10 phỳt rồi so màu trờn mỏy UV-VIS ở bước súng 543 nm
Phần mẫu thử
Thể tớch phần mẫu thử lớn nhất là 25 ml. Lượng mẫu này thớch hợp cho việc xỏc định nồng độ nitrit tới ρ = 0,4 mg/l. Phần mẫu thử nhỏ hơn cú thể được sử dụng để xỏc định nitrit cú nồng độ cao hơn. Nếu mẫu thớ nghiệm cú chứa cỏc chất lơ lửng, thỡ phải lọc qua màng lọc 0,47 àm hoặc ly tõm trước khi lấy phần mẫu để thử .
Dựng pipet chuyển phần mẫu thử được lấy vào bỡnh định mức dung dịch 25 ml. Định mức đến vạch rồi thờm 1 ml thuốc thử NED, lắc đều dung dịch.
Để mẫu ổn định mầu sau 10 phỳt, đo độ hấp thụ của dung dịch ở bước súng 543 nm với cuvột cú chiều dài đường quang 10 mm..
Mẫu trắng
Tiến hành thử mẫu trắng như mẫu thử nhưng thay phần mẫu thử bằng 25 ml nước cất khụng chứa nitrit.
Mẫu chuẩn
Chuẩn bị mẫu chuẩn với nồng độ ở giữa khoảng xỏc định của đường chuẩn hoặc với nồng độ thường gặp nhất khi phõn tớch cỏc chỉ tiờu này
Tớnh toỏn kết quả
Dựa vào đường chuẩn tớnh ra hàm lượng NO2- -N (μg) trong mẫu phõn tớch. Lấy giỏ trị này chia cho thể tớch mẫu lấy phõn tớch được kết quả nồng độ NO2--N (mg/l) của mẫu phõn tớch.
2.2.3.2. Xỏc định NO3- bằng phương phỏp cột khử cadimium
Nguyờn tắc
NO3- bị khử gần như hoàn toàn thành NO2- với sự cú mặt của Cd. Cd trước khi sử dụng cần được xử lý bằng CuSO4 và nhồi vào cột.
NO2- sau đú được xỏc định bằng cỏch diazo húa bằng axit sunfanilamide và cho kết hợp với N-(1-naphthyl)-ethylendiamin dihydrochloride để tạo thành hợp chất azo cú màu hồng đo bằng mỏy so màu. Để loại trừ ảnh hưởng của sự cú mặt NO2--Ncú sẵn trong mẫu cần tiến hành phõn tớch khụng qua cụng đoạn khử bằng Cd. Khoảng xỏc định của phương phỏp là từ 0,01 đến 1,0 mg NO3-/l. Phương phỏp này đặc biệt thớch hợp khi hàm lượng NO3--N trong mẫu phõn tớch nhỏ hơn 0,1 mg/l.
Dụng cụ và thiết bị thớ nghiệm
Cột khử: cấu tạo gồm 2 phần: (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
- Phần ống nhựa gằn vào pipet cú lắp thờm bộ phận điều chỉnh tốc độ ở cuối ống.
Mỏy so mầu bước súng 543 nm
Húa chất
Hạt Cu-Cd
Rửa 25g Cd (hạt) bằng HCl 6N rồi trỏng lại bằng nước. Thờm 100ml dung dịch CuSO4 2% và khuấy trong 5 phỳt đến khi mầu xanh của dung dịch nhạt đi. Gạn bỏ dung dịch rồi lặp lại (tiếp tục cho dung dịch CuSO4 rồi khuấy) đến khi xuất hiện kết tủa dạng keo màu nõu. Rửa lại bằng nước để loại bỏ kết tủa Cu.
Húa chất
- Dung dịch NH4Cl – EDTA (A): hũa tan 13 g NH4Cl và 1,7 g EDTA trong 900 ml nước. Điều chỉnh pH của dung dịch đến 8,5 bằng dung dịch NH4OH rồi định mức đến 1000ml.
- Dung dịch NH4Cl – EDTA (B): lấy 300 ml dung dịch A, thờm nước cất thành 500 ml dung dịch.
- Dung dịch HCl 6N (HCl 1:1)
- Dung dịch CuSO4 2%: hũa tan 20 g CuSO4.5H2O trong 500 ml rồi định mức thành 1000 ml.
- Thuốc thử
Trong quỏ trỡnh phõn tớch, chỉ dựng thuốc thử thuộc loại phõn tớch và chỉ dựng nước cất khụng chứa nitrit.
