Trong quá trình phân tách phần chiết etylacetat bằng phương pháp sắc ký cột thường, ở phân nhóm phân đoạn ES3 có xuất hiện tinh thể màu trắng dạng hình kim. Tiến hành nhận dạng tinh thể này trên hệ thống sắc ký khí khối phổ GC/MS (sắc ký đồ và phổ đồ của phân đoạn ES được thể hiện ở hình 3.6a và 3.6b).
Trên sắc ký đồ xuất hiện 5 píc với các chiều cao và diện tích píc khác nhau, tại thời gian lưu 15,383 xuất hiện 1 píc có chiều cao và diện tích píc lớn hơn hẳn các píc cịn lại, khẳng định đây là píc của tinh thể phân lập được từ nhóm phân đoạn ES3. Tinh thể này được nhận dạng bằng phương pháp so sánh phổ khối thu được với phổ khối có trong thư viện phổ của hệ thống GC/MS, kết luận ES-tt là hợp chất hexandecanoic acid.
Hình 3.6b: Phổ MS của hexadecanoic acid
Các tín hiệu trên phổ cộng hưởng từ hạt nhân của ES-tt (hình 3.7a, b):
1H-NMR (500MHz; CDCl3), (ppm): 0.88 (3H, m, J = 6.6 Hz, H-1), 1.25 (2H, H-NMR (500MHz; CDCl3), (ppm): 0.88 (3H, m, J = 6.6 Hz, H-1), 1.25 (2H, t, J = 8.5 Hz, H-213), 1.63 (2H, d, H-14), 2.34 (2H, s, H-15). 13C-NMR (125MHz; CDCl3), (ppm): 16.78 (C-1), 25.35 (C-2), 31.71 (C-3), 31.72 (C-4), 31.89 (C-5), 31.89 (C-6), 32.02 (C-7), 32.09 (C-8), 32.24 (C-9), 32.32 (C- 10), 32.58 (C-11), 32.59 (C-13), 27.33 (C-14), 36.68 (C-15), 182.613 (C-16).
Hình 3.7a: Phổ 1H-NMR của hexadecanoic acid
3.5. Khảo sát một số chỉ số hóa học và hoạt tính sinh học
Các chỉ số tổng hàm lượng phenolic và tổng hàm lượng flavonoid được xác định và khả năng bắt gốc tự do được khảo sát để đánh giá khả năng chống oxi hóa của các cặn chiết, đồng thời khảo sát khả năng ức chế độ hoạt động của enzym α-glucosidase.
3.5.1.Khảo sát hoạt tính chống oxi hóa
Kết quả xác định tổng phenolic và tổng hàm lượng flavonoid thu được kết quả khả quan trong việc chống oxi hóa của cây bán chi liên.
Số liệu cụ thể của xác đinh tổngphenolic và tổng hàm lượng flavonoid được nêu rõ trong bảng 3.4 dưới đây
Bảng 3.4: Kết quả khảo sát hoạt tính chống oxi hóa
Tổng phenolic (mg/g CK) Tổng flavonoid (mg/g CK) Dịch chiết tổng EtOH 70,77 25,72
Tổng hàm lượng flavonoid được xác định là 25,72 mg/g CK(tính theo quercetin) cao hơn so với kết quả thu được khi xác định hàm lượng flavonoid (tính theo lượng catechin) trong dịch chiết methanol của loài bán chi liên khác là 23,91 mg/gCK[24]. Chỉ số tổng hàm lượng phenolic ở mức trung bình so với các cây khác thuộc cùng chi Scutellaria, khoảng 52,11~ 281,93 mg/gCK [25]. Kết quả thực nghiệm chứng tỏ bán chi liên là dược liệu thể hiện hoạt tính chống oxi hóa khá tốt, phù hợp với các nghiên cứu khoa học về hoạt tính này đã được cơng bố trước đó.