Hình 3.2. Chế độ chia dịng tỉ lệ 1:20
Kết quả phân tích trên GC-ECD cho thấy, khi sử dụng chế độ chia dòng với tỉ lệ chia dịng thấp 1:5 (hình 3.1) cho các pic gần nhau bị chồng lên nhau, đặc biệt là pic của nội chuẩn (PeCNB) gây ảnh hưởng tới quá trình định lượng. Điều kiện chia dòng cao 1:20 (hình 3.2) cho pic PeCB, HCB tín hiệu thấp, làm tăng ảnh hưởng của đường nền trong q trình phân tích, do đó luận văn sử dụng tỉ lệ chia dòng 1:10 cho pic PeCB, HCB tín hiệu tốt. Như vậy, chế độ chia dòng theo tỉ lệ 1:10 (hình 3.3) sẽ được áp dụng trong các nghiên cứu tiếp theo.
3.1.1.2. Tốc độ khí mang
Tốc độ dịng khí mang ảnh hưởng tới q trình rửa giải chất phân tích ra khỏi cột sắc kí, do đó cần tối ưu hóa tốc độ dịng khí để có thể đạt sắc đồ tốt nhất.
Trong đề tài này, tốc độ dịng khí trong cột được khảo sát từ 0,5; 1,0 tới 1,5 ml/ phút để đánh giá ảnh hưởng của dịng khí. Hình 3.4, 3.5 và 3.6 mơ tả sự ảnh hưởng của tốc độ dịng khí đến q trình xác định nồng độ PeCB, HCB ở các tốc độ khác nhau 0,5 ml/phút (hình 3.4); 1,0 ml/phút (hình 3.5) và 1,5 ml/phút (hình 3.6).
Hình 3.4. Tốc độ khí mang 0,5 ml/phút
Hình 3.5. Tốc độ khí mang 1 ml/phút
Kết quả cho thấy, khi tốc độ khí mang là 0,5 ml/phút, pic PeCB, HCB và các pic khác bị rửa giải chậm; khi tốc độ khí mang tăng lên, pic PeCB bị dịch chuyển về gần pic dung môi, các pic HCB, PeCNB phía sau có chiều hướng bị rửa giải nhanh và gần với nhau hơn nên có hiện tượng bị chồng pic. Như vậy tốc độ dịng khí 1 ml/phút cho pic rửa giải tối ưu nhất và sẽ được chọn để khảo sát các yếu tố phân tích về sau.
3.1.1.3. Chương trình nhiệt độ lị cột
Chương trình nhiệt độ giúp phân tích hỗn hợp các chất trong mẫu giảm bớt thời gian phân tích đối với các chất có điểm sơi rộng, đồng thời giữ ổn định tỉ lệ chiều cao pic và chiều rộng pic do vậy rất thuận lợi cho phân tích định lượng.
Trong sắc kí khí, nếu cột được giữ ở nhiệt độ thấp trong suốt quá trình chạy mẫu, pic đầu tiên được rửa giải rất lâu, kết quả là pic bị rộng và kéo dài thời gian chạy mẫu hơn. Ở nhiệt độ cao, các cấu tử cịn lại tồn tại ở pha khí nhiều hơn, làm chúng được rửa giải nhanh hơn, nhưng thay vào đó, các pic sẽ bị kéo gần lại nhau và không được tách hồn tồn. Trong chương trình nhiệt độ, nhiệt độ ban đầu thường được giữ thấp trong một khoảng thời gian nhất định, sau đó tăng dần nhiệt độ lên để có thể rửa giải các chất theo thứ tự. Sự thay đổi thời gian lưu theo chương trình nhiệt độ, do đó thời gian lưu thường khơng đi kèm với chất phân tích.
Để phân tích PeCB, HCB trên GC-ECD, nhiệt độ lò cột được khảo sát từ 150°C đến 290°C. Chương trình nhiệt độ lị cột bắt đầu từ 150°C được duy trì trong 5 phút để loại bỏ dung mơi lẫn trong mẫu. Sau đó gia nhiệt tới nhiệt độ 290°C với tốc độ khác nhau từ 4°C/phút ; 8°C/phút ; 12°C/phút và 20°C/phút. Để có thể rửa giải tồn bộ PeCB, HCB lưu giữ trên cột, nhiệt độ lị cột sẽ được duy trì ở 290°C trong vòng 8 phút.