Vị trí C, ppm H, ppm, mult. (J, Hz) Vị trí C, ppm H, ppm, mult. (J, Hz) 1. 37,8 1,62 (1H, m, H-1a) 0,95 (1H, m, H-1b) 16. 37,7 1,92 (1H, brd, 14,5 Hz, H-16a) 1,62 (1H, m, H-16b) 2. 27,2 1,62 (1H, m, H-2a) 1,56 (1H, m, H-2b) 17. 35,8 - 3. 79,1 3,19 (1H, dd, 11,0; 4,0 Hz) 18. 49,2 1,38 (1H, m) 4. 39,0 - 19. 41.4 2,03 (1H, brd, H-19a) 1,36 (1H, m, H-19b) 5. 55,6 0,78 (1H, m) 20. 28,8 - 6. 18,8 1,60 (1H, m, H-6a) 1,48 (1H, m, H-6b) 21. 33,1 1,40 (1H, m, H-21a) 1,26 (1H, m, H-21b) 7. 35,1 1,36 (1H, m, H-7a) 1,02 (1H, m, H-7b) 22. 33,7 1,64 (1H, m, H-22a) 1,58 (1H, m, H-22b) 8. 38,8 - 23. 28,0 0,98 (3H, s) 9. 48.8 0,98 (1H, overl) 24. 15,5 0,80 (3H, s) 10. 37,6 - 25. 15,4 0,93 (3H, s) 11. 17,5 1,64 (1H, m, H-11a) 1,48 (1H, m, H-11b) 26. 29,8 0,91 (3H, s) 12. 36,7 1,32 (1H, m, H-12a) 1,00 (1H, m, H-12a) 27. 25,9 1,09 (3H, s) 13. 38,0 - 28. 29,9 0,82 (3H, s) 14. 158,1 - 29. 33,4 0,95 (3H, s) 15. 116,9 5,53 (1H, dd, 8,0; 3,0 Hz) 30. 21,3 0,91 (3H, s)
Phân tích phổ COSY xác định được các chuỗi liên kết H15-H16a; H3- H2a-H1a; H5-H6b-H7a; H9-H11b-H12b; H21a-H22a.
Hình 3.30. Phổ COSY của FH1
Trên phổ HMBC xác định được tương tác giữa H-3 với C-23, C-24; H- 23 với C-4, C-24, C-5 chứng tỏ vị trí C-4 gắn với 2 nhóm CH3-23, 24 và OH
gắn ở C-3. Các tương tác chính trên phổ HMBC được trình bày trên hình 3.32.
Hình 3.32. Tương tác chính trên phổ COSY, HMBC của FH1
Kết hợp các dữ kiện phổ IR, MS, phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1 chiều, 2 chiều và so sánh với tài liệu tham khảo [9],[10],[13] cho phép xác định cấu trúc của FH1 là taraxerol. Đây là hợp chất triterpenoid khung taraxerane lần đầu tiên được phân lập từ chi Ficus.
3.4Khảo sát hoạt tính sinh học của hợp chất FH1
Hợp chất FH1 được đem thử hoạt tính gây độc tế bào đối với 4 dòng tế bào ung thư gồm tế bào ung thư biểu mô (KB), ung thư gan (HepG2), ung thư phổi (Lu) và ung thư vú (MCF7). Các phép thử được tiến hành tại phòng Hóa sinh ứng dụng-Viện Hóa học-Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam.
Hình 3.33. Kết quả thử hoạt tính gây độc tế bào của FH1
Tuy nhiên kết quả thử nghiệm cho thấy hợp chất FH1 không thể hiện hoạt tính đối với 4 dòng tế bào ung thư thử nghiệm.
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 1. Kết luận
Kết quả của đề tài khóa luận tốt nghiệp đã đạt được mục tiêu đề ra:
- Điều chế được 97,1 gam cặn dịch chiết n-hexane lá cây Trâu cổ và đã khảo sát sắc ký bản mỏng cặn dịch chiết này; lựa chọn được hệ dung môi CH2Cl2/n-hexane làm dung môi rửa giải trong sắc ký cột silica gel để phân tách cặn dịch chiết n-hexane thành 9 phân đoạn khác nhau.Lần đầu tiên đã phân lập được một hợp chất triterpenoid khung taraxerane taraxerol (FH1) từ phân đoạn nhỏ của dịch chiết n-hexane lá cây Trâu cổ bằng phương pháp sắc ký cột silica gel và kết tinh.
- Cấu trúc của hợp chất FH1 đã được xác định bằng các phương pháp phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1 chiều, 2 chiều: 1H-NMR, 13C-NMR, DEPT, COSY, HSQC, HMBC; khổ khối lượng và phổ hồng ngoại.
