Chúng tôi đã tiến hành quan sát hình thái khuẩn lạc sau 5- 7 ngày nuôi cấy trên môi trường MEA ở 25±1 OC, đồng thời tiến hành làm tiêu bản nhuộm Lactophenol Amann, soi dưới kính hiển vi quang học với vật kính 40X để quan sát cấu tạo vi thể. Từ đó, định danh sơ bộ chủng nấm A. flavus và A. parasiticus sinh độc tố aflatoxin. Kết quả định danh được trình bày ở bảng 4.1
Bảng 4.1. Đặc điểm hình thái khuẩn lạc và cấu tạo vi thể
STT Kí hiệu Đặc điểm khuẩn lạc Đặc điểm cấu tạo vi thể
1 M1 d= 5,3 cm, rìa trắng, giữa lục vàng đến xanh lục
Bông hình cầu,thể bình 1 lớp 2 M2 d= 4,5 cm, xanh lục Bông hình cầu, tỏa tia,thể bình 1
lớp,
3 M3 d= 6,0 cm, lục vàng Bông hình chổi, tạo cột, thể bình 2 lớp
4 M4 d= 6,5cm, vàng đậm Bông hình chổi, tỏa tiathể bình 1 lớp
5 M5 d= 6,2 cm, lục vàng Bông hình cầu, tỏa tia,thể bình 1 lớp
6 M6 d= 5,9cm, rìa trắng, giữa lục vàng, vàng đậm
Bông hình cầu, tỏa tia, thể bình 2 lớp
7 M7 d= 5,3cm, rìa trắng, giữa xanh lục Bông hình cầu, tỏa tia, thể bình 1 lớp
8 M8 d= 5,2cm, xanh lục Bông hình cầu, tỏa tia, thể bình 1 lớp
9 M9 d= 5,9cm, lục vàng Bông hình chổi, tỏa tia, thể bình 1 lớp
10 M10 d= 5,1cm, lục vàng đến xanh lục Bông hình cầu, thể bình 1 lớp 11 M12 d= 5,7cm rìa trắng giữa vàng đậm Bông hình cầu, tỏa tia, thể bình 2
lớp
12 M13 d= 6,2, lục vàng Bông hình chổi, tạo cột, thể bình 1 lớp
13 M14 d= 4,9cm, rìa trắng, giữa xanh lục Bông hình cầu, tỏa tia, thể bình 1 lớp
14 M15 d= 5,8 cm, rìa trắng giữa vàng đậm
Bông hình cầu, tỏa tia, thể bình 1 lớp
15 M16 d= 5,7cm, rìa trắng, giữa lu ̣c vàng Bông hình chổi, tạo cột, thể bình 2 lớp
16 M18 d= 6,1 cm, rìa vàng nhạt, giữa vàng đậm
Bông hình cầu, tỏa tia, thể bình 2 lớp
17 M21 d= 4,2cm, rìa trắng giữa vàng đậm đến xanh lục
18 M25 d= 5,1cm, lục vàng đến xanh lục Bông hình cầu, thẻ bình 1 lớp 19 M26 d= 5,6cm, rìa trắng giữa xanh luc Bông hình cầu, thể bình 1 lớp 20 M28 d= 6,3 cm , rìa trắng, giữa vàng
nhạt, lục vàng
Bông hình cầu, tỏa tia, thể bình 1 lớp
21 M31 d= 6.0 cm, xanh lục Bông hình cầu, thể bình 1 lớp 22 M33 d= 4,8 cm, rìa trắng, giữa xanh
lục
Bông hình cầu, tỏa tia, thể bình 1 lớp
23 M37 d= 6cm, vàng nhạt đến lục vàng , Bông hình cầu, tỏa tia, thể bình 2 lớp
24 M38 d= 5,9cm, vàng đậm đến lục vàng,
Bông hình chổi, tỏa tia, thể bình 1 lớp
25 M39 d= 5,5, rìa trắng, giữa vàng lục Bông hình cầu, thể bình 1 lớp 26 M43 d= 6,3cm , lục vàng Bông hình chổi, tỏa tia, thể bình 1
lớp 27 M45 d= 5,4cm, rìa trắng , giữa vàng
đâ ̣m, lục vàng
Bông hình cầu, tỏa tia,thể bình 1 lớp
28 M46 d= 6,5cm, rìa trắng, lục vàng Bông hình cầu, thể bình 2 lớp 29 M47 d= 6,3cm, rìa trắng, giữa vàng đậm Bông hình cầu, thể bình 1 lớp 30 M50 d= 5,5, rìa trắng, giữa lục vàng đến xanh lục Bông hình cầu, thể bình 1 lớp
Mẫu 46: A. flavus Mẫu 50: A. parasiticus Hình 4.1. Hình thái khuẩn lạc sau 5 ngày nuôi cấy trên môi trường MEA
M45: A. flavus M38: A. flavus
A. flavus ATCC 204304 M31: A. parasiticus
Hình 4.2. Hình thái khuẩn lạc sau 7 ngày nuôi cấy trên môi trường MEA
Dựa vào những đặc điểm hình thái khuẩn lạc và cấu tạo vi thể được miêu tả ở bảng 4.1. So sánh với đặc điểm hình thái trong bảng 2.1 bướ c đầu chúng tôi xếp vào hai nhóm như trong bảng 4.2.
Bảng 4.2. Kết quả định danh nấm A. flavus và A. parasiticus
Khuẩn lạc nghi ngờ là A. flavus Khuẩn lạc nghi ngờ là A. parasiticus
M3, M4,M5, M6, M9, M12, M13, M15, M16, M18,M28, M37, M38, M39, M43, M45, M46, M47
M1, M2, M7, M8, M10, M14, M21, M25, M26, M31, M33, M50
Như vậy bằng phương pháp hình thái học chúng tôi đã định danh được 18 chủng nấm A. flavus và 12 chủng A. parasiticus trên tổng số 30 chủng phân lập được. Từ đó chúng tôi nhận thấy đặc điểm hình thái của 2 chủng nấm trên nuôi cấy 7 ngày trên môi trường MEA như sau :
A.flavus:
Đường kính khuẩn lạc từ 5.5- 6.5 cm, màu vàng đậm đến lục vàng, phân bố dày.
Bông hình cầu, tạo cột, bào tử đính hình cầuđến gần cầu, thể bình 1 hoặc 2 lớp, cuống bào tử xù xì.
A. parasiticus:
Đường kính khuẩn lạc từ 4.3- 6.0 cm. Màu lục vàng đến xanh lục, phân bố thưa.
Bông hình cầu, tỏa tia, bào tử đính hình cầu, gần cầu, thể bình 1 lớp, cuống bào tử xù xì.