* Xử lý số liệu bằng phần mềm Excell 2007 và SPSS 11.0 để lập được đường hồi quy giá trị trung vị cho từng chất AFP, hCG, uE3
Sau khi thu đƣợc kết quả đinh lƣợng AFP, hCG, uE3 trong huyết thanh của từng thai phụ ở từng độ tuổi thai, những kết quả của các thai phụ có hồ sơ khơng phù hợp đƣợc loại bỏ theo tiêu chuẩn nêu ở phần 2.1. Những số liệu này sau đó đƣợc đƣa dƣới dạng file excel. Trên file này, chúng tôi đƣa ra giá trị trung vị ở giữa các tuần thai 15 đến 19 và đƣờng hồi quy median của AFP/hCG/ uE3 theo tuổi thai dựa vào phần mềm thống kê SPSS. Để giảm bớt sự sai khác về nồng độ các chất do
đặc điểm sinh lý của mẹ, giá trị median đƣợc hiệu chỉnh theo cân nặng mẹ bằng phần mềm Prisca.
Giá trị median của các chất AFP/ hCG/ uE3 biến động theo cân nặng của thai phụ nên cần đƣợc hiệu chỉnh. Sau khi có đủ số liệu ít nhất có khoảng từ 124 – 168 thai phụ trở lên cho một tuần thai, thì dùng phần mềm mơ tả thống kê tính giá trị trung vị cho giữa tuần mỗi tuần thai và đƣa ra đƣờng cong, phƣơng trình hồi quy của nó theo tuổi thai. Các giá trị trung vị của AFP/ hCG/ uE3 đƣợc tính theo phƣơng trình hồi quy số mũ:
y = exp (a + b*x)
y: là giá trị trung vị định lƣợng của AFP/ hCG/ uE3 x: là ti thai nhi tính theo ngày.
* Cập nhập giá trị trung vị mới để xác định nguy cơ cho mỗi thai phụ tham gia sàng lọc trước sinh
Đƣờng hồi quy median mới theo tuần thai của các chất trong bộ xét nghiệm tripletest sẽ đƣợc áp dụng vào để tính nguy cơ dị tật của thai. Để tính nguy cơ dị tật của, kết quả định lƣợng hóa sinh huyết thanh của thai phụ sẽ đƣợc so sánh với giá trị trung vị của từng chất AFP/hCG/ uE3 theo tuổi thai để tìm bội số của giá trị trung vị (MoM – multiple of Median) theo công thức:
MoM
(Multiple of Median) =
Kết quả định lƣợng AFP/ HCG/ uE3 huyết thanh mẹ Median AFP/ HCG/ uE3
Để giảm bớt sự sai khác về nồng độ các chất do đặc điểm sinh lý của mẹ, giá trị median đƣợc hiệu chỉnh theo một số yếu tố của mẹ khi mang thai nhƣ chủng tộc, cân nặng, tình trạng mẹ bị đái tháo đƣờng, mẹ hút thuốc và hình thức thụ thai bằng phần mềm Prisca 5.020. Trong đó quan trọng nhất là cân nặng mẹ: phụ nữ nhẹ cân
có nồng độ các chất trong huyết thanh cao hơn rõ rệt. Giá trị median đƣợc hiệu chỉnh cân nặng của mẹ theo công thức và bảng dƣới đây.
MoMhiệu chỉnh= 1/[(a+b/kg cân nặng)] * MoM
Bảng 4: Giá trị hiệu chỉnh cân nặng a và b [45]
a b
AFP 0,28152 48,38095
HCG 0,41667 39,21723
uE3 0,73482 17,78367
Dựa trên các giá trị MoM đã đƣợc hiệu chỉnh này, phần mềm Prisca tính nguy cơ xác định tỉ lệ nguy cơ cho từng thai phụ. Trong phần mềm Prisca, giá trị MoM đƣợc hiệu chỉnh theo từng trƣờng hợp cụ thể về cân nặng của mẹ, số lƣợng thai, hình thức thụ thai, bệnh lý tiểu đƣờng của mẹ, tình trạng mẹ hút thuốc hay không. Từ giá trị MoM đã hiệu chỉnh sẽ tính nguy cơ mắc bệnh của từng thai theo tỷ lệ xác suất có thể gặp. Kết quả sàng lọc nguy cơ cao hay sàng lọc nguy cơ dƣơng tính đƣợc kết luận khi xác suất mắc bệnh của thai cao hơn ngƣỡng cut-off của từng bệnh.
