Nguyên lý kỹ thuật ELISA Sandwich

Một phần của tài liệu (LUẬN án TIẾN sĩ) ứng dụng kỹ thuật xét nghiệm ái tính kháng nguyên giới hạn (LAG avidity) và hệ số phân loại sai để ước tính tỷ lệ mới nhiễm HIV trên một số nhóm có nguy cơ cao lây nhiễm HIV ở việt nam (Trang 31 - 32)

Dựa trên cách chuẩn b các kháng nguyên, các sinh phẩm được chia thành 4 thế h [3]:

- Thế hệ thứ nhất sử dụng kh ng nguy n l vi r t to n phần được ly giải và

tinh chế từ các tế b o đã gây nhiễm với HIV. Các sinh phẩm n y có độ nhạy v độ đặc hi u hạn chế.

- Thế hệ thứ hai dùng các kháng nguyên là protein tái tổ hợp. Sinh phẩm có

độ nhạy v độ đặc hi u cao hơn.

- Thế hệ thứ ba sử dụng các kháng nguyên là các peptite tổng hợp và các

protein tái tổ hợp. Độ nhạy v độ đặc hi u được cải thi n rõ r t.

- Thế hệ thứ tư phát hi n đồng thời kháng nguyên P24 và kháng thể có trong

mẫu thử, sinh phẩm này cho phép phát hi n nhiễm HIV trong giai đoạn chuyển đổi huyết thanh và là sinh phẩm được khuyến cáo nên lựa chọn cho kiểm tra an toàn trong truyền máu.

1.4.1.4. K thu t Western-blot (hình 1.12)

Kỹ thuật Western-blot là tiêu chuẩn vàng được chỉ đ nh để x t nghi m khẳng đ nh cuối cùng các mẫu đã có kết quả dương tính với xét nghi m s ng lọc. ỹ thuật này có độ đặc hi u rất cao (100%) v chỉ dùng để l m x t nghi m khẳng đ nh m kh ng dùng l m x t nghi m s ng lọc. Kỹ thuật Western Blot có gi th nh cao hơn tất cả các xét nghi m trên, người thực hi n x t nghi m v đọc kết quả cần phải có tr nh độ v kinh nghi m nhất đ nh n n hi n nay WHO không khuyến cáo thực hi n thường

quy ở những nước đang ph t triển. WHO khuyến c o dùng phối hợp ba xét nghi m khác nhau về nguyên lý hoặc cách chuẩn b kh ng nguy n theo chiến lược III để chẩn đo n khẳng đ nh trường hợp HIV dương tính. Trường hợp sử dụng c c sinh phẩm để chẩn đo n nhiễm HIV theo chiến lược x t nghi m III cho kết quả kh ng x c đ nh hoặc khó bi n luận, khi đó Western-blot được cân nhắc sử dụng để x t nghi m [28].

Theo WHO xét nghi m Western Blot HIV-1 dương tính khi xuất hi n ít nhất 02 trong 03 dải băng protein vỏ Env (gp160, gp120, gp41) có thể có hoặc khơng có các dải băng Gag hoặc Pol. Trường hợp âm tính khi khơng có bất cứ dải băng n o. Ngo i ti u chuẩn dương tính v âm tính l trường hợp kết quả kh ng x c đ nh (hình 1.12) [28].

Một phần của tài liệu (LUẬN án TIẾN sĩ) ứng dụng kỹ thuật xét nghiệm ái tính kháng nguyên giới hạn (LAG avidity) và hệ số phân loại sai để ước tính tỷ lệ mới nhiễm HIV trên một số nhóm có nguy cơ cao lây nhiễm HIV ở việt nam (Trang 31 - 32)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(147 trang)