Gía trị kỳ vọng:

III. Định lượng acid uric:

6. Gía trị kỳ vọng:

Người lớn dưới 65 tuổi: < 200mg/dl (< 2.3 mmol/l) Người lớn trên 65 tuổi: < 365mg/dl (<3.7 mmol/l) 7. Biện luận:

Ý nghĩa lâm sàng

Rối loạn trao đổi lipid

Cholesterol

Triglycerol <200 mg/dl Không

Cholesterol 200-300 mg/dl Có, nếu HDL-Cholesterol < 35mg/dl

Cholesterol Triglycerides

> 300 mg/dl

> 200 mg/dl Có

Riêng với TG:

< 150 < 1.69 Bình thường, nguy cơ thấp

150 – 199 1.7 - 2.25 Cảnh báo

200 – 499 2.26 - 5.65 Cao

> 500 > 5.56 Rất cao

Các trường ảnh hưởng đến nồng độ của TG:

 Tăng nồng độ TG:

o Tăng nguyên phát: tăng lipid huyết gia đình

o Tăng thứ phát: ăn nhiều mỡ, xơ gan do rượu, đái tháo đường, viêm tuỵ, viêm gan,…

o Glycerid tăng kéo dài tiềm ẩn nguy cơ bệnh tim mạch và thường do lipase (thành mạch máu)

o Sinh lý: thai kỳ

o Thuốc: Estrogen; tamoxifen; glucocorticoids; ức chế protease; ức chế beta không chọn lọc; propofol; isotretinoin; một số thuốc chống loạn thần (clozapine, olanzapine); tacrolimus; sirolimus; cyclosporine; bexarotene; all-trans retinoic acid; L-asparaginase; interferon-α

II. Định lượng Cholesterol:Tổng quát: Tổng quát:

 Cholesterol là steroid chính trong cơ thể, là lipid khơng tan trong máu, đồng thời đóng vai trị quan trọng trong hoạt đợng của tế bào sợi thần kinh, trong việc sản xuất một số hormone

 Cholesterol + protein = phức hợp lipoprotein 1. Chylomicron ở ruột theo bạch mạch và tĩnh mạch cửa 2. Sau đó là VLDL ở gan

3. Nhờ LPL phân cắt tạo IDL 4. Tiếp theo là LDL

Trong đó, gồm 2 loại:

 LDL + ApoB  vận chuyển Cholesterol từ gan đến tế bào ngoại biên: Cholesterol xấu

 HDL + ApoA  vận chuyển Cholesterol dư từ ngoại biên về gan: Cholesterol tốt Nguồn gốc:

 Nội sinh: tự tổng hợp từ nhiều cơ quan như mô mỡ, tuyến thượng thận và chủ yếu ở gan Một phần vận chuyển tới tế bào ngoại biên nhờ lipoprotein như VDLD, IDL, LDL Một phần vận chuyển tới mật xuống ruột

 Gan là cơ quan duy nhất ester hoá cholesterol Phân bố:

 Tự do: 25 – 40%

 Este hố: 60 – 75%

Trị số bình thường < 200 mg/dl và ở VN là 185 ± 23 mg/dl

 Ước tính nguy cơ mắc bệnh tim mạch

1. Nguyên tắc:

 Phương pháp enzyme so màu

Các loại enzyme chính Cholesterol oxidase, Cholesterol esterase, Peroxidase

Dung dịch màu cuối cùng: 4-(p-Benzoquinone-monoimino)-phenazone có màu đỏ Các phương trình cụ thể:

Cholesterolesters + H2O Cholesterol esterase→ Cholesterol + Axit béo

 Tách Cholesterol ra khỏi Cholesterolesters

2 H2O2 + 4-aminoantipirine + Phenol Peroxidase→ 4-(p-Benzoquinone-monoimino)-phenazone + 4 H2O 2. Thuốc thử:

1 Dung dịch đệm phosphate (pH=6.5) 30 mmol/l

2 4-aminoantipyrine 0.25 mmol/l

3 Phenol 25 mmol/l

4 Peroxidase >5 KU/l

5 Cholesterolesterase > 150 U/l

6 Cholesteroloxydase > 100 U/l

7 Sodium azide (NaN3) < 0.01%

8 Dung dịch Cholesterol chuẩn 200mg/dl hoặc 5.17 mmol/l

3. Tiến hành:

Kỹ thuật Ống trắng Ống đo Ống chuẩn

Thuốc thử R 1000μl 1000μl 1000μl

Huyết thanh (EDTA/Heparin) 10μl

Dung dịch chuẩn 10μl

Các yếu tố khác:

 Bước sóng: 500nm, 546nm

 Nhiệt đợ: 25°C hoặc 37°C

 Phép đo: so với ống trắng thuốc thử (RBL).

