Để phù hợp với việc chế tạo kit thử và điều kiện, chúng tôi lựa chọn chất độn là (NH4)2SO4 hoặc Na2SO4 để chế tạo kit thử metanol trong rƣợu.
3.2.3.2. Thành phần thuốc thử trong kit thử methanol trong rượu
Trên cơ sở khảo sát hàm lƣợng thuốc thử tối ƣu khi phân tích metanol trong phịng thí nghiệm chúng tơi xây dựng thành phần kit thử gồm 2 thành phần nhƣ sau: Thành phần 1 (dung dịch A) gồm: 10 ml nƣớc và 90 ml H2SO4 đặc đƣợc cho vào cốc chịu nhiệt, khuấy đều. Ta đƣợc 20 kit metanol, với thể tích mỗi kit là 5 ml dung dịch A dùng cho phân tích 1 mẫu.
Thành phần 2 (hỗn hợp rắn B): Cân 0,5 g axit chromotropic, 19,5 g (NH4)2SO4. Tiến hành nghiền nhỏ, trộn đều hỗn hợp trên và bảo quản trong lọ kín 100 gói kit metanol, với lƣợng cân mỗi gói là 0,2g rắn B dùng cho phân tích 1 mẫu.
3.2.4. Ảnh hưởng của thứ tự thêm thuốc thử đến độ hấp thụ quang cuả kít thử metanol trong rượu
Lấy vào các ống nghiệm 0,2 ml mẫu etanol 20% đã đƣợc thêm chuẩn metanol với nồng độ trong khoảng 79 mg/l - 400 mg/l, thêm 1ml KMnO4 30g/l, sau 10 phút thêm Na2S2O5 từ từ tới khi dung dịch trong suốt. thay đổi thứ tự thêm thuốc thử. Lắc đều và định mức tới vạch bằng nƣớc cất trong bình định mức 10ml. Sau 20 phút đem đo độ hấp thụ quang tại bƣớc sóng 570 nm, với mẫu trắng làm dung dịch so sánh.
Trong thí nghiệm sử dụng H2SO4 80% làm dung dịch A, do vậy để đảm bảo an tồn, chúng tơi tiến hành nghiên cứu ảnh hƣởng của thứ tự thêm thuốc thử bằng cách, cho lần lƣợt các chất vào dung dịch A. Các thí nghiệm đƣợc tiến hành bằng cách thêm B vào dung dịch A trƣớc, cho mẫu vào dung dịch A trƣớc, trộn B với mẫu trƣợc. Kết quả đƣợc cho trong bẳng 3.4.
Bảng 3. 5: Ảnh hưởng của thứ tự thêm thuốc thử đến độ hấp thụ quang xác định
C metanol(mg/l) B trƣớc Mẫu trƣớc Trộn trƣớc B với mẫu
79 0,093 0,153 0,235
158 0,188 0,237 0,362
395 0,471 0,538 0,587
790 0,531 0,583 0,741
Ở tất cả các mức nồng độ khi thêm hỗn hợp dung dịch B trộn với mẫu , độ hấp thụ quang đều cao hơn so với khi thêm dung dịch A trƣớc hay thêm B trƣớc vì theo cơ chế phản ứng thì fomandehit tạo phức với axit chromotropic trƣớc sau đó mới phản ứng với H2SO4. Do vậy, trong qui trình xây dựng kit thử ta có thể trộn B với mẫu trƣớc khi thêm vào dung dịch A.
3.2.5. Khảo sát thời gian ổn định màu của phức khi sử dụng kit thử
Lấy 0,2 ml dung dịch chuẩn CH3OH 158 mg/l vào ống nghiệm thêm 1ml KMnO4 sau 10 phút thêm từ từ Na2S2O5 đến khi dung dịch khơng màu thêm kít thuốc thử vào. Định mức trong bình 10 ml bằng nƣớc cất. Lắc đều và tiến hành đo độ hấp thụ quang theo thời gian ở chế độ đo động học với bƣớc sóng 570 nm trong 30 phút, dung dịch H2SO4 đƣợc sử dụng làm dung dịch so sánh.
0.14 0.15 0.16 0.17 0.18 0.19 0.2 0.21 0 5 10 15 20 25 30 35 Ð ? h ? p t h ? q u a n g Th?i gian (phút)