Chƣơng 2 : ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.2. Phƣơng pháp nghiên cứu
2.2.3. Các chỉ số nghiên cứu
2.2.3.1. Một số đặc điểm cận lâm sàng - Tinh dịch đồ: + Mật độ. + Tỷ lệ sống. + Độ di động. + Bất thƣờng hình thái. + Thể tích. + pH. Mức 1 2 3 4
58
- Các yếu tố sinh học, xã hội và đời sống gồm: + Trình độ văn hóa.
+ Nghề nghiệp. + Hút thuốc lá. + Sử dụng chất cồn. + Hoạt động thể chất.
+ Nhóm máu, tiền sử dị ứng, tiền sử cao huyết áp, nhồi máu cơ tim...
2.2.3.2. Tác động của các đa hình gen mã hóa enzym chuyển hóa xenobiotics đến vô sinh nam
- Gen CYP1A1 2455A>G (I462V); - Gen NAT2: 590G>A (R197Q);
481C>T (L161L); - Gen GSTP1: 313G>A (I105V);
341C>T(A114 V). * Các bƣớc nghiên cứu gồm:
- Lập bệnh án di truyền theo mẫu của nghiên cứu.
- Xét nghiệm tinh dịch đồ, phân tích các chỉ số: Mật độ tinh trùng, tỷ lệ sống, tỷ lệ các loại di động, tốc độ di chuyển của tinh trùng, tỷ lệ bất thƣờng hình thái tinh trùng…
- Xác định tần số alen và kiểu gen của các đa hình gen CYP1A1, NAT2, GSTP1 ở nhóm nghiên cứu và nhóm chứng bằng kỹ thuật ARMS-PCR.
- Thống kê, phân tích kết quả để xác định mối tƣơng quan giữa các đa hình gen mã hóa xenobiotics với vơ sinh nam ngun phát, và mức độ stress oxy hóa trong tinh dịch.
59
Quá trình nghiên cứu đƣợc thực hiện với các bƣớc theo sơ đồ sau:
Sơ đồ 2.1. Sơ đồ nghiên cứu
Nghiên cứu mô tả cắt ngang có đối chứng
170 BN nam vơ sinh ngun phát
XN xác định đa hình gen chuyển hóa xenobiotics XN xác định mức độ stress oxy hóa
Tƣ vấn di truyền Thống kê về nhân khẩu: Tuổi Nghề nghiệp Tiền sử + Bản thân + Gia đình
Mơ tả đặc điểm tinh dịch: Mật độ TT Tỷ lệ sống Độ di động Bất thƣờng hình thái… Xác định tần số alen và kiểu gen của các đa hình
gen mã hóa xenobiotics ở nhóm
nghiên cứu và nhóm chứng
Xác định mối tƣơng quan giữa các đa hình gen mã hóa xenobiotics với vô sinh nam nguyên phát, và mức độ stress oxy
hóa trong tinh dịch
170 nam giới đã có > 1 con
Lập bệnh án di truyền Xét nghiệm tinh dịch đồ
60