CT1: Môi trường MS; CT2: Môi trường Knudson; CT3: Môi trường VW
3.3. Ảnh hƣởng của Kinetin đến sự nhân chồi của Địa hoàng in vitro
Sự phát sinh hình thái của mẫu cấy phụ thuộc vào rất nhiều yếu tố nhƣ môi trƣờng nuôi cấy, hàm lƣợng đƣờng, chất kích thích sinh trƣởng, điều kiện nuôi cấy… Trong đó, chất điều tiết sinh trƣởng đóng một vai trò quan trọng trong việc điều khiển đƣờng hƣớng tái sinh của mẫu cấy cũng nhƣ sự phát triển của chồi tạo thành. Mỗi loại chất điều tiết sinh trƣởng đƣợc sử dụng phù hợp với yêu cầu và mục đích của từng đối tƣợng.
Kinetin là một chất kích thích sinh trƣởng thuộc nhóm cytokinin, có tác dụng hoạt hóa sự phân chia tế bào. Nguyên nhân là do cytokinin hoạt hóa mạnh mẽ quá trình tổng hợp axit nucleic và protein dẫn đến kích sự phân chia tế bào. Cytokinin ảnh hƣởng rõ rệt lên sự hình thành và phân hóa cơ quan của thực vật, đặc biệt là sự phân hóa chồi. Vì thế, đề tài tiến hành bố trí thí nghiệm với các nồng độ của Kinetin khác nhau nhằm khảo sát ảnh hƣởng của chúng tới hệ số nhân chồi cây Địa hoàng.
Các chồi Địa hoàng in vitro đƣợc cấy chuyển sang môi trƣờng MS bổ
sung Kinetin theo dải nồng độ 0,0; 0,3; 0,5; 1,0 và 1,5 mg/l. Kết quả thí nghiệm thể hiện trên bảng 3.3, hình 3.5 và hình 3.6.
Bảng 3.3. Ảnh hưởng của Kinetin đến sự nhân chồi của Địa hoàng in vitro
Công thức Nồng độ Kinetin (mg/l)
Hệ số nhân chồi (lần)
Chiều cao chồi (cm) CT1(ĐC) 0,0 2,84 1,51 CT2 0,3 3,54* 2,06* CT3 0,5 6,23* 3,11* CT4 1,0 6,22* 2,93* CT5 1,5 4,72* 2,59* LSD0,05 0,08 0,04 CV% 1,0 0,8
Ghi chú *: Sai khác có ý nghĩa ở mức 0,05 so với đối chứng ns: Không sai khác ở mức ý nghĩa 0,05 so với đối chứng
Số liệu bảng 3.3, hình 3.5 và hình 3.6 cho thấy, nồng độ Kinetin có ảnh hƣởng rõ rệt đến sự nhân chồi của Địa hoàng, trong dải nồng độ Kinetin thí nghiệm thì hệ số nhân chồi dao động trong khoảng 2,84 - 6,23 lần. Hệ số nhân chồi cao nhất khi môi trƣờng bổ sung 1,0 mg/l Kinetin là 6,22 - 6,23 lần. Tuy nhiên khi tăng nồng độ Kinetin lên 1,5mg/l thì hệ số nhân chồi giảm đi chỉ đạt 4,72 lần và khi giảm nồng độ xuống 0,3 mg/l hệ số nhân chồi cũng giảm còn 3,54 lần. Xử lý thống kê cho thấy giữa hai công thức có hệ số nhân chồi đạt
đƣợc cao nhất không có sự sai khác. Vì vậy, bổ sung 0,5 - 1,0 mg/l Kinetin có tác dụng gia tăng hệ số nhân chồi Địa hoàng in vitro.