Dụng cụ, trang thiết bị

Một phần của tài liệu nghiên cứu phát hiện đột biến gen col1a1 gây bệnh tạo xương bất toàn (Trang 34)

ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.3.1. Dụng cụ, trang thiết bị

- Tủ lạnh : 40C, -20 ºC, -80 ºC

- Dụng cụ thủy tinh: Ống nghiệm pha hóa chất, cốc thủy tinh, ống đong, bình nón, cốc thủy tinh.

- Pipet định mức và đầu côn các loại 1000µl, 200µl, 100µl, 20µl, 10µl, 2.5µl

- Ống Eppendorf

- Găng tay, giấy thấm vô trùng

- Tủ sấy, tủ ấm

- Khay đổ gel

- Cân điện tử

- Lò vi sóng (Saiko)

- Máy ly tâm để bàn Eppendorf (Đức): Centrifuge 5424R và Hitachi (Nhật).

- Máy rung lắc nhiệt: Thermomixer 5437 và Thermomixer comfort cho ống 1,5ml và Mixmate cho ống 2ml.

- Máy điện di: Mupid (Nhật Bản)

- Máy soi gel và chụp ảnh tự động: EC3 Imaging system

- Máy đọc huỳnh quang

- Máy đo OD: Nanodrop 1000

- Máy PCR: Eppendorf

- Máy giải trình tự gen tự động: ABI-3100

2.3.2. Hóa chất

- Hóa chất tách chiết DNA:

+ Dung dịch Lysis buffer gồm: Succarose 0.3M, Trisbase-HCl (pH7.5) 0.01M, MgCl2 0.05M, Trixton X-100 1% và nước cất.

+ Dung dịch K gồm: NaCl 0.075M, EDTA (Ethylendiamin Tetraacetic Acid) 0.024M (pH 8.0)

+ Dung dịch SDS (Sodium dodecyl sulfate) 10%

+ Proteinase K (10mg/ml)

+ Dung dịch Phenol : Chloroform : Isoamyl (25 : 24 :1)

+ Dung dịch Chloroform : Isoamyl (24 : 1)

+ Ethanol 100%, ethanol 70% bảo quản lạnh

+ Sodium acetate CH3COONa 3M (pH=5.2).

+ Dung dịch hòa tan DNA: đệm TE (Tris - EDTA)

- Hóa chất cho PCR:

+ Thành phần của PCR Master Mix gồm:

+ 10 X Buffer

+ GOLTAQ chứa: dNTPs, Taq polymerase, MgCl2

- Hóa chất chạy điện di:

+ Dung dịch đệm TBE (Tris Borate EDTA) 1X gồm: Tris base, boric acid và EDTA (pH 8.0)

+ Agarose 1%

+ DNA thang chuẩn (marker)

- Hóa chất cho giải trình tự:

+ Ethanol 95%

+ Hi - Di™ Formamide (bảo quản lạnh -20oC)

+ Big dye

+ Cột lọc

Một phần của tài liệu nghiên cứu phát hiện đột biến gen col1a1 gây bệnh tạo xương bất toàn (Trang 34)

Tải bản đầy đủ (DOCX)

(69 trang)
w