- Đã khảo sát hoạt tính sinh học hợp chất FH1 đối với 4 dòng tế bào ung thư biểu mô (KB), ung thư gan (HepG2), ung thư phổi (Lu) và ung thư vú (MCF7). Tuy nhiên FH1 không thể hiện hoạt tính đối với 4 dòng tế bào này.
2. Kiến nghị
- Tiếp tục phân lập và xác định cấu trúc các hợp chất từ các dịch chiết khác và các bộ phận khác của cây Trâu cổ (Ficus pumila L.) nhằm tìm kiếm các hợp chất thiên nhiên có trong lá loài cây này.
- Khảo sát hoạt tính sinh học các hợp chất phân lập được từ cây Trâu cổ. - Bán tổng hợp một số hợp chất từ cây Trâu cổ và khảo sát hoạt tính sinh học của chúng.
TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu Tiếng Việt
[1]. Võ Văn Chi (2004), Từ điển thực vật thông dụng-Tập 1, NXB Khoa học và kỹ thuật, Hà Nội.
[2]. Nguyễn Văn Hùng (2011), Họ Na (Annonaceae)-Hóa học và hoạt tính sinh học của các loài Desmos rostrata, Goniothalamus tamirensis, Fissistigma villosissium - Quyển 1,NXB Khoa học Tự nhiên và Công nghệ, Hà Nội.
[3]. Triệu Quý Hùng (2014), Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học loài Goniothalamus macrocalyx Ban và Goniothalamus gracilipes Ban họ Na (Annonaceae), Luận án Tiến sĩ Hóa học, Viện Hóa học-Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam, Hà Nội.
[4]. Đỗ Tất Lợi (2011),Những cây cây thuốc và vị thuốc Việt Nam,NXB Thời Đại.
[5]. Nguyễn Kim Phi Phụng (2007), Phương pháp cô lập hợp chất hữu cơ, NXB Đại học Quốc gia Thành phố Hồ Chí Minh.
[6]. Trần Quốc Sơn, Đặng Văn Liếu (2013), Giáo tình cơ sở hóa học hữu cơ-Tập 1, NXB Đai học sư phạm.
[7]. Đặng Như Tại, Ngô Thị Thuận (2010), Hóa học hữu cơ-Tập 1, NXB Giáo dục Việt Nam.
[8]. Đào Thị Hải Yến (2017), Nghiên cứu thành phần hóa học một số phân đoạn dịch chiết n-Hexane lá cây Trâu cổ (Ficus pumila L.) họ dâu tằm ( Moraceace) trên địa bàn tỉnh Phú Thọ, Khóa luận tốt nghiệp ngành sư phạm hóa học, Trường Đại học Hùng Vương, Phú Thọ.
Tài liệu Tiếng Anh
[9]. Anshul Chawla, Ramandeep Kaur, Anil Kumar Sharma (2012), “ Ficus carica Linn.: A Review on its Pharmacognostic, Phytochemical and
Pharmacological Aspects”,International Journal of Pharmaceutical and Phytopharmacological Research, 1(4), pp. 215-232.
[10]. SHUKRANUL MAWA & IKRAM M. SAID (2012), Chemical Constituents of Garcinia prainiana. Sains Malaysiana, 41(5), pp. 585– 590.
[11]. Natália Maria Noronha, Grazielle Esteves Ribeiro, Ingridy Simone Ribeiro, Marcos José Marques, Luiz Felipe Leomil Coelho, and Jorge Kleber Chavasco (2014), “Phytochemical profile and antioxidant and antimicrobial activities of hydroethanolic extracts of Ficus pumila”, African Journal of Microbiology Research, 8(28), pp. 2665-2671.
[12]. Pham Thi Nhat Trinh, Nguyen Huu An, Pham Ngoc An, Mai Dinh Tri, Cao Van Du, Nguyen Thi Le Thuy, Nguyen Trong Tuan, Vang Thi Kim Thoa, Nguyen Ngoc Tuan & Le Tien Dung (2017), “A new benzofuran derivative from the leaves of Ficus pumila L.”, Natural Product Research, DOI: 10.1080/14786419.2017.1395427.
[13]. Virgilio D. Ebajo Jr, Robert Brkljača, Sylvia Urban, Consolacion Y. Ragasa (2015), “Chemical Constituents of Hoya buotii Kloppenb”,
Journal of Applied Pharmaceutical Science, 5(11), pp. 069-072. [14]. https://www2.chemistry.msu.edu/faculty/reusch/orgpage/nmr.htm [15]. http://www.magritek.com/wp-content/uploads/2014/05/009-Propyl-
benzoate-DEPT-60-MHz.jpeg
GIẢNG VIÊN HƯỚNG DẪN
TS. Triệu Quý Hùng
SINH VIÊN THỰC HIỆN