∗ánh giá tác dΗng ch∆ α-glucosidase và α-amylase c.a 9 mΤu d1Βc li∃u ∗1Βc sΓ dΗng chΧa ti<u ∗1Φng Ι Lebanon. K∆t qu0 cho th:y d4ch chi∆t methanol c.a 2 loài
Marrubium radiatum và Salvia acetabulosa có tác dΗng m;nh nh:t. >Αi v+i d4ch chi∆t chloroform thì hai loài Calamintha origanifolia và Erythraea centaurium l;i
th< hi∃n ho;t tính ≅c ch∆ m;nh h,n trong khi tác dΗng c.a d4ch chi∆t hexane c.a C.
origanifolia là m;nh nh:t (Loizzo et al., 2008). Sinh v)t bi<n c8ng là mΚt nguΛn
cung c:p các ho;t ch:t ≅c ch∆ α-glucosidase và α-amylase. T2 mΚt loài h0i miên
Penares ng1Φi ta ∗ã phân l)p ∗1Βc hai hΒp ch:t ∗;i phân tΓ có ch≅a sulphate là penarolide sulfate A1 và A2 ≅c ch∆ m;nh enzym α-glucosidase v+i giá tr4 IC50 là 1,2 và 1,5 µg/ml (Nakao et al., 2000). M+i ∗ây, hai hΒp ch:t bromophenol có tác dΗng ≅c ch∆ α-glucosidase ∗ã ∗1Βc phân l)p t2 loài t0o ∗[ Grateloupia elliptica.
K∆t qu0 này ∗ã ch≅ng minh t0o ∗[ G. elliptica và hai hΒp ch:t trên có th< sΓ dΗng làm thΕc ph?m ch≅c nΘng ∗< chΧa tr4 ti<u ∗1Φng (Kima et al., 2008).
c. Tình hình nghiên c u ∆ Vi2t Nam v3 các h.p ch/t thiên nhiên có tác dΧng c ch% α-glucosidase ch% α-glucosidase
Vi∃t Nam có nguΛn tài ngun thiên nhiên vơ cùng phong phú trong ∗ó r:t nhi7u lồi ∗Κng-thΕc v)t, n:m c8ng nh1 sinh v)t bi<n ∗1Βc sΓ dΗng trong y hΡc c truy7n ∗< phòng chΑng, hΟ trΒ và chΧa tr4 ti<u ∗1Φng. Tác dΗng chΧa ti<u ∗1Φng c.a cây M1+p ∗6ng M. charantia ∗ã ∗1Βc các nhà khoa hΡc trên th∆ gi+i khαng ∗4nh qua nhi7u cơng trình nghiên c≅u. T;i Vi∃t Nam, nhóm nghiên c≅u c.a Ph;m Th4 Di∃u H;nh tr1Φng >H Cϑn Th, ∗ã khαng ∗4nh thêm cao chi∆t h;t M1+p ∗6ng có tác dΗng ≅c ch∆ m;nh ho;t tính α-glucosidase. Kh0o sát chi∆t b&ng các dung môi
khác nhau cho th:y cao chi∆t cΛn có ho;t tính tΑt nh:t, ti∆p ∗∆n là cao chi∆t chloroform còn chi∆t b&ng ete dϑu h[a khơng có ho;t tính. >i7u này cho phép dΕ ∗oán thành phϑn hóa hΡc có tác dΗng ≅c ch∆ α-glucosidase là nhΧng hΒp ch:t phân cΕc tan tΑt trong dung môi cΛn (Ph;m Th4 Di∃u H;nh et al., 2007). M+i ∗ây, các nhà khoa hΡc Vi∃t Nam và Hàn QuΑc ∗ã phân l)p ∗1Βc 14 hΒp ch:t khung cucurbitane glycoside t2 qu0 M1+p ∗6ng. Toàn bΚ 14 hΒp ch:t này ∗7u th< hi∃n tác dΗng ≅c ch∆ α-glucosidase r:t m;nh và m;nh h,n c0 ∗Αi ch≅ng d1,ng là acarbose. >ây là lϑn ∗ϑu tiên nhóm nghiên c≅u này ch≅ng minh ho;t tính ≅c ch∆ α- glucosidase c.a nhóm ch:t cucurbitane glycoside này (Nhiem et al., 2010a). Ngồi ra ho;t tính α-glucosidase c.a thành phϑn charantin trong qu0 m1+p ∗6ng c8ng ∗1Βc khαng ∗4nh v+i giá tr4 IC50 là 28,7 µg/ml (NguyΣn NgΡc H;nh et al., 2007).
