C δC# δCa DEPT δHa (mult., J= Hz) 1 143.9 143.73 CH 7.38 (br s) 2 112.2 112.01 CH 6.31 (br s) 3 125.7 126.20 C - 4 140.2 140.06 CH 7.25 (br s) 5 26.1 25.98 CH2 2.45 (t, 7.5) 6 29.8 29.59 CH2 2.25 (q, 7.5) 7 125.4 125.21 CH 5.17 (t, 7.5) 8 136.7 136.52 C - 9 16.3 16.11 CH3 1.59 (s) 10 40.9 40.71 CH2 2.01 (m) 11 27.6 27.43 CH2 2.10 (q, 6.5) 12 125.4 125.60 CH 5.11 (t, 6.5) 13 136.0 135.81 C - 14 16.0 15.90 CH3 1.58 (s) 15 40.6 40.42 CH2 2.01 (m) 16 27.0 26.81 CH2 1.40 (m) 17 37.8 37.62 CH2 1.38 (m) 18 32.0 31.87 CH 2.77 (m) 19 21.3 21.06 CH3 1.08 (d, 7.0) 20 115.3 115.84 CH 5.30 (d, 10.0) 21 145.7 144.94 C - 22 166.8 164.52 C - 23 97.5 99.01 C - 24 174.2 173.46 C - 25 6.2 6.09 CH3 1.76 (s) a)
Tương tác HMBC từ H-14 (δH 1.58) tới C-12 (δC 125.60)/C-13 (δC 135.81)/C- 15 (δC 40.42) cho phép khẳng định vị trí của liên kết đơi tại C-12/C-13. Vị trí của liên kết đơi tại C-20/C-21 được khẳng định bởi các tương tác HMBC từ H-19 (δH 1.08) tới C-17 (δC 37.62)/C-18 (δC 31.87)/C-20 (δC 115.84) và từ H-20 (δH 5.30) tới C-21 (δC 144.94)/C-22 (δC 164.52). Tương tác HMBC giữa H-25 (δH 1.76) và C-22 (δC 164.52)/C-23 (δC 99.01)/C-24 (δC 173.46) cho phép xác định vị trí của liên kết đơi cịn lại tại C-22/C-23. Hơn nữa, khi so sánh các số liệu phổ 13C-NMR của IE1 và variabilin [4]đo trong cùng dung môi CD3OD thấy hoàn toàn phù hợp ở các vị trí tương ứng. Hợp chất IE1có một trung tâm bất đối. Vì thế cấu hình của hợp chất này có thể xác định dựa trên so sánh độ quay cực. Thực tế, độ quay cực âm của IE1([ ] =‒25.9)giống với công bố của Balansa và cộng sự (7E,12E,20Z,18S)-
variabilin([ ] =‒24.8) đã cho phép xác định chính xác cấu trúc hóa học của hợp
chất IE1 là (7E,12E,20Z,18S)-variabilin, hợp chất này đã được phân lập từ lồiI.
Hình 4.3.Phổ 13C-NMR của hợp chất IE1
4.1.2. Hợp chất IE2: (12E,20Z)-8-hydroxyvariabilin
Hình 4.7. Cấu trúc hóa họcvà các tương tác HMBC chính của hợp chất IE2
Hợp chất IE2 được phân lập dưới dạng chất dầu không màu. Phổ 1H-NMR của hợp chất IE2 cho thấy các tín hiệu: năm proton olefin tại δH 5.17 (t, J = 7.0 Hz),
5.29 (d, J = 10.0 Hz), 6.31 (br s), 7.28 (br s) và 7.39 (br s); bốn nhóm methyl tại δH 1.08 (d, J = 6.5 Hz), 1.15 (s), 1.60 (s) và 1.76 (s).
Phổ 13C-NMR và DEPT của hợp chất IE2 xuất hiện tín hiệu của 25 cacbon gồm: bảy cacbon không liên kết trực tiếp với hydro (δC 73.23, 98.50, 126.37, 135.74, 145.20, 165.00, 173.60), sáu nhóm methine (δC 31.79, 111.89, 115.61, 126.02, 140.08, 143.90), tám nhóm methylene (δC 23.51, 25.60, 26.19, 26.78, 37.62, 40.41, 42.17 và 42.62) và bốn nhóm methyl (δC 6.09, 15.81, 21.06 và 26.87). So sánh các tín hiệu trên phổ 1H và 13C-NMR của IE2 với IE1 nhận thấy: trên phổ 1H- NMR của IE2 vắng mặt một proton olefin (vùng trường thấp δH> 5.00) trong khi trên phổ 13C-NMR của IE2 vắng mặt hai tín hiệu của cacbon olefin (vùng δC>100.00) thay vào đó là sự xuất hiện thêm tín hiệu của cacbon ở δC 73.23 và một cacbon khác ở vùng δC 42.17. Trong đó tín hiệu tại δC 73.23 gợi ý cho sự có mặt thêm một nhóm hydroxyl trong cấu trúc của IE2 so với IE1.
Tiếp đó, các tương tác HMBC bao gồm: tương tác từ H-5 (δH 2.43) đến C-2 (δC 111.89)/C-3 (δC 126.37)/C-4 (δC 140.08)/C-6 (δC 25.60)/C-7 (δC 42.17) và tương tác từ H-9 (δ 1.15) đến C-7 (δ 42.17)/C-8 (δ 73.23)/C-10 (δ 42.62) cho phép
Bảng 4.2. Số liệu phổ 1H- và 13C-NMR của IE2 và hợp chất tham khảo C δC# δCb δCa δHa (mult., J = Hz)