Kết quả kiểm tra giám định bằng phản ứng RT-PCR cho thấy, tỷ lệ mẫu dương tính với IBV theo phương thức chăn nuôi công nghiệp (44,05%) cao hơn phương thức chăn nuôi thả đồi (35,38%) (bảng 4.9 và hình 4.20).
Các phương pháp được sử dụng rộng rãi trong chẩn đoán xác định IBV chủ yếu là phân lập qua phôi trứng hoặc các phản ứng huyết thanh học như ELISA, phản ứng miễn dịch huỳnh quang. Phản ứng RT-PCR đã được sử dụng để chẩn đoán sự có mặt của IBV trong các mẫu tách chiết từ dịch khí quản hoặc dịch niệu nang phôi gà. Các kỹ thuật này đều kết quả có mức độ tin cậy cao và được áp dụng rộng rãi để chẩn đoán chính xác và định type IBV (Cavanagh, 2003; Cavanagh, 2005). Các nghiên cứu trước đây đã xác định tỷ lệ mẫu dương tính với IBV bằng kỹ thuật RT-PCR, tỷ lệ này ở gà thịt thương phẩm là 36,36% (Jahantigh et al., 2013). Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng, có 4/91 chủng gây bệnh thuộc serotype Massachusetts.
Hình 4.20. Kết quả phản ứng RT-PCR xác định sự có mặt của IBV trong
mẫu bệnh phẩm bằng cặp mồi đặc hiệu (P: đối chứng dương IBV; M: thang
DNA chuẩn 1kb (Fermentas))
Ở một nghiên cứu khác, tỷ lệ mẫu dương tính từ gà nghi nhiễm với IBV được ghi nhận từ năm 2002-2006 ở Tây Âu là 59%, trong đó nổi bật vẫn là serotype Massachusetts. Kết quả chẩn đoán cho thấy các mẫu bệnh phẩm nghi mắc bệnh IB cho kết quả dương tính với IB, sản phẩm thu được có kích thước 403 bps, hoàn toàn đúng với kích thước đã công bố (Feng et al., 2012). Kết quả thể hiện ở hình 3.5 cho thấy, các mẫu dương tính thể hiện sản phẩm PCR thu được đều có kích thước 403 bps ở các giếng số 1,2, 4, 5, 6, 7, 9, 10, 11, 13, 14, 15, 17 và 18.
PHẦN 5. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ
5.1. KẾT LUẬN
Từ những kết quả nghiên cứu đã được trình bày ở trên, chúng tôi rút ra một số kết luận sau:
1. Tỷ lệ mắc và tỷ lệ tử vong ở gà đẻ do bệnh IB theo phương thức chăn nuôi công nghiệp cao hơn so với chăn nuôi thả đồi. Trong đó: tỷ lệ gà mắc IB theo phương thức chăn nuôi công nghiệp và thả đồi tương ứng là 15,46% và 10,40%; tỷ lệ tử vong do bệnh IB là 14,72% và 9,71% tương ứng với phương thức chăn nuôi công nghiệp và chăn nuôi thả đồi.
2. Gà đẻ mắc bệnh IB tỷ lệ cao nhất vào các tháng 10-12 và 1-3 trong năm. Gà đẻ mắc IB ở hầu hết các lứa tuổi của gà nhưng gà từ 19-23 tuần tuổi có tỷ lệ mắc và tỷ lệ chết cao nhất.
3. Tỷ lệ mẫu dương tính với cặp mồi đặc hiệu của IBV được xác định bằng phản ứng RT-PCR trung bình là 41,30% (60/145 mẫu).
4. Một số đặc điểm triệu chứng lâm sàng gà mắc bệnh IB gồm gồm: sốt, ủ rũ và ăn kém; hô hấp khó khăn; sưng đầu; viêm kết mạc; báng nước xoang bụng và tiêu chảy phân nhiều nước.
5. Một số đặc điểm bệnh lý đại thể và vi thể quan sát được của gà mắc bệnh IB gồm phổ biến là thận sưng, tiếp đến là các bệnh tích ghi nhận trên đường hô hấp như xuất huyết khí quản, phổi tụ huyết hoặc xuất huyết và viêm túi khí và viêm xoang mũi. Phổi xuất huyết, hồng cầu tràn ngập trong các phế nang, thấm nước phù ở hạ niêm mạc khí quản, xuất huyết kẽ thận và tế bào ống thận thoái hóa không bào là các bệnh tích vi thể phổ biến quan sát được ở gà mắc bệnh IB.