Cây Dâu t&m c8ng ∗1Βc bi∆t là mΚt d1Βc li∃u có tác dΗng chΧa ti<u ∗1Φng r:t hi∃u qu0. Nhóm nghiên c≅u c.a Ph;m Thi∃n NgΡc ∗ã ch≅ng minh d4ch chi∆t methanol 75% c.a bΚt lá Dâu có tác dΗng ≅c ch∆ m;nh ho;t tính α-glucosidase (Ph;m Thi∃n NgΡc et al., 2006). M+i ∗ây, ba hΒp ch:t geranyl aurone m+i phân l)p ∗1Βc t2 cây
Xa kê Artocarpus altilis c8ng ∗1Βc phát hi∃n th< hi∃n ho;t tính ≅c ch∆ enzym α- glucosidase v+i giá tr4 IC50 t2 4,9 ∗∆n 5,4 µM (Mai et al., 2012).
1.9. MξT Sπ PHΩςNG PHÁP PHψ CξNG HΩηNG Tϕ HδT NHÂN TRONG XÁC >ζNH CκU TRÚC HÓA HφC C|A CÁC HΞP CHκT TRAO >ψI THχ CκP (NguyΣn >ình Tri∃u, 2001; 2005; >ào >ình Th≅c, 2007; Trϑn VΘn Sung, 2002).
Ph cΚng h1Ιng t2 h;t nhân là mΚt ph1,ng pháp ph hi∃n ∗;i và hΧu hi∃u nh:t hi∃n nay. V+i vi∃c sΓ dΗng k∆t hΒp các kι thu)t ph NMR mΚt chi7u và hai chi7u, các nhà nghiên c≅u có th< xác ∗4nh nhanh và chính xác c:u trúc c.a hΒp ch:t, k< c0 c:u trúc l)p th< c.a phân tΓ.
Nguyên lý chung c.a các ph1,ng pháp ph NMR (ph proton và cacbon) là sΕ cΚng h1Ιng khác nhau c.a các h;t nhân t2 (1H và 13C) d1+i tác dΗng c.a tr2 tr1Φng ngoài. SΕ cΚng h1Ιng khác nhau này ∗1Βc bi<u diΣn b&ng ∗Κ chuy<n d4ch
hoá hΡc (chemical shift). Ngoài ra, ∗=c tr1ng c.a phân tΓ còn ∗1Βc xác ∗4nh dΕa vào t1,ng tác spin giΧa các h;t nhân t2 v+i nhau (spin coupling).
1 Φ c/ h∋1 g h) h 1H-NMR)
N∆u giΧa hai hay nhi7u h;t nhân có các t1,ng tác spin-spin thì ng1Φi ta nói ∗∆n h∃ h;t nhân và các h;t nhân này ∗1Βc ký hi∃u b&ng các chΧ cái A, B, C,…M, X, Y…
NhΧng h;t nhân c.a cùng mΚt lo;i nhân và có ∗Κ chuy<n d4ch hóa hΡc giΑng nhau ∗1Βc gΡi là các h;t nhân t1,ng ∗1,ng và kí hi∃u b&ng mΚt chΧ cái; còn sΑ l1Βng các h;t nhân này ∗1Βc ghi b&ng chΧ sΑ Ι d1+i bên ph0i, ví dΗ A2B, A3X… SΕ ∗ánh giá các ph phΗ thuΚc vào tρ l∃ c.a hi∃u sΑ ∗Κ d4ch chuy<n hóa hΡc và h&ng sΑ t1,ng tác spin.
Trong ph 1H-NMR, ∗Κ chuy<n d4ch hóa hΡc (δ) c.a các proton ∗1Βc xác ∗4nh trong thang ppm t2 0-14 ppm, tùy thuΚc vào m≅c ∗Κ lai hóa c.a nguyên tΓ c8ng nh1 ∗=c tr1ng riêng c.a t2ng phϑn. MΟi proton cΚng h1Ιng Ι mΚt tr1Φng khác nhau, vì v)y chúng ∗1Βc bi<u diΣn b&ng ∗Κ chuy<n d4ch hóa hΡc khác nhau. DΕa vào ∗=c tr1ng c.a ∗Κ chuy<n d4ch hóa hΡc và t1,ng tác spin ∗< có th< xác ∗4nh ∗1Βc c:u trúc hóa hΡc c.a hΒp ch:t.
