a) Nồng độ IAA 0,0 mg/l; b) Nồng độ IAA 0,3 mg/l; c) Nồng độ IAA 0,5 mg/l; d) Nồng độ IAA 1,0 mg/l; e) Nồng độ IAA 1,5 mg/l
a b c
Số liệu bảng 3.5 và hình 3.15 chiều dài rễ đạt đƣợc cao nhất khi môi trƣờng bổ sung 0,5 - 1,0 mg/l IAA là 4,16 - 4,18 cm. Khi tăng nồng độ IAA lên 1,5 mg/l chiều dài rễ không tăng mà giảm xuống chỉ còn 2,06 cm.
Nhƣ vậy, môi trƣờng ra rễ cây Địa hoàng thích hợp nhất là ½MS bổ sung 0,5 mg/l IAA cho tỷ lệ ra rễ đạt 85,56%, số rễ TB/cây đạt 5,74 và chiều dài rễ đạt 4,16 cm.
Một số nghiên cứu khác cho thấy sự ra rễ của Địa hoàng tốt nhất trong môi trƣờng MS bổ sung 0,1 mg/l IAA, 93% số cây ra rễ và chiều dài rễ đạt 4,4 cm sau 6 tuần nuôi cấy (Ewelina et al, 2015). Khác với nghiên cứu trên, ở nghiên cứu này chúng tôi lại thu đƣợc hiệu quả ra rễ của địa hoàng tốt nhất khi sử dụng môi trƣờng ½MS bổ sung 0,5 mg/l IAA cho tỷ lệ cây ra rễ đạt 85,56% và chiều dài rễ đạt 4,16 cm sau 4 tuần nuôi cấy. Nhƣ vậy, tỷ lệ cây ra rễ và chiều dài rễ Địa hoàng in vitro của chúng tôi khi sử dụng 0,5 mg/l IAA thấp hơn Ewelina và cộng sự (2015) khi sử dụng 0,1 mg/l IAA là chất kích thích ra rễ.
3.6. Ảnh hƣởng phối hợp của IAA và NAA đến sự tạo rễ của cây Địa hoàng in vitro hoàng in vitro
3.6.1. Ảnh hưởng phối hợp của IAA và NAA đến tỷ lệ cây ra rễ
Các chồi Địa hoàng in vitro đƣợc cấy sang môi trƣờng kích thích ra rễ
MS bổ sung IAA và NAA. Kết quả thí nghiệm thể hiện trên bảng 3.6
Bảng 3.6. Ảnh hưởng phối hợp của IAA và NAA đến sự tạo rễ cây Địa hoàng in vitro
Công thức Nồng độ IAA (mg/l) Nồng độ NAA (mg/l) Tỷ lệ cây ra rễ (%) Số rễ TB/cây Chiều dài rễ (cm) CT1 (ĐC) 0,5 0,0 85,56 5,74 4,16 CT2 0,5 0,5 88,89* 6,06* 4,30* CT3 0,5 1,0 94,44* 6,96* 4,52* CT4 0,5 1,5 73,33* 3,29* 3,06* LSD0,05 0,94 0,05 0,03 CV% 1,9 0,5 0,5
Số liệu của bảng 3.6 và hình 3.17 cho thấy, trong các công thức thí nghiệm phối hợp nồng độ IAA và NAA bổ sung vào môi trƣờng khác nhau cho tỷ lệ cây ra rễ khác nhau, ảnh hƣởng này có ý nghĩa thống kê. Khi kết hợp MS + 0,5 mg/l IAA và nồng độ NAA tăng dần nhận thấy tỷ lệ ra rễ cây Địa hoàng in vitro tăng dần khi bổ sung 0,5; 1,0 mg/l với tỷ lệ cây ra rễ tƣơng ứng là 88,89; 94,44%. Tuy nhiên, khi tăng nồng độ NAA lến đến 1,5 mg/l thì tỷ lệ cây ra rễ giảm đi chỉ còn 73,33%. Tỷ lệ ra rễ cây Địa hoàng in vitro cao nhất khi môi trƣờng bổ sung kết hợp 0,5 mg/l IAA và 1,0 mg/l NAA đạt 94,44%.
Kết quả thí nghiệm cho thấy, khi phối hợp IAA và NAA bổ sung vào môi trƣờng ra rễ của Địa hoàng in vitro thì tỷ lệ ra cây ra rễ cao hơn so với
việc chỉ bổ sung đơn thuần IAA.
Nhƣ vậy, phối hợp 0,5 mg/l IAA và 1,0 mg/l NAA bổ sung vào môi trƣờng ra rễ Địa hoàng là cần thiết.
Hình 3.17. Biểu đồ tỷ lệ cây Địa hoàng in vitro ra rễ
CT1: ½MS + 0,5 mg/l IAA + 0,0 mg/l NAA; CT2: ½MS + 0,5 mg/l IAA + 0,5 mg/l NAA; CT3: ½MS + 0,5 mg/l IAA + 1,0 mg/l NAA; CT4: ½MS + 0,5 mg/l IAA + 1,5 mg/l NAA
3.6.2. Ảnh hưởng phối hợp của IAA và NAA đến số rễ trung bình/cây và chiều dài rễ chiều dài rễ
Hình 3.18. Biểu đồ số rễ trung bình/cây Địa hoàng in vitro
CT1: ½MS + 0,5 mg/l IAA + 0,0 mg/l NAA; CT2: ½MS + 0,5 mg/l IAA + 0,5 mg/l NAA; CT3: ½MS + 0,5 mg/l IAA + 1,0 mg/l NAA; CT4: ½MS + 0,5 mg/l IAA + 1,5 mg/l NAA.
Hình 3.19. Biểu đồ chiều dài rễ cây Địa hoàng in vitro
CT1: ½MS + 0,5 mg/l IAA + 0,0 mg/l NAA; CT2: ½MS + 0,5 mg/l IAA + 0,5 mg/l NAA; CT3: ½MS + 0,5 mg/l IAA + 1,0 mg/l NAA; CT4: ½MS + 0,5 mg/l IAA + 1,5 mg/l NAA
Số liệu trong bảng 3.6 và hình 3.18 cho thấy: Trong 4 tuần nuôi cấy, số rễ TB/cây trong các công thức thí nghiệm dao động từ 3,29 - 6,96 rễ/cây. Khi bổ sung vào môi trƣờng nuôi cấy 0,5 mg/l IAA và 1,0 mg/l NAA (CT3) cho số rễ TB/cây cao nhất đạt 6,96 rễ/cây. Ở công thức thí nghiệm này, chúng tôi
quan sát đặc điểm rễ nhận thấy ngoài hình thành rễ tóc, một số rễ Địa hoàng phình to có xu hƣớng tạo thành củ.
Số liệu bảng 3.6 và hình 3.19 cho thấy: Sau 4 tuần nuôi cấy chiều dài rễ trong các công thức thí nghiệm dao động trong khoảng 3,06 - 4,52 rễ/cây. Khi bổ sung vào môi trƣờng nuôi cấy 0,5 mg/l IAA và 1,0 mg/l NAA (CT3) cho chiều dài rễ cao nhất đạt 4,52 cm.
Nhƣ vậy, môi trƣờng ra rễ cây Địa hoàng thích hợp nhất là ½MS bổ sung 0,5 mg/l IAA và 1,0 mg/l BAP cho tỷ lệ cây ra rễ đạt 94,44%, số rễ TB/cây đạt 6,96 và chiều dài rễ đạt 4,52 cm.