Phần 3 Vật liệu và phương pháp nghiên cứu
3.4. Phương pháp nghiên cứu
3.4.1. Phương pháp theo dõi và thu thập thông tin
Thông tin chó đến khám tại phòng khám thú y Samyang animal clinic được lấy ngẫu nhiên, bao gồm tất cả các giống chó, ở mọi lứa tuổi được đưa đến khám tại cơ sở. Thông tin được lưu lại toàn bộ nhờ phần mềm IntoVet - cho phép theo dõi và quản lý bao gồm số hiệu, tên, tuổi, giống, tính biệt, dịch vụ đã sử dụng và các bệnh, thuốc đã từng điều tri.
3.4.2. Phương pháp hồi cứu
Dựa vào thời gian nghiên cứu và địa điểm nghiên cứu tiến hành thu thập thông tin chó đến khám tại phòng khám thú y Samyang animal clinc trong vòng 3 năm 2016, 2017, 2018. Toàn bộ thông tin khách hàng sử dụng dịch vụ phòng khám được theo dõi bằng phần mềm IntoVet. Số liệu thu thập được sẽ được xử lý bằng phần mềm thống kê Excell và phân tích SAS 9.1.3.
3.4.3. Phương pháp quan sát và đánh giá vùng da tổn thương
Xác định bệnh tích thông qua tổn thương ở da bằng phương pháp đánh giá vùng da tổn thương theo phương pháp của Gortel, 2006. Cụ thể, với mức độ tổn thương trên 50% bề mặt da của cơ thể được xếp vào thể bệnh toàn thân (generalized demodicosis). Những ca bệnh chỉ có những dấu hiệu rụng lông, ban đỏ, da đóng vảy chủ yếu ở vùng mặt và chân với mức độ tồn thương dưới 50% bề mặt da của cơ thể được coi là thể bệnh cục bộ (localized demodicosis).
3.4.4. Phương pháp quy định lứa tuổi
Dựa vào các giai đoạn sinh trưởng và phát triển của chó, phân ra 3 lứa tuổi như sau:
+ Dưới 1 tuổi. + Từ 1 đến 3 tuổi.
+ Trên 3 tuổi.
3.4.5. Phương pháp xác định kiểu lông
Dựa vào đặc điểm dài, ngắn của lông, tiến hành phân thành 2 nhóm chó lông ngắn và lông dài.
+ Chó lông ngắn là những giống chó có độ dài của lông phủ ngắn hơn 2cm và lông thường mượt, áp sát vào da như giống Fox, Dobermann, Phú Quốc,...
+ Chó lông dài là những giống chó có độ dài của lông phủ dài hơn 2cm thường xù, quăn và phải chăm sóc tắm chải thường xuyên chẳng hạn như Poodle, Pomeranian, Akita, Alaska,...
3.4.6. Phương pháp lấy mẫu và xét nghiệm Demodex
Quan sát các triệu chứng lâm sàng của chó nghi nhiễm Demodex spp.thường
biểu hiện như ngứa, tổn thương ngoài da, rụng lông, thường xuất hiện quanh mắt, tứ chi hay toàn bộ cơ thể, viêm da sâu có dịch rỉ, có mủ, mùi hôi tanh, đóng vảy. Dùng dao cạo da ở vùng tiếp giáp giữa da lành và da bệnh cho đến khi rớm máu. Mẫu da cạo được phết đều lên phiến kính, sau đó soi mẫu dưới kính hiển vi
(X10) tìm Demodex spp.. Mẫu da, lông chó nghi mắc bệnh mò bao lông do
Demodex spp. thu trực tiếp tại phòng khám. Chẩn đoán căn bệnh dựa trên hình
thái Demodex spp. theo mô tả của Phan Lục và Phạm Văn Khuê (1996).
3.4.7. Phương pháp phân loại Demodex spp.
Việc phân loại Demodex spp. được tiến hành theo mô tả của Phan Lục và
Phạm Văn Khuê (1996).
+ Loài thân dài, mảnh là loài D. injai (chiều dài cơ thể trung bình cở ghẻ đực
là 367 µm, ghẻ cái là 339 µm), sống trong tuyến bã nhờn.
+ Loài thân dài, dày là D. canis (chiều dài cơ thể trung bình cở ghẻ đực là
192 µm, ghẻ cái là 223 µm), sống trong nang lông.
