Dựa vào khả năng sản sinh 4 loại độc tố chính (alpha, beta, epsilon, iota) người ta chia vi khuẩn C.perfringens thành 5 type độc tố khác nhau là A, B, C, D và E. Các type độc tố khác nhau thường gây bệnh ở các đối tượng khác nhau. Trên cơ sở đó chúng tôi tiến hành xác định type độc tố của các chủng vi khuẩn phân lập được. Để xác định các type độc tố của vi khuẩn C.perfringens, chúng tôi sử dụng
phản ứng Multiplex PCR theo Songer và cộng sự (1999) [40]. Kết quả xác định type độc tố của 12 chủng C. perfringens được thể hiện ở bảng 3.2.
Bảng 3.2. Kết quả xác định type loại độc tố của vi khuẩn C.perfringens
Gen mã hóa các loại độc tố
TT Chủng VK cpa cpb etx iA Type độc tố 1 28 + - - - A 2 53 + - - - A 3 58 + - - - A 4 97 + - - - A 5 125 + - - - A 6 9 + - + - D 7 29 + - + - D 8 141 + - + - D 9 143 + - + - D 10 149 + - + - D 11 CNT + - + - D 12 DKH + - + - D Nhận xét
Từ kết quả phân tích ở trên cho thấy:
- Trong 12 chủng kiểm tra có 5 chủng chỉ mang gen cpa mã hóa độc tố Alpha (41,67%), 7 chủng mang đồng thời 2 gen cpa mã hóa độc tố Alpha và etx mã hóa
gen Epsilon (58,33%). Không có chủng nào mang gen cpb và iA. Như vậy, trong 12 chủng kiểm tra có 5 chủng type A (chỉ mang gen cpa) chiếm tỷ lệ 41,67% và 7 chủng type D (mang đồng thời 2 gen cpa và etx) chiếm tỷ lệ 58,33%.
- Kết quả của chúng tôi tương đương với kết quả của một số tác giả khác như kết quả của Lê Lập và cộng sự (2007) [3], các chủng vi khuẩn C.perfringens phân
lập từ dê, cừu đều thuộc type A và D; của Huỳnh Thị Mỹ Lệ và cộng sự (2009) [2], các chủng vi khuẩn C.perfringens phân lập từ mẫu phân bò tiêu chảy thuộc type A chiếm tỷ lệ 48,1% và type D chiếm 51.9%; của Bueschel và cộng sự (2003) [19], 92,4% các chủng vi khuẩn phân lập từ động vật mắc bệnh viêm ruột thuộc type A;
của Sipos và cộng sự (2003) [38], ở cừu: 8/10 chủng thuộc type A và 2/10 chủng thuộc type D, ở lợn: 47/52 chủng thuộc type A, ở dê: 18/26 mẫu thuộc type D, 6/26 mẫu thuộc type A; của Kalender và cộng sự (2005) [30], 64 % chủng vi khuẩn C. perfringens phân lập từ dê, cừu bị bệnh viêm ruột hoại tử thuộc vào type A, 21% chủng thuộc vào type D.