- Cắt lơng, sát trùng vị trí lấy máu Garo vùng tĩnh mạch định lấy máu
43. Phƣơng pháp làm tiêu bản máu và nhuộm bằng Giemsa? Phƣơng pháp làm tiêu bản máu
Phƣơng pháp làm tiêu bản máu
- Chuẩn bị: 1 Phiến kính 1 lamen sạch
- Lấy 1 giọt máu nhỏ, thường lấy ở tĩnh mạch tai - Bỏ 1 giọt dầu lên rì phiến kính
- Dùng lamen đặt vào giữa phiến kính, cho tiếp xúc với giọt máu, cho chảy đều 2 bên
- Nếu giọt máu to thì đặt lamen lên vị trí khác, rồi với 1 góc 45 độ, đẩy nhẹ lamen về phía đằng kia của phiến kính để dàn đều máu( 1 giọt máu chỉ nên phiết 1 phiến kính)
Phƣơng pháp nhuộm bằng Giemsa
Thuốc nhuộm: Bột Giemsa 0,5g
Glycerin trung tính C.P. 33,0 ml Cồn Methanol A.R 33,0 ml
Cho bột giemsa vào cối đã rửa sạch, thêm glycerin vào và nghiền nhỏ bằng chày sứ. Đun sách thủy ở nhiệt độ 55-60 trong 2h, thỉnh thoảng khuấy đều
Sau cùng cho cồn methanol vào. Bảo quản dùng lâu dài. Thuốc nhuộm dùng phải pha loãng 10 lần bằng dung dịch đệm hoặc nước cất trung tính(1:10)
Tiến hành: 1. Đánh số tiểu bản để tránh lẫn
2. Cố định bằng cồn methanol( trong 5 phút) hoặc các thứ thuốc khác 3. Cho thuốc nhuộm mới pha phủ lên một lớp, nhuộm 25-30 phút
4. Rửa bằng nước, để khơ, xem vật kính dầu
44.Phƣơng pháp làm tiêu bản máu và phƣơng pháp nhuộm Wright? Phƣơng pháp làm tiêu bản máu
- Chuẩn bị: 1 Phiến kính 1 lamen sạch
- Lấy 1 giọt máu nhỏ, thường lấy ở tĩnh mạch tai - Bỏ 1 giọt dầu lên rì phiến kính
- Dùng lamen đặt vào giữa phiến kính, cho tiếp xúc với giọt máu, cho chảy đều 2 bên
- Nếu giọt máu to thì đặt lamen lên vị trí khác, rồi với 1 góc 45 độ, đẩy nhẹ lamen về phía đằng kia của phiến kính để dàn đều máu( 1 giọt máu chỉ nên phiết 1 phiến kính)
Nhuộm wright
Thuốc nhuộm: Bột wright 0,1 g
Cồn methanol A.R 60 ml
- Cân chính xác 0,1 g wright cho vào cối sư nghiền nhỏ
- Thêm khoarng1/5 lượng cồn methanol, tiếp tục nghiền cho thuốc nhuộm hòa tan hết rồi cho tiếp cồn methanol cịn lại. Có thể cho thêm 3ml glycerin trung tính để giảm bớt cồn bay hơi nhanh trong khi nhuộm và có thể làm cho tế bào nhuộm được rõ ràng
Tiến hành
- Cho phiến kính máu lên giá
- Nhỏ 3-5 giọt wright phủ một lớp lên tiêu bản
- Sau 1 phút thêm vào 2-3 lần dung dịch đệm hoặc nước cất, lắc nhẹ phiến kính để hịa đều với thuốc nhuộm. Khoảng 10 phút rửa phiến kính bằng nước - Dựng phiến kính khơ trong khơng khí và xem bằng vật kính dầu
Chú ý: Thời gian nhuộm wright tùy theo thuốc nhuộm và nhiệt độ trong phòng mà quyết định
+ Sau khi cho thuốc nhuộm vào không được để thuốc nhuộm khô trên tiêu bản mới cho dung dịch đẹm pha lỗng. Vì như vậy, hạt thuốc nhuộm sẽ bám vào tế bào, tiêu bản nhuộm không rõ
+ Với những tiêu bản nhuộm mới khơ có thể khắc phục bằng cách nhỏ thêm vài giọt thuốc nhuộm bám vào tế bào tan trong cồn methnol, sau đó lại cho dung dịch đệm vào để pha loãng