Yêu cầu 1 ống trắng thuốc thử cho mỗi thử nghiệm. Khi mở thuốc thử ra, tránh để bị nhiễm bẩn.

 Trộn và ủ trong 10 phút ở 25oC hoặc 5 phút ở 37oC. o độ hấp thụ của ống đo (Ađo) và ống chuẩn (Achuẩn) so với ống trắng (ARBL)

ở bước sóng 500nm trong vịng 5 đến 60 phút 4. Khoảng tuyến tính:

Tuyến tính khi nồng đợ Cholesterol đạt từ 4 – 750 mg/dl

 Các mẫu có nồng đợ cao hơn phải được pha loãng 1/2 với nước muối sinh lý (0,9%), đo lại, nhân kết quả với 3

5. Tính tốn:

Mg/dl  mmol/l. Hệ số 0.026 Mmol/l  mg/dl. Hệ số: 38.66 Với: δA(S) = A(mẫu đo) – A(thuốc thử R) δA(chuẩn) = A(dd cholesterol) – A(thuốc thử R)

Theo hệ số c(mg/dl)

546 nm 840 x δA(S) 500nm 553 x δA(S) Theo ống chuẩn:

6. Gía trị tham khảo:Bình thường: < 220 mg/dl Bình thường: < 220 mg/dl

Nguy cơ vừa: > 220 mg/dl hay 5,7 mmol/l Nguy cơ cao: > 260 mg/dl hay 6,7 mmol/l 7. Biện luận:

 Đánh giá nguy cơ bệnh tim mạch

 < 200 mg/dl (<5,17 mmol/l)  Ở người bình thường khơng có nguy cơ xơ vữa đợng mạch

 Từ 200-240 mg/dl (5,17 -6,2 mmol/l)  Đây là giới hạn cao (nguy cơ vừa) cần chú ý đối với bệnh mạch vành

 240 mg/dl (>6,2 mmol/l)  Nguy cơ cao bị bệnh động mạch vành.

 Cholesterol máu giảm hiếm gặp, trong trường hợp cholesterol toàn phần thấp < 2,0 mmol/l là dấu hiệu của suy giảm chuyển hoá tế bào gan.

Yếu tố tăng giảm Cholesterol:

 Tăng nguyên phát: tăng cholesterol huyết gia đình

Khi nồng đợ cao q 250 mg/dl thì có nguy cơ mắc bệnh mạch vành. (Khi tỉ số Cholesterol tồn phần so với HDL dưới 4 thì ít nguy cơ mắc bệnh mạch vành)

 Chế độ ăn: dùng nhiều chất béo no như thịt đỏ, ác loại sữa, kem, bơ, phomai, bánh ngọt, gan và các loại nợi tạng đợng vật, các món chiên rán như khoai tây chiên, gà rán hoặc các loại thực phẩm chế biến từ bơ ca cao,chocolate...

 Thói quen hút thuốc, lười vận đợng

 Ảnh hưởng của thuốc

 Do tuổi tác: phụ nữ sau tuổi mãn kinh sẽ tăng cao nồng đợ Cholesterol III. Định lượng LDL-C: Tổng qt Trị số bình thường:  LDL-C: < 130mg/dl  HDL-C: < 40mg/dl  Có nồng đợ các thành phần khác nhau

 LDL tỉ lệ thuận với nguy cơ mắc bệnh mạch vành và HDL tỉ lệ nghịch với nguy cơ bệnh

 Chẩn đoán nguy cơ mắc bệnh tim mạch

 Phương pháp enzyme so màu qua ly tâm

Dung dịch gây kết tủa LDL-C: Natri citrate Phần nổi bao gồm: HDL, Chylomicron và VLDL 2. Thuốc thử:

Dung dịch đệm đơn:

Haparin 0.68 g/l tương ứng với 100IU/l

Natri Citrate 0.064 mol/l

Chất ổn định 3. Tiến hành:

Dung dịch chuẩn lần này vẫn là Cholesterol 200mg/dl Các yếu tố khác:

