Hultin 2002). [16]
Xác định số mg hydroperoxide trên một gam mẫu bằng phương pháp so màu UV-VIS.
+ Nguyên lý: Dùng dung dịch Fe(ᴨ) chloride để bắt màu cho mẫu bị oxy hóa
như mẫu để đem bắt màu nhưng thay thế dung dịch Fe(ᴨ) chloride bằng nước cất.) sau đó dựa một phương trình đường chuẩn được xây dựng để xác định số mg hydroperoxide/ gam mẫu.
+ Tiến hành: Cân chính xác 1(g) mẫu sau khi đã được xay nhỏ bằng một
máy xay sinh tố.Sau đó đem mẫu đi đồng nhất bằng một máy đồng hóa tốc độ cao trong vòng 2 phút trong 11ml hỗn hợp chloroform/ methanol (tỷ lệ 2:1 ; v/v). Hỗn hợp sau đó được lọc qua một tờ giấy lọc whatman.Hút chính xác 7ml hỗn hợp sau khi lọc cho vào một ống nghiệm sạch,cho vào tiếp thêm 2ml dung dịch Nacl 0.5%, sau đó vortexed với tốc độ vừa phải trong vòng 30 giây.Hỗn hợp sau đó đem đi tiến hành ly tâm lạnh ở nhiệt độ 4oC,ly tâm 8000 vòng trong vòng 10 phút bằng một máy ly tâm lạnh. Hỗn hợp sau ly tâm phân thành 2 lớp,Ta chuẩn bị 5 mẫu tương tự nhau như vậy.tại đây mẫu sẽ được chia thành 2 loại:
Mẫu đo màu: Ta dùng Micropipet hút chính xác 4ml dung dịch ở phía dưới ông ly tâm cho vào một ống nghiệm sạch. Sau đó cho thêm vào ống nghiệm 25 micromililite Fe(Cl)2 (20 mM) + 25 micromililite Amonium thiacinate 30%.
Mẫu zero : Ta dùng Micropipet hút chính xác 4ml dung dịch ở phía dưới ông ly tâm cho vào một ống nghiệm sạch. Sau đó cho 25 micromililite nước cất + 25 micromililite Amonium thiacinate 30%.
Cả 2 mẫu được đẻ yên trong vòng 20 phút ở nhiệt độ phòng. Sau đó mẫu sẽ được đem đi đo đọ hấp thụ màu bằng máy đo màu ở bước sóng 500 nm.