CHƢƠNG 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU
1.2. MỘT SỐ PHƢƠNG PHÁP XÉT NGHIỆM SÀNG LỌC HBV, HCV, HIV
1.2.2. Xét nghiệm sinh học phân tử NAT
gen đích)
Khai thác mặt mạnh của PCR, nhiều cơng ty, đã nghiên cứu và phát triển nhiều thế hệ sinh phẩm phát hiện HIV và HBV nhƣ COBAS Ampliscreen HIV-1 Test, Roche Amplicor HIV-1 Monitor Test và COBAS Ampliscreen HBV Test v.v... Tuy nhiên, các sinh phẩm này đƣợc nghiên cứu và sản xuất để phù hợp sử dụng trong sàng lọc máu của những ngƣời cho máu. Không thể phủ nhận rằng PCR có mặt hạn chế của nó đó là phƣơng pháp có thể cho kết quả dƣơng tính giả khi một lƣợng rất nhỏ chuỗi đích đƣợc khuếch đại bị nhiễm vào mẫu phân tích hay các hóa chất dùng cho phân tích. ADN bị nhiễm này có thể sau đó lại đƣợc dùng làm khn cho phản ứng nhân bản tiếp theo và vì thế sẽ cho kết quả dƣơng tính giả. Một xu hƣớng mới đó là sử dụng các xét nghiệm đa thành phần (multiplex PCR) để phát hiện đồng thời một số tác nhân gây bnh bng
Trần Vân Chi 34 Luận vn Thc sĩ Khoa học
cách sử dụng đồng thời một số mồi đặc hiệu cho các gen đích khác nhau trong cùng một phản ứng PCR. Dạng multiplex PCR có một số ƣu điểm nhƣ giảm số lƣợng mẫu cần phải thao tác, cũng nhƣ giảm đƣợc giá thành hóa chất và tiết kiệm đƣợc thời gian, trong khi vẫn đảm bảo đƣợc mức độ an toàn gần giống với các phản ứng PCR riêng lẻ, đặc biệt là phù hợp cho xét nghiệm sàng lọc máu với số lƣợng lớn. Đối với các tác nhân vi sinh vật gây ra những triệu chứng lâm sàng giống hoặc tƣơng tự nhau hay có cách thức lây nhiễm giống nhau nhƣ HIV, HBV hoặc HCV thì NAT sẽ có những ƣu thế. Sử dụng phƣơng pháp NAT, giai đoạn cửa sổ có thể giảm xuống 26 ngày đối với HBV, chỉ 4 ngày đối với HCV và 7 ngày đối với HIV. Tính đặc hiệu của các phƣơng pháp đƣợc đảm bảo bởi sự liên kết đặc hiệu của các mồi lên các chuỗi đích và khả năng tổng hợp chuỗi polynucleotide chính xác của DNA polymerase.
Trần Vân Chi 35 Luận văn Thạc sĩ Khoa học