transesterification)
Cân chính xác một lượng bột sinh khối tảo cho vào bình thủy tinh có nắp vặn kín, chịu nhiệt và chịu dung môi. Hỗn hợp dung môi phản ứng và chất xúc xác được chuẩn bị riêng vào một bình tam giác, bao gồm acid sulfuric (H2SO4) tan trong methanol theo tỷ lệ 0,04 mol H2SO4 (tương ứng với nồng độ xúc tác acid 100% tính theo hàm lượng dầu có chứa trong sinh khối tảo). Lượng methanol sử dụng được tính dựa trên hàm lượng dầu chứa trong sinh khối tảo theo tỷ lệ 15:1 (v/w). Toàn bộ hỗn hợp dung môi và xúc tác được cho vào bình chứa bột sinh khối tảo. Bình phản ứng được đặt trên máy khuấy từ có gia nhiệt. Nhiệt độ phản ứng duy trì ở 60o
C trong 4 giờ. Sau thời gian phản ứng, bình phản ứng được để nguội ở nhiệt độ phòng trong khoảng 1 giờ, lọc hỗn hợp phản ứng, rửa cặn bằng methanol để thu hồi tối đa sản phẩm của phản ứng chứa trong phần cặn. 50 ml nước cất được bổ sung vào dịch lọc để phân tách các thành phần ưa nước và kỵ nước; sau đó toàn bộ hỗn hợp được chuyển sang phễu chiết. Để thu được thành phần methyl ester của các acid béo (chính là biodiesel, FAMEs), bổ sung hexan vào phễu chiết và lắc đều hỗn hợp, hỗn hợp phân thành 2 lớp trong phễu chiết: lớp kỵ nước chứa hexan, FAMEs, glycerides; lớp nước phía dưới chứa glycerol, chất xúc tác và metanol dư thừa. Quá trình rửa bằng hexan được lặp lại 3 lần. Lớp kỵ nước phía trên chứa biodiesel được thu hồi, sau đó được rửa với nước để loại bỏ methanol và chất xúc tác acid. Bổ sung natri sulphate khan để loại nước. Lọc hỗn hợp để thu hồi biodiesl (còn lẫn hexan), làm bay hơi hexan trong máy cô quay chân không để thu được sản phẩm biodiesel cuối cùng. Toàn bộ quá trình chuyển hóa được tóm tắt trong sơ đồ hình 10 (Ehimen và cs., 2010).