Phương pháp ựánh giá khả năng ựối kháng của nấm có ắch với nấm

Một phần của tài liệu Nghiên cứu một số vi sinh vật đối kháng nấm fusarium oxysporum gây bệnh héo vàng cây dưa chuột (Trang 37 - 38)

Fusarium

* Trong phòng thắ nghiệm

- Khả năng ựối kháng của nấm có ắch với nấm F. oxysporum bằng kháng sinh trực tiếp: nấm ựối kháng và nấm gây bệnh ựược nuôi cấy trên môi trường PDA. đặt các miếng nấm có ắch và nấm F. oxysporum có ựường kắnh 0,5cm cùng một lúc vào 2 ựiểm ựối xứng qua ựường kắnh ựĩa petri. Các ựĩa ựược ựặt trong tủ ựịnh ôn, nhiệt ựộ 280C (Seiketov, 1982). Mỗi công thức thắ nghiệm 5 lần nhắc lại (5 hộp petri). đánh giá sự ựối kháng sau 7-10 ngày nuôi cấy.

- Khả năng ức chế của nấmcó ắch ựối với nấm F. oxysporum bằng chất kháng sinh bay hơi: úp 2 ựĩa có ựường kắnh bằng nhau cùng chứa môi trường PDA, một ựĩa cấy nấm Có ắch., ựĩa kia cấy nấm nấm F. oxysporum. đối chứng là cặp petri cấy nấm F. oxysporum. Theo dõi khả năng ức chế nấm gây bệnh bởi chất kháng sinh bay hơi do nấm có ắch sinh ra.

- đánh giá hiệu quả ức chế của nấm ựối kháng có ắch với nấm bệnh theo công thức:

(Dc Ờ Dt)

Hiệu quả ức chế (%) = --- x 100 Dc

Trong ựó: - Dt : ựường kắnh tản nấm bệnh trong ựĩa có nấm có ắch. - Dc: ựường kắnh tản nấm bệnh trong ựĩa ựối chứng. * Trong nhà lưới

Nấm có ắch và nấm F. oxysporum ựược nuôi cấy như ựã nêu ở phần trên. Sau 7 ngày hai loại nấm này ựược thu hoạch và pha loãng ở nồng ựộ 109 bào tử/ml ựối với nấm có ắch và 104 bào tử (Bao gồm cả bào tử lớn và bào tử nhỏ) ựối với nấm F. oxysporum. đất ngoài ựồng ruộng ựược khử trùng và lây nhiễm với dung dịch nấm F. oxysporum với nồng ựộ 1x104 bào tử/g ựất và ựược sử dụng là nguồn ựất thắ nghiệm. Hạt dưa chuột ựược trồng trong khay

nhựa. Khi cây ựược 3-4 lá thật thì nhổ nhẹ cây, rửa sạch bộ rễ, nhúng trong dung dịch nấm nồng ựộ 1x109 bào tử/ml trong 20 phút. Sau ựó các cây này ựược trồng trong chậu có chứa 2 kg ựất thắ nghiệm ựã ựược lây nhiễm thêm dung dịch nấm có ắch ở nồng ựộ 109 bào tử/g ựất trước ựó 3 tuần. Cây ựược tưới ẩm hàng ngày. Cây chỉ nhúng trong nước cất khử trùng và trồng trong chậu chỉ có dung dịch nấm F. oxysporum nồng ựộ 1x104 bào tử/ml và trong chậu không có bất cứ dung dịch nấm nấm ựược sử dụng như công thức ựối chứng cây bệnh và ựối chứng cây khỏe. Thắ nghiệm bao gồm 3 công thức, mỗi công thức 5 lần nhắc lại (5 chậu). điều tra ựánh giá bệnh sau 20, 30 và 40 ngày sau trồng.

Một phần của tài liệu Nghiên cứu một số vi sinh vật đối kháng nấm fusarium oxysporum gây bệnh héo vàng cây dưa chuột (Trang 37 - 38)