CHƢƠNG 2 : VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.3. Phương pháp thí nghiệm
2.3.2.3. Phương pháp xác định hàm lượng nhựa dầu gừng
Nguyên tắc: Trích ly nhựa dầu gừng bằng cồn trong 24 giờ. dịch trích ly được lọc
kỹ trên giấy lọc và mang đi cô quay bằng máy cô chân không, cồn trong dung dịch bay hơi ở 50-55oC, sau khi cồn bay hơi hết ta sẽ thu được lượng nhựa dầu gừng cịn lại trong bình quay.
Hóa chất: Dung dịch cồn Tiến hành:
Bước 1: Chuẩn bị mẫu
Nguyên liệu gừng (tươi, non), cân 1kg/mẫu. Thái lát mỏng, phơi khô, sấy bằng tủ sấy đến khi miếng gừng khô (hàm lượng nước khoảng 5-7%).
Bước 2: Trích ly nguyên liệu với cồn
Gừng sau khi sấy khô được xay nhỏ bẳng máy xay đa năng, chia vào các bình tam giác thành 2 loại gừng trâu và gừng gié. Đổ cồn vào mỗi bình cho ngập gừng, sử dụng máy lắc để lắc trong khoảng 24h, với 2 lần trích ly (thay cồn mới sau khoảng 12h sao cho tổng lượng cồn sử dụng cho 1kg gừng khoảng 2l), sau đó vắt lấy dịch trích ly và lọc trên giấy lọc.
Bước 3: Lấy dịch trong thu được mang đi cô chân không tới trọng lượng không đổi. Lượng nhựa dầu gừng thu được đem đi cân và so sánh hàm lượng nhựa dầu gừng giữa gừng trâu và gừng gié.
2.3.2.4. Phương pháp xác định hàm lượng axit tổng số (theo axit lactic)
Nguyên tắc:Hàmlượng axit lacticcó trong mẫu được trung hòa bằng dung dịch
NaOH 0,1 N. Từ thể tích dung dịch NaOH 0,1N tiêu hao trong khi chuẩn độ sẽ tính được hàm lượng axit.
Hóa chất: NaOH 0,1 N
Phenolphtalein 1% Nước cất
Tiến hành: Lấy 10ml mẫu cho vào bình định mức 250ml, thêm nước cất tới vạch
bình, lắc đều, sau đó lấy 20ml dung dịch đã pha cho vào bình tam giác 100ml, cho vài giọt phenolphtalein 1%. Chuẩn độ bằng dung dịch NaOH 0,1N cho đến khi dung dịch mẫu từ khơng mà chuyển sang màu phớt hồng thì dừng lại. Ghi lại số ml NaOH đã tiêu hao.
Hàm lượng axit được tính theo cơng thức: Axit =𝑁×𝑑×0,009×1000𝑉
Trong đó:
N: Thể tích NaOH 0,1N tiêu hao d: Hệ số pha lỗng mẫu
V: Thể tích mẫu chuẩn độ
2.3.2.5. Phương pháp xác định hàm lượng đường khử
Nguyên tắc: Phương pháp này dựa trên cơ sở phản ứng tạo màu giữa đường khử với
thuốc thử axit 3,5-Dinitrosalicylic (DNS). Cường độ màu của hỗn hợp phản ứng tỉ lệ thuận với nồng độ đường khử trong một phạm vi nhất định. Đo màu trên máy phổ quang học ở bước sóng 570nm. Dựa theo đồ thị đường chuẩn của glucose tinh khiết với thuốc thử DNS sẽ tính được hàm lượng đường khử.
Hóa chất:
Dung dịch glucose chuẩn nồng độ 10g/l (cân 0,2g glucose của hãng Merck đã sấy bằng cân hàm ẩm hòa tan bằng nước cất và định mức tới 20ml) → Pha loãng bằng nước cất thành các dung dịch có dải nồng độ từ 0- 1,2 g/l.
Dung dịch DNS: Hòa tan (0,1g 3,5 axit Dinitrosacylic (DNS) + 30g Natri Kali tartrate) trong 20ml NaOH 2M → định mức tới 100ml.
Tiến hành:
Bước 1: Dựng dải nồng độ glucose chuẩn
Bảng 2.2.Dựng đƣờng chuẩn glucose
Nồng độ glucose chuẩn (g/l) 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2
Số ml dd glucose 10g/l 0 0,06 0,12 0,18 0,24 0,3 0,36
Số ml nƣớc cất 3 2,94 2,88 2,82 2,76 2,7 2,64
OD(570nm) 0 0,167 0,328 0,471 0,603 0,715 0,83 Bước 2: Pha loãng mẫu nếu cần thiết
Bước 3: Hút 3ml mẫu + 1,5 ml DNS trộn đều, đậy nắp, đun sôi cách thủy trong 10 phút (tính từ khi nước sơi). Lấy ra để nguội đến nhiệt độ phịng. Mang đo OD ở bước sóng 570nm. Ghi lại kết quả thu được.