NDMA NDMA-d6 NDPA NDPhA
Mẫu chuẩn 17,9 10,3 78,6 5,3
Mẫu thêm chuẩn 18,4 10,5 82,6 5,6
% sai lệch cho phép ± 20 % ± 20 % ± 10 % ± 50 %
Khoảng cho phép 14,1 – 21,5 8,2 – 13,1 70,7 – 86,5 2,7 – 8,0 Nhận xét Đạt yêu cầu Đạt yêu cầu Đạt yêu cầu Đạt yêu cầu
3.2.1.3. Phân tích mẫu trắng, mẫu chuẩn và mẫu thêm chuẩn
Tiến hành phân tích mẫu trắng, mẫu chuẩn và mẫu trắng thêm chuẩn tại mức nồng độ 100 ng/mL.
Hình 3.13. Sắc ký đồ mẫu trắng, mẫu chuẩn và mẫu trắng thêm chuẩn
Từ sắc đồ cho thấy mẫu trắng khơng có tín hiệu của chất phân tích, mẫu chuẩn và mẫu trắng thêm chuẩn có pic của các nitrosamin ở thời gian trùng khớp với nhau (chênh lệch không quá 2%) với thời gian lưu của NDMA là 4,8 phút; NDPA là 9,5 phút; NDPhA là 14,8 phút.
Kết luận: Phương pháp là đặc hiệu để phân tích các nitrosamin
3.2.2. Giới hạn phát hiện (LOD) và giới hạn định lượng (LOQ)
Tiến hành phân tích mẫu trắng thêm chuẩn với nồng độ thấp cịn có thể xuất hiện tín hiệu chất phân tích. Phân tích lặp lại 6 lần. Tiến hành xác định tỷ lệ S/N tự động theo phần mềm của máy. Giới hạn phát hiện là nồng độ mà tại đó có S/N=3. Giới hạn định lượng là giới hạn mà tại đó S/N=10 hay LOQ=3,3LOD.
Hình 3.14. Sắc ký đồ mẫu thêm chuẩn tại mức nồng độ LOQ= 0,5 ng/g
Nhận xét: LOQ của phương pháp là 0,5 ng/g; LOD của phương pháp là 0,2 ng/g.
3.2.3. Khoảng làm việc
Tiến hành thêm chuẩn vào mẫu trắng ở các mức nồng độ 0,5; 2; 5; 10; 20; 50;100 ng/g và phân tích trên LC-MS/MS. Xây dựng đường phụ thuộc giữa diện tích píc của ngoại chuẩn và nội chuẩn tương ứng. Đường chuẩn được lập theo phần mềm của thiết bị.