+ Hũa tan 10 g sulfanilamide (NH2C6H4SO2NH2) trong 800 ml nước và 100 ml axit H3PO4 85%. Sau khi hũa tan hoàn toàn sulfanilamide, thờm vào 1 g N-(1- naphthyl)-ethylenediamine dihydrochloride (C12H16Cl2N2). Trộn đều rồi định mức thành 1(l). Dung dịch ổn định trong vũng 1 thỏng nếu được giữ lạnh trong chai tối màu.
+ Dung dịch nitrat chuẩn gốc: Sấy khụ muối KNO3 ở nhiệt độ 1050C trong 24 giờ. Hũa tan 0,7218 g trong nước định mức thành 1000 ml, thờm 2 ml CHCl3 để bảo quản; 1 ml = 100 àg NO3--N. Dung dịch ổn định ớt nhất 6 thỏng.
+ Dung dịch nitrat làm việc: Pha loóng 100 ml dung dịch nitrat gốc thành 1000 ml với nước cất, bảo quản bằng 2 ml CHCl3; 1ml = 10àg NO3--N. Dung dịch ổn định trong 6 thỏng.
- Cỏc dung dịch húa chất phõn tớch NO2-- N.
Phương phỏp
Chuẩn bị cột khử
Nhồi một ớt sợi thủy tinh vào đỏy cột rồi đổ đầy nước vào cột. Trong khi giữ cột đầy nước cho hạt Cu-Cd vào cột với chiều dài phần chứa hạt Cu-Cd là khoảng 18,5 cm. Luụn giữ một mực nước phớa trờn cột để trỏnh bọt khớ trong cột. Rửa cột bằng 200ml dung dịch B (NH4Cl - EDTA loóng). Hoạt húa cột bằng cỏch cho chảy qua ớt nhất 100ml dung dịch hỗn hợp 25% dung dịch chuẩn 1mg NO3--N/l và 75% dung dịch NH4Cl - EDTA (dung dịch A) với tốc độ 7 ữ 10 ml/phỳt.
Xử lý mẫu và phõn tớch
- Loại bỏ cặn lơ lửng bằng cỏch lọc mẫu qua giấy lọc 0,45àm.
- Điều chỉnh để pH = 7 ữ 9 bằng HCl hoặc NaOH (để đảm bảo cú pH khoảng 8,5 khi thờm dung dịch NH4Cl – EDTA).
- Khử mẫu: lấy 25ml mẫu (hoặc mẫu đó được pha loóng thành 25ml), thờm 75ml dung dịch NH4Cl – EDTA (A) rồi trộn đều. Cho hỗn hợp mẫu chảy qua cột với tốc độ 7 ữ 10 ml/phỳt. Bỏ qua phần dung dịch ban đầu, thu 25ml phần dung dịch sau vào bỡnh định mức.
- Trong vũng 15 phỳt sau khi thu được mẫu, cho 1ml thuốc thử phõn tớch rồi đo trờn mỏy so mầu ở bước súng 543nm sau 10 phỳt nhưng khụng lõu hơn 2 giờ.
Lưu ý: Khụng cần phải rửa cột giữa cỏc mẫu khỏc nhau. Trong trường hợp khụng dựng cột ngay trong vài giờ hoặc lõu hơn, lấy 50ml dung dịch NH4Cl - EDTA (A) cho chạy qua cột một phần, một phần giữ lại ở trong cột, khụng để cột bị khụ.
Lập đường chuẩn
Sử dụng dung dịch nitrat làm việc để chuẩn bị cỏc điểm dung dịch chuẩn trong khoảng 0,05 đến 1,0 mgNO3--N/l bằng cỏch lấy cỏc thể tớch 0,5; 1,0; 2,0; 5,0 (ml) vào bỡnh định mức 100ml rồi định mức đến vạch. Tiến hành khử rồi so màu mẫu chuẩn chớnh xỏc như làm với mẫu.
Tớnh toỏn kết quả
Xõy dựng đường chuẩn, dựa vào đường chuẩn tớnh ra hàm lượng NO2--N trong mẫu khử. Nếu như NO2--N khụng được tỏch ra khỏi mẫu trước khi phõn tớch thỡ kết quả thu được là tổng hàm lượng của N- NO2- và N-NO3-. Để xỏc định riờng nồng độ N-NO3- cần xỏc định nồng độ N-NO2- trong mẫu trước rồi trừ đi giỏ trị này.
(adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});