 Bước sóng: 500 nm, 546 nm

 Nhiệt độ giữ phần kết tủa ở 20 đến 25 đợ C Có 2 bước:

o Thuốc thử kết tủa LDL: 1000 𝜇𝑙

o Huyết thanh: 100 𝜇𝑙

 Trộn đều và ủ trong 10 phút ở 18 độ C đến 22 độ C. Đem ly tâm trong 15 phút với tốc đợ 4000 vịng trên phút. Xác định nồng

đợ C của supernatant (phần nổi lên sau ly tâm) trong 1 giờ kể từ sau ly tâm

 Bước 2: Định lượng LDL-C:

o Thuốc thử C: 1000 μl

o Supernatant: 100 μl

 Trộn đều và ủ trong 10 phút ở 25 độ C hoặc 5 phút ở 37 độ C. Đo sự hấp thụ ánh sáng của ống đo A(sample) so với ống trắng

A(RBL) 4. Tính tốn: Với hệ số Factor:

Đợ dài bước sóng c (mg/dl) c (mmol/l)

546 nm 840 x δA(S) 25.9 x δA(S)

500nm 553 x δA(S) 17.1 x δA(S)

Nồng độ LDL-C = 200 x δA củamẫu đoδA mẫu chuẩn (mg/dl)

 Để tính HDL-C sau khi tìm được nồng đợ LDL-C ta dùng công thức Friedewald:

LDL-C = Tổng lượng Cholesterol – (HDL-C - TG5 ¿ (mg/dl)

LDL-C = Tổng lượng Cholesterol – (HDL-C - TG2.2¿ (mmol/l)

 Không áp dụng công thức khi TG > 4.5 mmol/l (> 400 mg/dl)

5. Gía trị tham khảo:

Bình thường: thấp hơn 150 mg/dl

Nguy cơ vừa: hơn 150 mg/dl hoặc 3.9 mmol/l Nguy cơ cao: hơn 190 mg/dl hoặc 4.9 mmol/l 6. Biện luận:

LDL-C tỉ lệ thuận với tần số chết do bệnh mạch vành và nếu có các yếu tố nguy cơ thì LDL-C cần giảm xuống dưới 130 mg/dL Đối với HDL-C thì giá trị bình thường là trên 35 mg/dL và HDL tỉ lệ nghịch với nguy cơ bệnh mạch vành

V. Định lượng HDL-C:1. Nguyên tắc: 1. Nguyên tắc:

 Phương pháp enzyme so màu qua ly tâm

Dung dịch gây kết tủa HDL-C: MgCl2 2. Thuốc thử:

Dung dịch đệm đơn:

Phosphotungstic Acid 0.55 mmol/l

MgCl2 25 mmol/l

Các yếu tố khác:

 Bước sóng: 546 nm

 Nhiệt độ giữ phần kết tủa ở 25 đến 37 đợ C Có 2 bước:

Bước 1: Kết tủa:

 Thuốc thử kết tủa HDL: 1000 μl (macro), 200 μl (semi micro)

 Trộn đều, ủ trong 10 phút ở nhiệt đợ phịng, trọn lại và đem ly tâm trong 5 phút ở 10000g (10 phút ở 4000 g). Sau khi ly tâm

tách phần nổi lên từ phần kết tủa trong 1 giờ và xác định nồng độ Cholesterol.Bước 2: Định lượng LDL-C: Bước 2: Xác định nồng độ:

Đo đối chiếu với ống trắng. Yêu cầu một ống trắng cho mỗi thử nghiệm

 Cholesterol: 1000 μl (Macro) và 500 μl (semi micro)

 Supernatant: 100 μl (macro) và 50 μl (semi micro)

 Trộn đều và ủ trong 10 phút ở 25 độ C hoặc 5 phút ở 37 độ C. Đo sự hấp thụ ánh sáng của ống đo A(sample) so với ống trắng

A(RBL)

δA(S) = A(sample) – A(RBL) 3. Tính tốn:

Với factor:

Đợ dài bước sóng c (mg/dl) c (mmol/l)

546 nm (Macro) 279 x δA(S) 7.21 x δA(S)

546 nm (Semi Micro) 325,1 x δA(S) 8.41 x δA(S)

Sau khi có được kết quả của nồng đợ LDL-C sử dụng cơng thức Friedewald để tìm nồng độ của HDL-C:

 Không áp dụng công thức khi TG > 4.5 mmol/l (> 400 mg/dl)

