1.4.3 .Các bƣớc của quá trình nhân giống invitro
2.3.Phƣơng pháp nghiên cứu
2.3.1. Phương pháp bố trí thí nghiệm
2.3.1.1. Ảnh hưởng của chiều dài rễ khi ra ngôi đến tỷ lệ sống và khả năng sinh trưởng của cây Đồng Tiền lùn nuôi cấy mô ở giai đoạn vườn ươm.
Thí nghiệm đƣợc bố trí trong nhà lƣới, theo khối ngẫu nhiên hoàn chỉnh, 3 lần nhắc lại, mỗi lần nhắc lại 100 cây, gồm công thức thí nghiệm: CT1: Sau cấy chuyển 10 ngày (bắt đầu có mầm rễ) (Đối chứng).
CT2: Sau cấy chuyển 15 ngày (rễ dài khoảng 1 cm). CT3: Sau cấy chuyển 20 ngày (rễ dài 2 - 3 cm).
2.3.1.2. Ảnh hưởng của các loại giá thể đến tỷ lệ sống và khả năng sinh trưởng của giống Đồng Tiền lùn nuôi cấy mô giai đoạn vườn ươm.
Thí nghiệm bố trí trong nhà lƣới theo khối ngẫu nhiên hoàn chỉnh, 3 lần nhắc lại, mỗi lần 100 cây, gồm 4 công thức thí nghiệm:
CT1: Giá thể mua sẵn, nhập khẩu từ Thái Lan (Đối chứng). CT2: 100% cát.
CT3: 1/2 trấu hun + 1/2 sơ dừa.
CT4: 1/3 cát + 1/3 sơ dừa + 1/3 trấu hun.
2.3.1.3. Ảnh hưởng của nồng độ MS đến sinh trưởng của Đồng tiền lùn nuôi cấy mô giai đoạn vườn ươm .
Thí nghiệm bố trí trong nhà lƣới theo khối ngẫu nhiên hoàn chỉnh, 3 lần nhắc lại, mỗi lần 100 cây, gồm 4 công thức thí nghiệm:
CT1: Phun nƣớc lã (Đối chứng). CT2: 0,5 MS/l (ml/l).
CT3: 1MS/l (ml/l). CT4: 1,5MS/l (ml/l).
2.3.2. Các chỉ tiêu theo dõi
+ Tỷ lệ sống: Đếm toàn bộ số cây chết, cây sống trên mỗi ô thí nghiệm rồi lấy trung bình 3 lần nhắc lại
Tổng số cây sống/Ô thí nghiệm
Tỷ lệ cây sống(%) = x 100. Tổng số cây/Ô thí nghiệm
+ Động thái ra lá (lá): Đếm số lá của 30 cây/ô thí nghiệm rồi tính trung bình của 3 lần nhắc (10 ngày theo dõi 1 lần).
+ Động thái tăng trƣởng chiều cao cây (cm): đo từ mặt đất đến vút đỉnh lá cao nhất của 30 cây/ô thí nghiệm rồi tính trung bình cộng (10 ngày theo dõi 1 lần).
+ Tỷ lệ cây xuất vƣờn: Tiêu chuẩn cây con xuất vƣờn, cây cao từ 2 – 4 cm, có khoảng 4 – 6 lá, mạnh khỏe, không sâu bệnh hại.
Tổng số cây đạt tiêu chuẩn/Ô thí nghiệm Tỷ lệ cây con xuất vƣờn (%) = x 100. Tổng số cây/Ô thí nghiệm
2.3.2.2. Sâu bệnh hại
Theo dõi các loại sâu bệnh hại Đồng Tiền xuất hiện ở vƣờn ƣơm trong thời gian tiến hành thí nghiệm. Các bệnh phổ biến nhƣ thối thân, đốm lá, sâu vẽ bùa, nhện...
2.3.3. Phương pháp phân tích và sử lý số liệu
- Số liệu đƣợc xử lý trên phần mềm IRRISTAT 5.0. - Vẽ biểu đồ bằng Microsoft Excel.