Quy trình thu nhận - Thiết lập quy trình tách chiế- 123docz.net

PHẦN II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

3. Kết quả khảo sát đơn yếu tố các thông số kỹ thuật của phản ứng

3.5. Thiết lập quy trình tách chiết dầu Hufas thơ từ cá trích và cá lồng

3.6.1. Quy trình thu nhận

Xây dựng quy trình cơng nghệ phân lập dầu cá chất lượng cao từ phụ phẩm chế biến cá trích và cá lồng (đầu. nội quan) chứa đồng thời EPA. và DHA.

Hình 3.17 Sơ đồ quy trình phân lập dầu cá chứa đồng thời EPA và DHA

Mơ tả Quy trình

Bước 1: Dầu được hịa tan với n-hexan trong lọ nhỏ nút kín, bổ sung dung dịch CH3ONa 30% và lắc kỹ trong 1 phút.

Bước 2: Thêm vào Na2SO4 loại sạch, lắc kỹ và đem li tâm ở chế độ 5.000 vòng/phút trong 1 phút.

Bước 3: Dịch trong, sạch ở pha trên được tách riêng, rồi đem phân tích trên máy sắc ký khí GC (HP-6890), cột mao quản: HP-Innowax (30 m × 0,25 mm, df 0,25 μm), khí mang He, chạy theo chương trình nhiệt độ: 2000C trong 10 phút, tăng nhiệt độ từ 200-2300C trong thời gian 5 phút, giữ ở nhiệt độ 2300C trong 10 phút. Nhận dạng axit béo bằng phần mềm chun dụng tính tốn

chuyển đổi qua giá trị thời gian lưu tương đương ELC (Equivalent Chain- lengths of methyl ester derivatives of fatty acids) sử dụng hệ chất chuẩn là C16:0, C18:0.

Sau khi phân tích thành phần và hàm lượng các axit béo, thực hiện xử lý số liệu và đánh giá các axit béo như: EPA-acid béo không no, DHA-acid béo không no, SFA- Axit béo no; UFA- Axit béo không no; n-3: Axit béo omega- 3; n-6: Axit béo omega-6, n-9: Axit béo omega-9 sử dụng 2 chỉ số đánh giá chất lượng dầu béo đối với sức khoẻ con người theo khuyến cáo của tổ chức y tế thế giới (WHO) là tỷ lệ PUFA/SFA và n-3/n-6.

Thành phần: Acid béo không no > 60%; tổng axit béo ω-3 > 30%; EPA 5 - 8%; n-3 DPA 1,0 - 3%; DHA 13 - 27% (Hàm lượng các axit béo phụ thuộc chất lượng nguyên liệu đầu vào), Biến đổi dần sang nâu đến đen khi để trong khơng khí ở nhiệt độ thường,

Xác định thành phần, hàm lượng các axit béo, axit béo EPA, DHA: Theo tiêu chuẩn ISO/DIS 659:1998, LB Đức,

3.6.2. Thực nghiệm

Quá trình xác định hàm lượng EPA và DHA trong mẫu dầu cá đã qua chiết bằng phương pháp chiết Lipit tổng bằng cách sử dụng sắc ký bản mỏng (TLC) và sắc ký khí (GC)

Thực nghiệm: 10 mg lipit tổng được hòa tan với 1 ml n-hexan trong lọ nhỏ nút kín, bổ sung 25 ml dung dịch CH3ONa 30% và lắc kỹ trong 1 phút, Thêm vào 20 mg Na2SO4 loại sạch, lắc kỹ và đem li tâm ở chế độ 5,000 vòng/phút trong 1 phút, Dịch trong, sạch ở pha trên được tách riêng, kiểm tra trên sắc ký bản mỏng (TLC) rồi đem phân tích trên máy sắc ký khí GC (HP- 6890), cột mao quản: HP-Innowax (30 m × 0,25 mm, df 0,25 μm), khí mang He, chạy theo chương trình nhiệt độ: 2000C trong 10 phút, tăng nhiệt độ từ 200- 2300C trong thời gian 5 phút, giữ ở nhiệt độ 2300C trong 10 phút, Nhận dạng

axit béo bằng phần mềm chuyên dụng tính tốn chuyển đổi qua giá trị thời gian lưu tương đương ELC (Equivalent Chain- lengths of methyl ester derivatives of fatty acids) sử dụng hệ chất chuẩn là C16:0, C18:0

3.6.3. Kết quả

Đặt tên mẫu lipid cần phân tích là A1

Loại Tên acid % mẫu A1

1 14:0 2,8±0,2 2 15:0 0,9±0,2 3 16:1n-9 5,9±0,3 4 16:1n-7 5 16:2n-3 6 16:0 22,3±0,4

57 7 17:1n-9 1,0±0,1 8 17:1n-7 0,9±0,2 9 17:0 0,9±0,1 10 18:4n-3 11 18:2n-6 2,1±0,2 12 18:1n-9 22,0±0,3 13 18:1n-7 3,1±0,2 14 18:0 6,0±0,3 15 19:0 0,2±0,1 16 20:5n-3 (EPA) 4,5±0,2 17 20:4n-6 1,9±0,1 18 20:4n-3 19 20:3n-6 20 20:2n-6 21 20:1n-9 2,4±0,1 22 20:0 0,3±0,1 23 22:6n-3 (DHA) 20,3±0,4 24 22:5n-6 0,5±0,1 25 22:5n-3 26 22:3n-6 1,2±0,1

58 27 22:4n-6 0,8±0,1 28 22:1n-9 29 22:0 30 24:1n-9 31 24:0 unknown 0 SFA 33,4±0,3 UFA 66,6±0,3 ω3 24,7±0,2 ω6 6,6±0,2 ω9 31,3±0,3

Bảng chỉ ra kết quả phân tích: có 31 loại axit béo chuỗi dài từ C14 đến C24 được phát hiện trong tổng số lipid, Một số thành phần không xác định có hàm lượng là 0%.

3 nhóm axit béo khơng no có nhiều hoạt tính sinh học là ω3, ω6, ω9; chúng chứa hàm lượng một cách chọn lọc: ω3 (24,7%), ω6 (6,6%) và ω9 (31,3%).

Trong nhóm axit béo khơng no, có 2 loại axit béo thường giàu hoạt tính là DHA (22: 6n-3) và EPA (20: 5n-3) có hàm lượng tương đối cao. Hàm lượng DHA chiếm 20,3%. Hàm lượng EPA chiếm 4,5%.