4. Gía trị tham khảo:

Tiên lượng thuận lợi Mức nguy cơ Nguy cơ cao

Nữ > 65 mg/dl 45-65 mg/dl < 45 mg/dl

Nam > 55 mg/dl 35-55 mg/dl < 55 mg/dl

5. Biện luận:

Đối với HDL-C thì giá trị bình thường là trên 35 mg/dL và HDL tỉ lệ nghịch với nguy cơ bệnh mạch vành Bởi vì HDL-C là loại protein tốt giúp chở cholesterol từ ngoại vi về trung tâm

Ví dụ: Bệnh nhân có:  Cholesterol 200mg/dl  TG 150mg/dl  LDL-C 180 mg/dl  HDL-C 30 mg/dl

Dù cho nồng đợ Cholesterol và TG là bình thường Nhưng LDL-C > 100mg/dl

Chương III: Định lượng protid

I. Định lượng ure:Tổng quát: Tổng quát:

 Sản phẩm thoái hoá chủ yếu của protein và acid amin

 Tạo thành ở gan

 Định lượng nhằm chẩn đoán chức năng thận nhưng khơng đặc hiệu do cịn bị ảnh hưởng bởi các yếu tố ngoài thận  thường chỉ

định kèm với định lượng creatinin

 Trị số bình thường là 0.2 - 0.5 g/l trong huyết thanh và BUN = 0.09 – 0.23 g/l 1. Nguyên tắc:

Ure + 2H2O Urease→ 2NH3 + CO2

α-Ketoglutarate + NH3 + NADH2 GLDH→ L-Glutamate + NAD+ + H2O GLDH: Glutamate dehydrogenase

2. Thuốc thử: Dung dịch đệm:

α-Ketoglutarate 15 mmol/l

Urease ≥ 1000 U/l

GLDH ≥ 5.4 kU/l

Khởi động:

NADH 0.18 mmol/l

Dung dịch chuẩn: 50mg/dL (8.35 mmol/l)

3. Chuẩn bị:

Chất nền bắt đầu: Mẫu thử và thuốc thử Mẫu đo bắt đầu:

- Trợn 4 lần thể tích R1 và 1 lần thể tích R2

- Để yên thuốc thử trong ít nhất 30 phút ở 15 đến 25 độ C trước khi dùng - Bảo quản 4 tuần ở 2 đến 8 độ C, 5 ngày ở 15 đến 25 độ C

- Không tiếp xúc với ánh sáng

Bảo quản:

 Huyết tương, huyết thanh:

- 7 ngày ở 20 đến 25 độ C hoặc 4 đến 8 độ C - 1 năm ở âm 20 độ C

 Nước tiểu:

- 2 ngày ở 20 đến 25 độ C - 7 ngày ở 4 đến 8 độ C - 1 tháng ở -20 đợ C

4. Gía trị tham khảo và khoảng tuyến tính:

Với huyết thanh Urea-N

Tuổi Mg/dl Mmol/l Mg/dl Mmol/l

Trẻ em 1-3 11-36 1.8–6.0 5.14–16.8 1.8-6

4-13 15-36 2.5-6 7-16.8 2.5-6

14-19 18-45 2.9-7.5 8.4-21 2.9-7.5

Người lớn Dưới 50 15-44 2.6-7.3 7-20.5 2.6-7.3

Ure niệu

g/24h Mmol/dL

10-35 170-580

Đối với khoảng tuyến tính thì nồng đợ đo được cao nhất là 400mg/dl (66.7 mmol/l) ở nồng đợ cao hơn cần pha lỗng với nước muối sinh lý (0.9%) với tỉ lệ ½ và nhân kết quả với 3

5. Qúa trình thực hiện:- Bước sóng: 340 nm - Bước sóng: 340 nm - Nhiệt đợ: 37 đợ C

 Trợn R1 (5 lần thể tích) với R2 (1 lần thể tích)

Bảo quản ổn định ở nhiệt đợ từ 2 đến 8 độ C trong 20 ngày và từ 18 đến 22 độ C trong 8 ngày

Ống đo Ống chuẩn

Thuốc thử 1000 μl 1000 μl

Mẫu chuẩn 10 μl

 Trộn và ủ 60 giây ở 25 độ C hoặc 30 độ C hoặc 20 đến 40 giây ở 37 độ C sau đó đọc đợ hấp thu ánh sáng A1. Đọc lần nữa sau 60 giây ∆A = A1-A2 6. Tính tốn: Hệ số chuyển đổi:  Mg/dl  mmol/l Hệ số: 0.167  Mmol/l  mg/dl Hệ số: 6.006

