1. Nhuộm đơn giản
Hình 1 Hình 2
Hình 1: mẫu canh trường E3 – trực khuẩn ngắn. Quan sát thấy kích thước trực khuẩn ngắn chiều rộng bằng khoảng 1/3 đến 1/2 chiều dài. Các tế bào được tách rời nhưng số lượng tế bào vẫn còn rất lớn, cần giảm lượng mẫu làm tiêu bản và dàn đều để các tế bào tách dời nhau hơn.
Hình 2: mẫu canh trường C3 – cầu khuẩn. Các tế bào có sự tách nhau tương đối, tuy nhiên số lượng tế bào vẫn còn rất lớn và chồng chất lên nhau, cần giảm lượng canh trường làm tiêu bản và dàn đều để tách rời các tế bào.
Mẫu E3 Mẫu C3
à Nhận xét:trực khuẩn dài, vi khuẩn gram (+), sau khí nhuộm có màu xanh tím. Các tế nào tách dời nhau đôi khi dính lại với nhau do nhiều vsv, rất dễ quan sát do kích thước tế bào lớn, số lượng tế bào trực khuẩn dài ít. Theo quan sát ta thấy tiêu bản có sự nhiệm tạp có thể do trong khi thao tác làm thí nghiệm chưa đúng, sử dụng que cấy lấy các mẫu canh trường khác nhưng khử trùng que cấy không chuẩn ,…
V. Thảo luận
Các yếu tố ảnh hưởng đến kết quả nhuộm:
- Giai đoạn tẩy màu: đây được coi là giai đoạn quyết định.
- Nếu tẩy màu quá lâu, màu bị ở trôi cả ở vi khuẩn gram (+), khi đó màu cuối cùng của vi khuẩn gram (+) sẽ có màu của thuốc nhuộm thứ cấp như vi khuẩn gram (-) à không quan sát phân biệt được 2 loại vi khuẩn qua màu nhuộm.
- Nếu thời gian tẩy màu ngắn, màu xanh tím của vi khuẩn gram (-) chưa bị rửa trôi hết, do đó màu cuối cùng của vi khuẩn gram (-) sau khi kết thúc quá trình nhuộm có màu gần giống mới vi khuẩn gram (+) à không quan sát phân biệt được qua màu nhuộm.
- Xả nước: không xối nước trực tiếp hay xối nước mạnh để tránh rửa trôi vi sinh vật.
- Quá trình tạo vết bôi:
+ Vết bôi quá dày thì quá trình nhuộm hoặc rửa chỉ xảy ra ở phía trên, lớp phía dưới không tiếp cận được.
+ Quá trình dàn đều không tốt à các tế bào vi sinh vật không được tách rời nhau à khó quan sát.
- Tuổi canh trường: một số loài vi khuẩn bacillus hay trực khuẩn
clostridium gram (+) tuổi canh trường quá già có tính chất tương tự như vi khuẩn gram (-).
Bài 9: Quan sát nấm mốc
I. Mục đích thí nghiệm