a) Nồng độ Kinetin 0,0 mg/l; b) Nồng độ Kinetin 0,3 mg/l; c) Nồng độ Kinetin 0,5 mg/l; d) Nồng độ Kinetin 1,0 mg/l; e) Nồng độ Kinetin 1,5 mg/l
a b c
Số liệu bảng 3.3, hình 3.7 và hình 3.8 cho thấy: Chiều cao chồi dao động trong khoảng 1,51 - 3,11 cm. Khi tăng nồng độ Kinetin từ 0 - 0,5 mg/l thì chiều cao chồi tăng từ 1,51 - 3,11 cm, tuy nhiên khi tăng nồng độ Kinetin lên 1,0; 1,5 mg/l thì chiều cao trung bình chồi không tăng lên mà giảm đi chỉ còn tƣơng ứng là 2,93; 2,59 cm. Chiều cao chồi cao nhất khi môi trƣờng bổ sung 0,5 mg/l Kinetin đạt 3,11 cm.
Nhƣ vậy, sự nhân chồi Địa hoàng in vitro tốt nhất đạt đƣợc trong môi trƣờng MS có bổ sung 0,5 mg/l Kinetin. Các chồi nhân lên đều có sức sống tốt, màu xanh non đạt tiêu chuẩn cho ra rễ tạo cây hoàn chỉnh.
Kết quả nghiên cứu của chúng tôi cho kết quả thấp hơn kết quả nghiên cứu của một số tác giả khác trên thế giới. Một số nghiên cứu cho thấy khi nuôi cấy Địa hoàng trong môi trƣờng MS bổ sung 1 mg/l BAP và 0,1 mg/l IAA cho hệ số nhân chồi đạt 8 lần (Ewelina et al, 2014), hay sử dụng TDZ
cho hệ số nhân chồi đạt 12,25 lần khi nuôi cấy trong môi trƣờng có bổ sung 1,0 mg/l TDZ (Ewelina và cs, 2014).
Đối với môi trƣờng bổ sung Kinetin, kết quả nghiên cứu của chúng tôi chỉ ra rằng môi trƣờng thích hợp nhân chồi Địa hoàng là MS bổ sung 0,5 mg/l Kinetin cho hệ số nhân chồi đạt 6,22 chồi/mẫu và chiều cao TB chồi đạt 3,11 cm.
3.4. Ảnh hƣởng phối hợp của Kinetin và BAP đến sự nhân chồi của Địa hoàng in vitro hoàng in vitro
Các chồi Địa hoàng in vitro đƣợc cấy chuyển sang môi trƣờng MS bổ
sung 0,5 mg/l Kinetin và (0,0; 0,5; 1,0; 1,5) mg/l BAP. Kết quả thí nghiệm thể hiện trên bảng 3.4, hình 3.9 và hình 3.10.
Số liệu bảng 3.4 và hình 3.9, hình 3.10 cho thấy, sự phối hợp giữa Kinetin và BAP có ảnh hƣởng rõ rệt đến sự nhân chồi của Địa hoàng sau 4 tuần nuôi cấy. Trong môi trƣờng nhân chồi, khi kết hợp 0,5 mg/l Kinetin và nồng độ tăng dần BAP từ 0,5 - 1,0 mg/l nhận thấy hệ số nhân chồi tăng là 6,43 - 7,12 lần. Tuy nhiên, khi tăng nồng độ BAP lên đến 1,5mg/l thì hệ số nhân chồi giảm đi chỉ đạt 4,23 lần, sự sai khác giữa các công thức thí nghiệm
có ý nghĩa thống kê. Hệ số nhân chồi cao nhất trong môi trƣờng có 0,5 mg/l Kinetin và 1,0 mg/l BAP đạt 7,12 lần, cao hơn so với đối chứng là 0,9 lần.
Vậy, môi trƣờng MS bổ sung 0,5 mg/l Kinetin và 1,0 mg/l BAP (CT3) có tác dụng gia tăng hệ số nhân chồi cao nhất đạt 7,12 lần.
Bảng 3.4. Ảnh hưởng phối hợp của Kinetin và BAP đến sự nhân chồi của Địa hoàng in vitro
Công thức Nồng độ Kinetin (mg/l) Nồng độ BAP (mg/l) Hệ số nhân chồi (lần) Chiều cao chồi (cm) CT1 (ĐC) 0,5 0,0 6,23 3,11 CT2 0,5 0,5 6,43* 3,36* CT3 0,5 1,0 7,12* 3,64* CT4 0,5 1,5 4,23* 2,62* LSD0,05 0,06 0,05 CV% 0,5 0,8
Ghi chú *: Sai khác có ý nghĩa ở mức 0,05 so với đối chứng ns: Không sai khác ở mức ý nghĩa 0,05 so với đối chứng