2.4. Hoạt tớnh sinh học của cỏc hợp chất điều chế được
2.4.1. Đỏnh giỏ hoạt tớnh bằng xỏc định đường kớnh vũng vụ khuẩn
Khảo sỏt hoạt tớnh sinh học bằng phương phỏp xỏc định đường kớnh vũng vụ khuẩn được thực hiện tại phũng Vi Sinh - Bệnh viện 19-8 Bộ Cụng An.
Cỏc chất được dựng thử hoạt tớnh:
- Dóy 1: cỏc dẫn xuất thioureidoaryl-1,3,4-oxadiaxol-2-thiol IIIa-g; - Dóy 2: cỏc dẫn xuất isothioxianat IVa-g;
- Dóy 3: cỏc dẫn xuất thiosemicacbazit Va,b,g; thiadiazol VIa, g; - Dóy 4: cỏc dẫn xuất (2-hiđroxietyl)thioure VIIa-d,g;
- Dóy 5: cỏc dẫn xuất thiazolin VIIIa-d,f;
- Dóy 6: cỏc dẫn xuất ngưng tụ với p-cloroanilin IXa-d,f,g; - Dóy 7: cỏc dẫn xuất quinazolin Xa-d,f,g;
- Dóy 8: cỏc dẫn xuất thiohidantoin XIa-g; XIIa-g; XIIIa,b,e-g; XIVa-g; XVa- d,f,g; XVIa-e,g; XVIIa-g.
Cỏc chủng vi khuẩn được dựng thử nghiệm: - Vi khuẩn Gram(-): E.coli.
- Vi khuẩn Gram(+): S. epidermidis và E. pider. - Chủng nấm men: C. albicans.
Dựng micropipet đưa một lượng nhất định dung dịch chất thử nghiệm nồng độ 3-5M (hoặc 1-2mg/ml) trong DMSO lờn giấy được cố định vi sinh vật kiểm định. Xử
được xỏc định bằng đường kớnh vựng ức chế sự phỏt triển của vi sinh vật (vũng vụ khuẩn) sau một thời gian ủ ở nhiệt độ tối ưu đối với mỗi chủng vi sinh vật. Kết quả thử hoạt tớnh sinh học của cỏc hợp chất thử nghiệm được thể hiện trờn hỡnh 2.31-2.33 và bảng 3.44 (xem phần thực nghiệm).
Vi khuẩn Gram (+)
+ Chủng E.Pider:
- Cú 10 hợp chất õm tớnh ở liều lượng 100μl, gồm VIIb-d; VIIa-d; XIc; XIVe,f và 5 hợp chất õm tớnh ở liều lượng 150μl, gồm VIId, VIIa-c, XIc.
- Cỏc hợp chất dương tớnh với đường kớnh vũng vụ khuẩn 22-33mm ở liều lượng 150μl gồm: thioure IIIa-g, IXa-d,f,g, isothioxianat IVa-g, cỏc
thiosemicacbazit Va,b,g, cỏc thiadiazol VIa,g và cỏc dẫn xuất thiohidantoin chứa Cl, Br, OH ở vị trớ octo của nhõn aryl trong hợp phần oxadiazol.
+ Chủng S.epidermidis:
- Cú 5 hợp chất cú hoạt tớnh: IIIa, IVa,b,g và XVIIb, trong đú 2 hợp chất IVb
và IVg cú đường kớnh vụ khuẩn 30mm ở liều lượng 100μl và 35mm ở 150μl.
Khuẩn Gram (-) E.coli
Cú 27 chất thử nghiệm cú hoạt tớnh với khuẩn E.coli: Vg; VIIc; VIIIf; IXa,b,d;
Xc,f; XIe,f; XIIa,b,d-g; XIIId-f; XIVa; XVa; XVId,e; XVIIe,f trong đú cú 8 hợp chất XIe, XIIb, XId,e; XIIId,e,f và XIVa cho đường kớnh vũng vụ khuẩn từ 17-26mm, cỏc
hợp chất cũn lại cho đường kớnh vụ khuẩn dao động trong khoảng 8-12mm.
Nấm men C.albicans
Kết quả trong bảng 3.44 (phần thực nghiệm) cho thấy hầu hết cỏc chất thử nghiệm đều cú khả năng chống nấm men, riờng cỏc hợp chất thuộc dóy thiosemicacbazit Va,b,g, cỏc hợp chất chứa vũng thiadiazol VIa,g cỏc thioure IXa-g và cỏc dẫn xuất thiohidantoin chứa Cl, Br, OH ở vị trớ octo của nhõn aryl trong hợp phần
oxađiazol cú hoạt tớnh cao, cho đường kớnh vũng vụ khuẩn từ 23-32mm ở liều lượng 150μl. Đõy là cỏc đối tượng cú thể dựng để nghiờn cứu tiếp theo để ứng dụng làm