CHƯƠNG 2 : ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.3. Thành phần các môi trường sử dụng trong nghiên cứu
2.3.1. Mơi trường Malt-glucose 2°Bx có bổ sung chloramphenicol
Thành phần: Malt (1%), glucose (1%), agar (2%), chloramphenicol (100
ppm, pha stock 1% trong ethanol).
Chuẩn bị: Cân các thành phần với tỷ lệ như trên. Cho hỗn hợp vào bình
Schott sau đó đem khử trùng ở 121°C trong 15 phút sau đó để mơi trường nguội xuống 70-80°C, đổ ra đĩa petri trong điều kiện vô trùng. Bảo quản ở tủ mát sau khi môi trường khô.
Tác dụng: Làm môi trường phân lập 2.3.2. Môi trường PDA
Chuẩn bị: Cân các thành phần với tỷ lệ như trên. Cho hỗn hợp vào bình
Schott sau đó đem khử trùng ở 121°C trong 15 phút sau đó để môi trường nguội xuống 70-80°C, đổ ra đĩa petri trong điều kiện vô trùng. Bảo quản ở tủ mát sau khi môi trường khô. Để chuẩn bị thạch nghiêng cũng cân các thành phần như trên, quay nóng cho tan thạch bằng lị vi sóng, dùng pipet hút 4 ml vào mỗi ống nút xoáy mang hấp khử trùng ở 121°C trong 15 phút, bảo quản trong tủ mát.
Tác dụng: dùng làm môi trường nuôi cấy và giữ giống.
2.3.3. Môi trường lên men lỏng Thành phần: Thành phần:
- Môi trường (1000 ml): KH2PO4 (4 g), (NH4)2SO4 (13.6 g), CaCl2.2H2O (0.8 g), MgSO4.7H2O (0.6 g), Bacto peptone (6 g), Tween 80 1% (20 ml), cơ chất cám mì (20 g).
- Vi lượng (50 ml): FeSO4.7H2O (0.5 g), MnSO4.H2O (0.16 g), ZnSO4.7H2O (0.14 g), CoCl.6H2O (0.2 g).
Chuẩn bị: Cân các thành phần với tỷ lệ như trên. Bổ sung 1ml vi lượng vào
1000 ml môi trường lên men sau đó hấp thanh trùng 121°C trong 15 phút. Tác dụng: môi trường lên men nấm mốc thu nhận enzyme.
2.3.4. Môi trường YM
Thành phần (1000 ml): Yeast extract (3 g), malt extract (3 g), glucose (10 g), pepton (1 g), nước cất.
Chuẩn bị: Các thành phần trên được cân và hòa tan trong nước, dùng pipet
hút 3ml vào mỗi ống nút xoáy mang hấp khử trùng ở 121°C trong 15 phút. Để môi trường ở điều kiện vô trùng tới nguội rồi bảo quản trong tủ lạnh. Tác dụng: làm môi trường nuôi giống tách ADN.