- Sử dụng phương pháp nuôi cấy mô hiện hành
31 Kết quả bảng 4.2 cho thấy:
Kết quả bảng 4.2 cho thấy:
Bổ sung BAP đã làm tăng hiệu quả nhân nhanh chồi in vitro cây Phong lữ thảo. Các mẫu cấy đều đã tái sinh tạo chồi trên các môi trường không bổ sung và có bổ sung 0,5; 1; 1,5 BAP.Tuy nhiên, tỷ lệ tạo cụm chồi khi không bổ sung BAP là tương đối thấp. Khi tăng hàm lượng BAP ở cơng thức 0,5; 1,0 mg/l thì hệ số nhân chồi có xu hướng tăng dần, tương ứng từ 2 đến 3,1 lần sau 4 tuần nuôi cấy. Tuy nhiên nếu tiếp tục tăng nồng độ lên 1,5 mg/l BAP thì hệ số nhân chồi lại giảm cịn 2,4 lần và tạo nhiều callus ở nồng độ BAP cao. Khi phân tích thống kê ở mức sai khác nhỏ nhất có ý nghĩa LSD 5 % thì 3,1 lần chính là hệ số nhân chồi cao nhất khi nuôi cấy chồi Phong lữ thảo trên môi trường bổ sung 1,0 mg/l BAP. Tương ứng với số chồi tăng mạnh, thì chiều cao cũng có xu hướng tăng ở các nồng độ 0,5; 1,0 mg/l BAP lần lượt là 0,73; 1,67 cm. Tuy nhiên khi tăng nồng độ lên 2 mg/l BAP thì chiều cao lại giảm xuống và chỉ đạt 0,4 cm; chồi phát triển chậm. Ở thí nghiệm này tỷ lệ tạo cụm chồi ở hai nồng độ là 1 mg/l BAP và 1,5 mg/l BAP là tương đương nhau với tỷ lệ tạo cụm chồi là 80 % còn tỷ lệ tạo cụm chồi ở nồng độ 0 và 0,5 mg/l BAP lần lượt là 53,33 % và 66,67%.
Quan sát về hình thái cho thấy: chồi ở các công thức đều phát triển tương đối tốt. Tuy nhiên chồi ở cơng thức khơng bổ sung BAP thì phát triển chậm, chồi bé, không tạo nhiều caluss; chồi ở công thức bổ sung 0,5 mg/l BAP thì chồi phát triển chậm, lá nhỏ, màu xanh nhạt và ít đốt; ở cơng thức bổ sung nồng độ 1,5 mg/l BAP thì tỷ lệ tạo cụm chồi tương đối cao, tạo caluss nhiều nhưng không bật được chồi nhiều; ở công thức bổ sung 1 mg/l BAP cho thấy tỷ lệ tạo cụm chồi tương đốt tốt và chồi phát triển tốt, chồi mập, lá xanh, to, nhiều đốt.
Qua các kết quả trên cho thấy môi trường MS + 1,0 mg/l BAP cho hệ số nhân chồi cao nhất (3,1 lần) khi nuôi cấy chồi Phong lữ thảo sau 4 tuần. Sreedhar và cộng sự (năm 1999) cũng nhận thấy mơi trường MS rắn (có bổ sung agar) có bổ sung 10 µM BAP là mơi trường thích hợp nhất để nhân
32
nhanh chồi Phong lữ thảo. Tuy nhiên nhóm nghiên cứu đã không đề cập đến hệ số nhân cũng như số chồi.