5.2. ĐỀ NGHỊ
Trong những năm gần đây, tình hình chăn nuôi gà đẻ ngày càng phát triển trên cả nước nói chung và đặc biệt ở địa bàn nghiên cứu nói riêng. Mặc dù đã sử dụng vacxin phòng bệnh, bệnh IB gây ra do IBV vẫn thường xuyên xảy ra và gây ra những hậu quả nghiêm trọng thể hiện qua tỷ lệ nhiễm và tỷ lệ tử vong và ảnh hưởng tới khả năng sinh sản của gà mắc bệnh. Chính vì vậy, công tác thú y và
tiêm phòng vacxin ngày càng phải được quan tâm và trú trọng hơn nữa đề phòng tránh những bệnh do virus gây ra, đặc biệt là bệnh IB. Cần có những nghiên cứu chuyên sâu hơn về bệnh IB cũng như IBV trên gà đẻ. Nghiên cứu chế tạo vacxin phòng bệnh từ những chủng virus gây bệnh trên thực địa sẽ cho hiệu quả phòng bệnh cao hơn các loại vacxin nhập ngoại.
TÀI LIỆU THAM KHẢO
Tiếng Việt:
1. Bùi Trần Anh Đào (1999). Kiểm soát sự cảm nhiễm virus gây bệnh Newcastle, Gumboro và viêm phế quản truyền nhiễm trên gà thịt. Hiệu quả phòng bệnh và hiệu quả kinh tế của chương trình vaccin phòng 3 bệnh trên tại thành phố Hồ Chí Minh. Luận văn thạc sĩ, Đại học nông lâm TPHCM.
2. Nguyễn Bá Hiên và Huỳnh Thị Mỹ Lệ (2013). Bệnh truyền nhiễm của động vật nuôi và biện pháp khống chế, NXB Nông nghiệp, tr-379.
3. Võ Thị Trà An (2012). Phân lập, định serotype virus viêm phế quản truyền nhiễm từ gà thịt. Tạp chí Khoa học và Kỹ thuật Thú y, tập 19, số 3.
4. Trần Thanh Vân (1996). Thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng của các biến chủng gây bệnh viêm phế quản truyền nhiễm trên tỉ lệ chết và sản xuất trứng ở đàn gà bố mẹ giống thịt Hubbard High – Yield. Luận văn thạc sĩ, Trường Đại học Nông lâm TPHCM
Tiếng Anh:
5. Ambali, A.G., Jones, R.C., (1990). Early pathogenesis in chicks of infection with an enterotropic strain of infectious bronchitis virus. Avian Dis 34, 809-817. 6. Beaudette, F. R., and Hudson, C. D (1936). Cultivation of the virus of infectious
bronchitis J. Am. Vet. Med. Assoc 90:51-58.
7. Broadfoot, D. I., Pomeroy, B.S. and Smith, W.M. (1956). Effects of infectious bronchitis in baby chicks. Poultry Science 35: 757-762.
8. Callison, S.A., Jackwood, M.W., Hilt, D.A., (2001). Molecular characterization of infectious bronchitis virus isolates foreign to the United States and comparison with United States isolates. Avian Dis 45, 492-499.
9. Casais, R., Dove, B., Cavanagh, D., Britton, P., (2003). Recombinant avian infectious bronchitis virus expressing a heterologous spike gene demonstrates that the spike protein is a determinant of cell tropism. J Virol 77, 9084-9089.
10. Casler, J.G., Cook, J.R., 1999. Cognitive performance in space and analogous environments. Int J Cogn Ergon 3, 351 -372.
11. Cavanagh, D., Naqi, S.A., (2003). Infectious bronchitis. Iowa State University Press, Iowa.
12. Cavanagh, D. Coronavirus avian infectious bronchitis virus. Vet. Res. 38:281- 297. 2007.
13. Coria, M.R (1969). Stabilizing Effect of Magnesium Sulfate on Avian Infectious Bronchitis Virus Propagated in Chicken Embryo Kidney Cells
14. Cook, J.K.A (1984). The classification of new serotypes of infectious bronchitis virus isolated from poultry flocks in Britain between 1981 and 1983. Avian Pathol., 13, 733–741.
15. Crinion, R. A. P., Ball, R.A. and Hofstad, M. S. (1971). Abnormalities in laying chickens following exposure to infectious bronchitis virus at one day old. Avian Diseases 15: 42-48.
16. Cumming, R.B. (1963). Infectious avian nephrosis (uraemia) in Australia. Australian Veterinary Journal 39: 145-147.
17. Darbyshire, J.H., Cook, J.K.A & Peter, R.W (1978). Growth comparisons of avian infectious bronchitis virus strains in organ cultures of chicken tissues. Arch. Virol., 56, 317–325.