+ Loài thân ngắn là D. cornei (chiều dài cơ thể trung bình cở ghẻ đực là 121
µm, ghẻ cái là 137 µm), sống trong tầng biểu bì.
Như vậy Demodex có ba loài gây bệnh trên chó và căn cứ vào đặc điểm hình
thái, cấu tạo, đã phân định loài đó là D. canis, D. injai và D. cornei.
3.4.8. Phương pháp xác định bệnh tích và triệu chứng lâm sàng
Dựa trên các biểu hiện bên ngoài như con vật ngứa, sốt, rụng lông, sẩn, sần sùi, nổi mẩn đỏ, tăng sắc tố da, da chuyển sang màu tím than, có xuất hiện
các mụn mủ, dịch rỉ viêm… để xác định bệnh.
Ngoài ra, dựa trên kết quả soi kính để xác định chính xác thành phần ghẻ gây bệnh: dùng dao cạo da ở vùng tiếp giáp giữa da lành và da bệnh cho đến khi rớm máu. Mẫu da cạo được phết đều lên phiến kính, sau đó soi mẫu dưới kính
hiển vi (X10) tìm Demodex spp.
Về mặt tế bào học: sử dụng phương pháp nhuộm nhanh Diff - Quick
(Kruger, 1985) để quan sát và đánh giá các tổn thương do Demodex spp. gây ra ở
mức độ tế bào. Cụ thể:
- Lấy mẫu và để khô mẫu trong 10 - 20 giây ở nhiệt độ phòng.
- Nhuộm mẫu trong dung dịch 1 - methanol (20 giây - tương đương 20 - 30
lần nhúng).
- Nhuộm mẫu trong dung dịch 2 - thuốc nhuộm đỏ eosin (20 giây - tương
đương 20 - 30 lần nhúng).
- Nhuộm mẫu trong dung dịch 3 - thuốc nhuộm xanh methylen (20 giây -
tương đương 20 - 30 lần nhúng).
- Rửa mẫu nhẹ nhàng với nước cất.
- Sấy mẫu nhẹ nhàng cho khô và quan sát mẫu trên kính hiển vi.
Sinh hóa máu được thực hiện nhờ hệ thống máy sinh hóa, máy ly tâm và bộ kit tại phòng khám.
Hình 3.2. Hệ thống máy xét nghiệm sinh hóa máu và bộ kit xét nghiệm 3.4.9. Phương pháp phòng, trị bệnh Mò bao lông 3.4.9. Phương pháp phòng, trị bệnh Mò bao lông
a. Phương pháp phòng bệnh Mò bao lông
Theo dõi tối thiểu 10 cá thể đến thăm khám định kỳ tại phòng khám từ tháng 10 năm 2018 đến tháng 2 năm 2019.
Chia 2 lô phòng bệnh:
+ Lô 1: 5 cá thể chó khám tổng quát định kỳ 1 lần/ tháng (kiểm tra lông, da và soi da).
+ Lô 2: 5 cá thể chó sử dụng thuốc phòng các bệnh về nội, ngoại ký sinh trùng Advocate. Nhỏ gáy 1 lần/tháng.
Đánh giá hiệu quả phòng bệnh Mò bao lông sau 5 tháng theo dõi.
b. Phương pháp điều trị bệnh Mò bao lông
Phác đồ được đưa ra như sau: - Cắt lông, vệ sinh vùng da bị ghẻ.
- Tắm (7 ngày / lần) với Greentix: thành phần chính là Amitraz (đã được cấp phép tại Mỹ cho điều trị ghẻ Demodex). Liều pha 1ml/l nước.
Hình 3.3. Thuốc Greentix
- Uống thuốc (ngày uống 2 lần sáng, tối sau ăn):
+ Cephalexin liều 30mg/kgTT: phòng và điều trị viêm, nhiễm trùng kế phát. + Prednisolone liều 0,5mg/kgTT: giảm sưng, nổi mẩn đỏ, dị ứng.
+ Silymazin liều 10mg/kgTT: tăng cường chức năng giải độc gan. - Nhỏ Advocate 2 tuần/ lần, trong 1 tháng.
Xét nghiệm và kiểm tra lại sau 2 - 4 tuần điều trị để theo dõi mức độ nhiễm.
3.4.10. Phương pháp thống kê và xử lý số liệu (SAS 9.1.3)
Số liệu được thu thập và xử lý theo phương pháp thống kê bằng phần mềm