Khi sử dụng phần mềm Prisca 5.020 kết hợp giữa kết quả định lƣợng AFP, hCG, uE3 huyết thanh mẹ và nguy cơ tuổi mẹ, nghiên cứu lấy ngƣỡng sàng lọc thai hội chứng Down là 1/250 và hội chứng Edward là 1/100.
Số liệu thống kê đƣợc xử lý theo phần mềm SPSS 11.0, Excell 2007.
Tính giá trị MoM và nguy cơ bất thƣờng NST của xét nghiệm sàng lọc bằng phần mềm Prisca 5.020
Bảng 5: Bảng 2 x 2 trình bày đánh giá kết quả một xét nghiệm sàng lọc
Tình trạng thực
Kết quả sàng lọc
Có bệnh Khơng bệnh
Xét nghiệm sàng lọc (+) a b
Xét nghiệm sàng lọc (-) c d
Đánh giá giá trị xét nghiệm sàng lọc thông qua các thông số sau [11, 58]. - Độ nhạy hay tỷ lệ phát hiện = a/ (a + c): là thƣơng số của số cá thể bị bệnh có xét nghiệm sàng lọc dƣơng tính với tổng số cá thể mắc bệnh.
- Độ đặc hiệu = d/ (b + d): thƣơng số của số khơng bị bệnh có xét nghiệm
sàng lọc âm tính chia cho tổng số cá thể khơng bị bệnh.
- Tỷ lệ dương tính giả (1 - độ đặc hiệu) = b/ (b + d): thƣơng số của số khơng bị
bệnh có xét nghiệm sàng lọc dƣơng tính chia cho tổng số cá thể khơng bị bệnh.
- Tỷ lệ giữa số các thể dương tính thật và số cá thể dương tính giả OAPR (Odds of being affected given a positive result) = a/b: thƣơng số của số có bệnh trên
- Giá trị tiên đốn dương tính = a/ a+b: tỷ lệ bệnh nhân kết quả sàng lọc
dƣơng tính thực sự có bệnh với tỷ lệ kết quả sàng lọc dƣơng tính.
- Giá trị tiên đốn âm tính = d/ c+d: tỷ lệ bệnh nhân có kết quả sàng lọc âm
tính thực sự khơng có bệnh trên số có kết quả âm tính. * Đánh giá giá trị việc ứng dụng giá trị trung vị mới: - Cập nhật giá trị trung vị mới cho phần mềm Prisca. - Tính lại nguy cơ bệnh cho các mẫu nghiên cứu.
- Xác định các thơng số (tỷ lệ dƣơng tính giả, tỷ lệ phát hiện, độ đặc hiệu … ) sàng của xét nghiệm sàng lọc triple test sau khi cập nhập trung vị mới.
- So sánh các thông số đánh giá xét nghiệm sàng lọc trƣớc và sau khi cập nhập trung vị
* Hạn chế sai số trong nghiên cứu: Để hạn chế sai số trong nghiên cứu, cần
thực hiện thật tốt các công việc sau:
- Thăm khám cẩn thận, làm hồ sơ chi tiết, đầy đủ, kết hợp theo dõi chặt chẽ sau sinh để phân biệt chính xác trƣờng hợp bất thƣờng và bình thƣờng.
- Khi đinh lƣợng huyết thanh mẹ:
+ Đảm bảo tách huyết thanh trong vòng 15 phút sau khi lấy máu. Huyết thanh sau tách đƣợc chạy máy ngay hoặc bảo quản trong tủ âm sâu – 300C.
+ Đảm bảo máy Immulite luôn hoạt động tốt: chạy rửa máy đầu ngày, chạy rửa chống nhiễm trong đƣờng dây hai tuần/lần.
+Sử dụng kít và hóa chất đảm bảo chất lƣợng. Chạy chuẩn máy và chạy mẫu chuẩn kiểm chứng đảm bảo máy và hóa chất đều theo đƣờng chuẩn 2 tuần/ lần và áp dụng với tất cả các lơ hóa chất mới.
- Thăm khám cẩn thận, làm hồ sơ chi tiết, đầy đủ, kết hợp theo dõi chặt chẽ sau sinh để phân biệt chính xác trƣờng hợp bất thƣờng và bình thƣờng.