18. Da Silva Martins, N. R., Mockett, A. P. A., Barrett, A. D. T., and Cook, J. K. A (1991). IgM responses in chicken serum to live and inactivated infectious bronchitis virus vaccines. Avian Dis. 35:470-475.
19. Gillette, K. G. (1973). Plaque formation by infectious bronchitis virus in chicken embryo kidney cell cultures. Avian Diseases, 1 7: 370-378.
20. Guo, X., A. J. M. Rosa, D. G. Chen, and X. Wang. Molecular mechanisms of primary and secondary mucosal immunity using avian infectious bronchitis virus as a model system. Vet. Immunol. Immunopathol. 121:332-343. 2008.
21. Gonzalez, J.M., Gomez-Puertas, P., Cavanagh, D., Gorbalenya, A.E. & Enjuanes, L. (2003). A comparative sequence analysis to revise the current taxonomy of the family Coronaviridae. Arch Virol 148(11), 2207-35.
22. Hogue, B. & Machamer, C. (2008). Coronavirus structural proteins and virus assembly. In: S. Perlman, et al. (Eds.) Nidoviruses. Washington, D.C.: ASM Press. pp 179-200.
23. Jordan, F. T. W. and Nassar, T.J. (1973). The survival of infectious bronchitis (IB) virus in water. Avian Pathology, 2: 91-101.
24. Jungherr, E. L., T. W. Chomiak, and R. E. Luginbuhl (1956). Immunologic differences in strains of infectious bronchitis virus. In: Proc. 60th Ann. Meet. U.S. Livestk. Sanit. Ass. pp 203-209.
25. Jahantigh M, Salari S, and Hedayati M (2013). Detection of infectious bronchitis virus serotypes by reverse transcription polymerase chain reaction in broiler chickens. Springerplus 2 (1): 36.
26. Julian, R.J. and Willis, N.G. (1969). The nephrosis-nephritis syndrome in chickens caused by Holte strain of infectious bronchitis virus. Canadian Veterinary Journal, 10: 18-2
27. Lai, M.M., (1987). Molecular biology of coronavirus 1986. Adv Exp Med Biol 218, 7-13.
28. Loomis, L. N., Cunningham, C. H., Gray, M. L. and Thorp. F (1950). Pathology of the chicken embryo infected with infectious bronchitis virus. Am. J. Vet. Res. 11:245-251.
29. Mo, M., Huang, B., Wei, P., Wei, T., Chen, Q., Wang, X., Li, M. & Fan, W. (2012). Complete genome sequences of two chinese virulent avian coronavirus infectious bronchitis virus variants. J Virol 86(19), 10903-4.
30. Otsuki K and Tsubokura M (1981). Plaque formation by avian infectious bronchitis virus in primary chick embryo fibroblast cells in the presence of trypsin. Arch Virol. 70(4):315-20.
31. Raj, G. D., and Jones, R. C. (1997). Infectious bronchitis virus: immunopathogenesis of infection in the chicken. Avian Pathol. 26:677-706. 32. Riddell, C. (1987). Avian Histopathology. Kennett Square, PA: American
33. van Roeckel, H., Bullis, K. L., Flint, O. S and Clarke, M. K (1942). Poultry disease control service Massachusetts Agricultural Experiment Station, MA. Annual Report. Bulletin. 388:99-103.
34. Sevoian, M. and Levine, P. P. (1957). Effects of infectious bronchitis on the reproductive tracts, egg production, and egg quality of laying chickens. Avian Diseases 1: 136-164.
35. Siller, W.G. (1981). Renal pathology of the fowl-A review. Avian Pathology, 10, 187-262.
36. Sjaak de Wit, J.J., Cook, J.K. & van der Heijden, H.M. (2011). Infectious bronchitis virus variants: a review of the history, current situation and control measures. Avian Pathol 40(3), 223-35.
37. Yachida, S ., Aoyama, A., Takahashi N , Iritani Y., Katagiri, K. (1979). Effects on biological properties of embryo‐adapted beaudette strain of infectious bronchitis virus of passage through chick embryo trachea organ culture. Avian Pathology, 8: 313-324.
38. You, J.H., Reed, M.L. & Hiscox, J.A. (2007). Trafficking motifs in the SARScoronavirus nucleocapsid protein. Biochem Biophys Res Commun 358(4), 1015-20.
39. de Wit, J.J. (2000). Detection of infectious bronchitis virus. Avian Pathol 29(2), 71 -93.