2 c/ ∋1 > ) 13C-NMR)
Ph này cho tín hi∃u v;ch ph cacbon. MΟi nguyên tΓ cacbon sβ cΚng h1Ιng Ι mΚt tr1Φng khác nhau và cho tín hi∃u ph khác nhau. Ph 13C-NMR có ý nghλa r:t quan trΡng trong vi∃c xác ∗4nh c:u trúc c.a các ch:t. >Κ chuy<n d4ch hóa hΡc n&m trong mΚt vùng rΚng h,n nhi7u so v+i ph 1H-NMR, t2 0-230 ppm. Ngồi ra, ph 13C-NMR cịn ∗1Βc ghi theo ph1,ng pháp DEPT: Ph này cho ta tín hi∃u phân lo;i các lo;i cacbon khác nhau. Trên ph DEPT, tín hi∃u c.a các cacbon b)c bΑn bi∆n m:t. Tín hi∃u c.a CH và CH3 n&m v7 mΚt phía và c.a CH2 v7 mΚt phía trên ph DEPT 135o. Trên ph DEPT 90o chΜ xu:t hi∃n tín hi∃u c.a các CH.
Ph HS e m C e)
Ph HSQC cho bi∆t sΕ liên quan giΧa các tín hi∃u c.a 1H (chi7u w1) v+i các tín hi∃u c.a 13C (chi7u w2). Ph HSQC có th< bi<u diΣn d1+i d;ng bi<u ∗Λ n i ho=c
bi<u ∗Λ ∗1Φng vi7n, bi<u ∗Λ ∗1Φng vi7n có nhi7u 1u ∗i<m h,n. BΙi vì nhΧng thơng tin v7 ∗Κ chuy<n d4ch hoá hΡc là khác nhau Ι hai chi7u cho nên ph HSQC là không ∗Αi x≅ng qua ∗1Φng chéo. η các ph ∗Λ sau ∗ây chi7u c.a 1H (w1) ∗1Βc vβ n&m ngang còn chi7u c.a 13C (w2) ∗1Βc vβ thαng ∗≅ng. Ph HSQC cho bi∆t thông tin v7 nhΧng proton 1H ∗ính trΕc ti∆p v+i nguyên tΓ 13C.
η các ph HSQC chΜ nhΧng tín hi∃u c.a các nhóm CHn v+i n ∼ 1 m+i th:y ∗1Βc. >i7u ∗ó có nghλa là khơng có các thơng tin v7 C b)c bΑn.
PhΦ HM i )
>ây là ph bi<u diΣn t1,ng tác xa trong phân tΓ. NhΦ vào các t1,ng tác trên ph này mà t2ng phϑn c.a phân tΓ c8ng nh1 toàn bΚ phân tΓ ∗1Βc xác ∗4nh v7 c:u trúc. Ph HSQC b4 h;n ch∆ chΜ Ι t1,ng tác qua mΚt liên k∆t và sβ trΙ thành kém nh;y n∆u t1,ng tác xa 1H, 13C còn l;i quá nh[. Trong tr1Φng hΒp nh1 v)y ng1Φi ta sΓ dΗng ph HMBC. Ph này là ∗=c bi∃t thích hΒp trong tr1Φng hΒp phân tΓ có ch≅a C b)c bΑn vì ph này th< hi∃n mΑi liên quan c.a tín hi∃u proton 1H Ι mΚt nguyên tΓ 13C v+i tín hi∃u c.a nguyên tΓ 13C khác Ι cách xa nó 2, 3 liên k∆t th)m chí trong mΚt sΑ tr1Φng hΒp là 4 liên k∆t.
5 Φ 1H-1H Ch m S o S copy)
Ph 1H-1H COSY bi<u diΣn các t1,ng tác xa c.a H-H, ch. y∆u là các proton ∗ính v+i cacbon li7n k7 nhau. NhΦ ph này mà các phϑn c.a phân tΓ ∗1Βc nΑi ghép l;i v+i nhau. Tín hi∃u thu ∗1Βc trên ph COSY có hình d;ng d:u th)p.
PhΦ N rhaus oscopy)
Ph hai chi7u 1H-1H COSY có hi∃u ≅ng NOE ∗1Βc gΡi là NOESY. Ph này bi<u diΣn các t1,ng tác xa trong không gian c.a các proton không k< ∗∆n các liên k∆t mà chΜ tính ∗∆n kho0ng cách nh:t ∗4nh trong không gian (kho0ng 4Ao). DΕa vào k∆t qu0 ph này có th< xác ∗4nh c:u trúc không gian c.a phân tΓ. T1,ng tΕ nh1 ph COSY, khi có hai nhóm proton t1,ng tác v+i nhau thì tín hi∃u c.a chúng th< hi∃n ra Ι bΑn ∗Μnh hình vng, trong ∗ó hai ∗Μnh n&m trên ∗1Φng chéo.