meropenem, vùng vô khuẩn cắt E-test tại giá trị 0,125 nên MIC của meropenem
đối với vi khuẩn 0,125µg/ml). Nguồn: NK-BIOTEK [67]
Kỹ thuật kháng sinh đồ bằng máy VITEK2-compact
Xác định mức độ kháng kháng sinh bằng máy tự động VITEK 2 – compact dựa trên nguyên lý: hệ thống quang học sử dụng ánh sáng nhìn thấy để theo dõi trực tiếp sự phát triển của vi sinh vật thông qua việc đo cường độ ánh sáng bị chặn lại (hay sự suy giảm cường độ ánh sáng) khi ánh sáng đi qua giếng; Dùng phương pháp đo độ đục của vi khuẩn bằng việc sử dụng card kháng sinh đồ để xác định MIC - nồng độ ức chế tối thiểu, bằng máy VITEK 2 – compact.
Xác định MIC bằng phƣơng pháp pha loãng kháng sinh trong thạch
Đây là một trong những phương pháp cổ điển nhất trong xác định nồng độ ức chế tối thiểu của vi khuẩn với kháng sinh. Các kháng sinh sẽ được pha loãng ở các nồng độ pha loãng bậc hai khác nhau trong từng đĩa petri. Ưu điểm của phương pháp này là khả năng thử nghiệm đồng thời nhiều chủng với một nồng độ kháng sinh nhất định trong một lần thử nghiệm, kỹ thuật này cũng có thể áp dụng đối với các vi khuẩn khó phát triển trong mơi trường canh thang (ví dụ: Vi khuẩn kỵ khí, vi khuẩn N. gonorrhoeae). Nhược điểm của kỹ thuật này là tốn thời gian.
Kháng sinh đồ xác định MIC của bằng phương pháp pha loãng kháng sinh trong thạch được áp dụng để có thể thực hiện kháng sinh đồ hồng loạt chủng cho một hay nhiều kháng sinh. Phương pháp này hiếm khi được thực hiện để trả lời kết quả cho lâm sàng mà thường chỉ được tiến hành trong nghiên cứu phục vụ mục tiêu giám sát nhiễm khuẩn, điều tra dịch tễ hay các nghiên cứu theo dõi đề kháng và khuynh hướng đề kháng của các vi khuẩn phân lập từ lâm sàng có khuynh hướng đề kháng nổi trội.
Môi trường làm kháng sinh đồ tốt nhất là MHA (Mueller-Hinton Agar). Kháng sinh được pha theo nồng độ giảm dần trên mỗi đĩa MHA. Trên cùng một đĩa kháng sinh có thể thực hiện thử nghiệm đồng thời nhiều chủng.
Pha loãng kháng sinh trong ống nghiệm và trong giếng (broth microdilution và broth microdilution)
Đây cũng là một trong những phương pháp cổ điển nhất nhằm xác định MIC của vi khuẩn. Kỹ thuật này dựa trên nguyên lý vi khuẩn được phát triển trong môi trường canh thang với nồng độ kháng sinh giảm dần theo nồng độ pha loãng bậc hai. Hai kỹ thuật này chỉ khác nhau ở cách thức tiến hành và thể tích mơi trường ni cấy (macrodilution có thể tích mơi trường ni cấy tối thiểu 2-5ml, trong khi đó microdilution có thể tích mơi trường ni cấy tối đa là 100µl). Chi tiết về kỹ thuật sẽ được đề cập đến trong phần Phương pháp nghiên cứu.