h. Độ phõn giải và cỏc yếu tố ảnh hưởng (sự tỏch hai chất)
2.4. Phương phỏp thu thập mẫu thực phẩm để phõn tớch
Nghiờn cứu này sử dụng phương phỏp lấy mẫu phõn tầng [38]. Đõy là phương phỏp phự hợp nhất trong việc phõn tớch và xõy dựng cơ sở dữ liệu cỏc thành phần thực phẩm. Mẫu tổng thể thực phẩm được phõn tầng theo vựng địa lý, theo mựa, theo mức độ tiờu thụ, hoặc theo khu vực phõn phối trờn thị trường, cỏc điểm bỏn lẻ,... Trong đề tài này, mẫu được lựa chọn ngẫu nhiờn từ cỏc chợ bỏn lẻ trờn thị trường Hà Nội và số liệu thu được sẽ đại diện cho khu vực này.
Đối tượng mẫu: gồm 3 loại thực phẩm
1. Đậu tương (đậu nành), cỏc sản phẩm chế biến từ đậu tương: đậu phụ, sữa đậu nành
2. Cỏ nước ngọt (trắm, trụi, cỏ quả, rụ phi, chộp); Cỏ nước mặn (thu, nục, cỏ chim trắng, cỏ hồng, cỏ cam)
3. Thịt cỏc loại (thịt lợn, thịt gà, thịt bũ, thịt bờ).
Cỡ mẫu được tớnh toỏn theo cụng thức sau [38]
N ≥ (t n-1)2 SD2 / (A x )2 trong đú: N là cỡ mẫu (số lượng mẫu)
A là độ chớnh xỏc của kết quả phõn tớch (cú giỏ trị 0,1 hoặc 0,05)
là giỏ trị trung bỡnh (kết quả phõn tớch) của quần thể, thu được từ
cỏc nghiờn cứu trước đõy
SD độ lệch chuẩn của giỏ trị trung bỡnh
t là giỏ trị thu được từ bảng thống kờ chuẩn (bảng Student), với là giới hạn tin cậy (95% hoặc 99%)
Như vậy, để cú số liệu đảm bảo độ chớnh xỏc 0,1 cần lấy 17 mẫu phõn tớch axớt amin. Trong khuụn khổ của đề tài này chỳng tụi chọn cỡ mẫu phõn tớch tối thiểu là n = 17, với độ chớnh xỏc là 0,1.
Cỏc chỉ tiờu phõn tớch: 17 loại axớt amin
Thu thập mẫu
Thu thập mẫu đậu, đỗ, thịt
Mẫu được thu thập bằng cỏch bốc thăm ngẫu nhiờn từ cỏc chợ đại diện cho 9 quận nội thành Hà Nội, gồm Chợ Thỏi Hà, chợ Hụm, chợ Mơ, chợ Trương Định, chợ Hàng Da, chợ Ngó Tư Sở, chợ Thành Cụng, chợ Lờ Quý Đụn và chợ Ngụ Sĩ Liờn.
Thu thập mẫu cỏ
Mẫu nghiờn cứu gồm 10 loại cỏ đại diện cho 50 mẫu cỏ: 5 loại cỏ nước ngọt (trắm, trụi, cỏ quả, rụ phi, chộp); 5 loại cỏ nước mặn (thu, nục, cỏ chim trắng, cỏ hồng, cỏ cam). Mẫu được lấy ngẫu nhiờn bằng cỏch mua tại 5 chợ lớn tại Hà Nội, mỗi mẫu mua ớt nhất 3 con, đưa về phũng thớ nghiệm trong thời gian khụng quỏ hai giờ. Ở phũng thớ nghiệm mẫu được phõn loại, lọc lấy phần ăn được (loại bỏ phủ tạng, vẩy, võy, xương), sau đú mẫu được xay nhuyễn, làm đồng nhất và tiến hành thủy phõn ngay trong ngày lấy mẫu; phần mẫu lưu cho vào hộp sạch bảo quản trong tủ lạnh õm sõu - 20oC.
* *
Túm lại, thụng qua phương phỏp nghiờn cứu chỳng tụi đó đưa ra được hai
mục tiờu nghiờn cứu chớnh như sau:
- Thứ nhất, trờn cơ sở lý thuyết của kỹ thuật sắc ký lỏng hiệu năng cao, theo tớnh chất của chất phõn tớch và trờn cơ sở điều kiện phũng thớ nghiệm, chỳng tụi tập trung nghiờn cứu khảo sỏt thụng số mỏy, ảnh hưởng của pha tĩnh và pha động đến quỏ trỡnh tỏch và phõn tớch, chọn phương phỏp thuỷ phõn, điều kiện dẫn xuất,… chỳng tụi đó xõy dựng được phương phỏp để tối ưu húa cỏc điều kiện điều kiện để tỏch và xỏc định đồng thời 17 axớt amin trong thực phẩm bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC).
- Thứ hai, ỏp dụng phương phỏp đó xõy dựng trờn trong quỏ trỡnh nghiờn
cứu. Trờn cơ sở tham khảo cỏc quỏ trỡnh xử lý mẫu của cỏc tỏc giả trước đõy trờn thế giới, chỳng tụi đó cải tiến một số giai đoạn của quỏ trỡnh xử lý mẫu để ỏp dụng tốt tại cỏc phũng thớ nghiệm tại Việt Nam khi thiếu cỏc thiết bị hiện đại. Nhưng đồng thời vẫn phải ỏp dụng được quy trỡnh đó được thay đổi trờn đõy để phõn tớch trờn nhiều đối tượng thực phẩm mà khụng gõy ra sai số và phải cú độ lặp lại tốt.