trưởng và sinh tổng hợp enzyme protease của chủng vi khuẩn KTC1.
Nhằm xác định thời gian thích hợp dùng để nuôi cấy thu sinh lượng enzyme tối đa, chúng tôi tiến hành nuôi vi khuẩn trong môi trường cảm ứng sinh enzyme có cơ chất đậu nành 4%, bổ sung CaCO3 với nồng độ 0.5 %. Nuôi các bình này trong máy lắc với tốc độ 200 vòng/ phút. Sau từng khoảng thời gian xác định 20h, 30h, 36h, 40h, 44h, 48h, 52h... Xác định hoạt tính của protease của môi trường bằng phương pháp Anson [12] và đo OD sinh trưởng ở bước sóng 620nm. Kết quả thu được thể hiện ở bảng sau:
Bảng 4.5: Kết quả thí nghiệm ảnh hưởng của thời gian nuôi cấy lên sinh trưởng và sinh tổng hợp enzyme protease của vi khuẩn KTC1
Thời gian nuôi cấy OD sinh trưởng HĐP
(UI/ml) 20h 0,584 ± 0,001 0,836 ± 0,007 30h 1,367 ± 0,002 1,774 ± 0,008 36h 1,988 ± 0,003 2,026 ± 0,007 40h 1,968 ± 0,002 2,126 ± 0,016 44h 1,955 ± 0,003 1,893 ± 0,012 48h 1,505 ± 0,002 1,712 ± 0,006 52h 1,241 ± 0,002 1,369 ± 0,005
Hình 4.4 : Đồ thị biểu hiện sự ảnh hưởng của thời gian nuôi cấy lên sinh trưởng và sinh tổng hợp enzyme protease của vi khuẩn KTC1
Sau khi tiến hành ly tâm thu dịch enzyme thô và tiến hành khảo sát theo phương pháp Anson thu được kết quả ở bảng 4.5 và hình 4.4 ta thấy sự sinh trưởng và hoạt độ enzyme sinh ra của vi khuẩn KTC1 tăng dần từ 20h – 40h sau đó giảm dần. Hoạt độ enzyme đạt cao nhất ở khoảng thời gian 40h (2,126UI/ml). Vì vậy, trong các thí nghiệm sau ta chọn thời gian thích hợp để thu enzyme là 40h.
Kết quả này hoàn toàn phù hợp với nghiên cứu trước đây của Nguyễn Thị Trần Thụy (2009) khi nghiên cứu sự ảnh hưởng của thời gian nuôi cấy lên sinh trưởng và sinh tổng hợp enzyme protease của vi khuẩn Bacillus subtilis. Hoạt độ enzyme protease thu được cao nhất cũng ở khoảng thời gian là 40h.