 Urea  Urea-N (BUN) Hệ số: 0.467

 Mg/dl BUN  mmol/l Hệ số: 0.357 Tính tốn:

Nồng độ ure = (∆Ađo/∆Achuẩn) x 50 (mg/dl)

Nồng độ BUN = 0.466 x nồng độ ure (Blood urea nitrogen)

7. Biện luận:

Trường hợp không can thiệp:

 Hb ≤ 800mg/dl

 Triglyceride ≤ 1750 mg/dl Các trường hợp thay đổi:

 Sinh lý:

o Thay đổi theo tuổi:

Urê huyết bình thường thường gặp ở người lớn là 0,2 - 0,3 g/1 (3,3 - 5 mmol/l) Ở người trên 50 tuổi là 0,4 - 0,5 g/1 (6,7 - 8,3 mmol/l)

Ở trẻ em là 0,1 - 0,25 g/1 (1,67 - 4,2 mmol/l)

o Tăng: người có chế đợ ăn giàu protid, người dùng thuốc corticosteroid, tetracycline

o Giảm khi có thai, khi dùng thuốc chống đợng kinh, uống rượu, hút thuốc lá

 Bệnh lý: Tăng ure huyết Nguồn gốc Bệnh lý Vấn đề Nguyên nhân tại thận Viêm thận cấp

0,5 - 1 g/l (8,33 - 16,67 mmol/l), nhưng có khi tới 1 - 2 g/l (16,67 - 33,34 mmol/l) hoặc hơn

mmol/l)

Urê niệu giảm, có khi cịn 1-5 g/l (16,67 - 83,35 mmol/l) Hội chứng ure huyết urê huyết tăng cao kèm urê niệu giảm, là hội chứng gặp

trong suy thận cấp và mạn

Viêm ống thận cấp

vô niệu

tăng ure huyết tới tới 2 - 5 g/l (33,34 - 83,55mmol/l) hoặc hơn nữa do ngộ độc Hg, P, As, Br, mật cá trắm,…  sau bốn ngày nếu ure huyết là 2.5 g/l  sau bốn ngày ngộ độc,

nếu urê huyết - 2,5g/l (41,68mmol/l) là tiên lượng tốt, nếu urê huyết 24 g1 (> 66,68 mmol/l) là tiên lượng rất xấu

Nguyên nhân ngoài thận

Trước thận

Suy tim ứ huyết lưu lượng máu đến thận giảm. Bệnh nhân tiểu ít, urê huyết tăng ít

Xuất huyết tiêu hoá

chấn thương chảy máu, làm giảm áp suất máu và hoặc giảm thể tích huyết tương. Lưu lượng máu đến thận giảm, do đó,

urê huyết tăng Mất muối nước

Choáng Sau

thận

Dị tật bẩm sinh đường niệu, thận; thận đa nang Sạn thận, niệu quản; lao thận, lao niệu quản, lao bàng quang

Giảm ure huyết

Gan bị tổn thương nặng (suy gan)

Giảm urê huyết < 2 mmol/l (0,12 g/l) ở người lớn và giảm urê niệu gặp ở giai đoạn cuối của suy gan, chứng tỏ chức năng tạo urê giảm và

không hồi phục được Chế đợ ăn nghèo protid

Truyền nước nhiều q (làm lỗng máu)

Ure niệu

Trị số bình thường là 200 - 500 mmol, tương đương 12 - 30 g/sau 4 giờ

Thuốc lợi niệu có tác dụng tăng tiểu và tăng urê thải, nồng độ urê là 50 g/l (866 mmol)

II. Định lượng Creatinin:Tống quát: Tống quát:

 Trị số bình thường: 0.6-1.5 mg/dl

 Là sản phẩm thối hố của creatin cơ

 Có 2 nguồn gốc:

 Tạo thành qua các bước:

o Tại thận: arginin tác dụng với glycin tạo guanidoacetat và ornithin

o Tại gan: Guanidoacetat tác dụng với methionin ở dạng hoạt hóa S-adenosyl methionin (SAM) tạo nên creatin

o Creatin được chuyển qua máu tới cơ, tác dụng với ATP  Creatin-P: dự trữ năng lượng

o Creatin-P được khử H2O và giải phóng Phosphate tạo thành creatinin  đào thải qua thận và ra nước tiểu

Định lượng billirubin toàn phần:

Phân tích nước tiểu 10 thơng số