2.3.4.1. Các thuốc được sử dụng trong nghiên cứu
• GnRH agonist:
GnRH agonist được sử dụng trong nghiên cứu này là triptorelin. Biệt dược của triptorelin là Diphereline® do công ty Beaufour Ipsen của Pháp sản xuất và phân phối. Thuốc được tiêm dưới da với liều 0,1 mg vào ngày 2 của vòng kinh, 0,5mg/ngày từ ngày 3 của vòng kinh. Thời gian tối đa để đạt hàm lượng đỉnh trong huyết thanh là 0,63 ± 0,26 giờ. Thời gian bán huỷ là 7,6 ± 1,6 giờ [39].
•FSH tái tổ hợp (rFSH):
rFSH được sử dụng là Gonal- F® (sản xuất bởi Laboratoires Serono S.A., Thụy Sĩ, phân phối tại Việt Nam bởi Merk-Serono) hàm lượng 75IU, 300IU, 450IU hoặc Puregon® (sản xuất bởi Organon, Hà Lan, phân phối tại Việt Nam bởi MSD) hàm lượng 50IU, 100IU, 300IU, 600IU [45].
Sử dụng rFSH bằng đường tiêm dưới da. Hàm lượng đỉnh đạt được khoảng 12 giờ sau khi tiêm. rFSH đào thải chậm ra ngoài cơ thể 12- 70 giờ. Khoảng 1/8 liều follitropin đào thải vào nước tiểu [45].
● FSH có nguồn gốc từ nước tiểu (Human Menopausal Gonadotropins -hMG)
hMG bao gồm 75 IU FSH và 75 IU LH với tỷ lệ 1:1 đã được sử dụng rộng rãi trong vài thập kỷ qua trong kích thích buồng trứng. Tuy nhiên chế phẩm này có bất lợi là chứa LH có thể gây hoàng thể hoá sớm, thành phần và hoạt tính sinh học giữa các lô thuốc không ổn định và chứa các loại protein không cần thiết [47].
Cơ chế tác dụng của thuốc là cung cấp một lượng Gonadotropins ngoại sinh gồm FSH và LH để làm tăng sự phát triển của các nang noãn ở buồng trứng [46]. Gonadotropins có nguồn gốc từ nước tiểu có chứa protein nên phải dùng theo đường tiêm bắp. hMG được sử dụng trong nghiên cứu là Menogon (Hãng sản xuất và phân phối - Ferring), hàm lượng 75 IU (FSH:LH = 1:1) [47].
• hCG
hCG có biệt dược là Pregnyl® hàm lượng 5000 IU (sản xuất bởi công ty Organon, Hà Lan, phân phối tại Việt Nam bởi công ty MSD). Liều dùng 5000 IU-10000 IU.
Sử dụng hCG bằng đường tiêm bắp. Hàm lượng đỉnh đạt được trong vòng 6 giờ và kéo dài khoảng 36 giờ. Hàm lượng hCG giảm lúc 48 giờ và tiếp cận mức cơ sở sau khoảng 72 giờ. Sau khi tiêm bắp hCG, khoảng 10-12% liều bài tiết vào nước tiểu trong 24 giờ.
• Progesterone
Progesterone (P4) được sử dụng để hỗ trợ pha hoàng thể là Utrogestan® do công ty Tedis của Pháp sản xuất có hàm lượng là 100mg, 200 mg. Sử dụng Utrogestan bằng đường đặt trong âm đạo với liều dùng là 600 mg mỗi ngày.
2.3.4.2. Các phương tiện nghiên cứu
•Máy siêu âm đầu dò âm đạo tần số 7,5 MHz. Hãng ALOKA SSD 1400 (Nhật Bản).
•Máy AXSIM ABBOTT (Mỹ) định lượng các hormon nội tiết bằng kỹ thuật E.I.A (Enzym Immuno Assay): FSH (IU/l), LH (IU/l), Estradiol (pg/ml), P4 (nmol/l), định lượng βhCG (IU/l).
•Tủ nuôi cấy phôi ở nhiệt độ 370C và 5% CO2 : Themoforma (Mỹ).
•Kính hiển vi soi nổi Olympus (Nhật): quan sát và nhặt noãn, đánh giá tinh dịch đồ.
•Kính hiển vi đảo ngược và bộ vi thao tác của hãng Olympus (Nhật): thực hiện ICSI, quan sát noãn thụ tinh, đánh giá chất lượng phôi. (Phụ lục 10: Hình ảnh kính hiển vi đảo ngược).
•Môi trường sử dụng để thao tác với noãn: ASPTM của hãng Vitrolife (Thụy Điển).
•Môi trường để lọc rửa tinh trùng: SpermgradTM, SpermrinseTM của hãng Vitrolife (Thụy Điển).
•Môi trường để thực hiện ICSI: HyaseTM-10X, GameteTM của hãng Vitrolife (Thụy Điển).
•Môi trường để nuôi cấy phôi và chuyển phôi: IVFTM hãng Vitrolife (Thụy Điển).
•Môi trường để đông lạnh phôi: FreezeKit 1 hãng Vitrolife (Thụy Điển). •Kim hút noãn dài 30 cm số 17 của hãng Laboratoire C.C.D (Pháp). •Catheter long Frydman set để chuyển phôi của hãng Laboratoire C.C.D