Tên Thông số
Thiết bị Sciex X500R QTOF system
Cột sắc ký GL Science ODS-4 HP (150 mm, 2.1 mm, 3 μm)
Nhiệt độ cột 40 °C
Tốc độ dòng 0.3 mL min−1
Pha động (A) 5 mM CH3COONH4 in H2O (B) 5 mM CH3COONH4 in CH3OH Chương trình rửa giải
gradient
time, min 0 30 − 40 40.01 – 50 (B) % 0 95 5 Thể tích bơm 2 μL
Nguồn ion TurbolonSpray
Chế độ ion hóa ESI (+) measurement mode Swath
TOF-MS (scan range) 50 − 1000 Da, 0.1 s
TOF MS/MS 50 − 1000 Da, 22 ranges, 0.07 s each collision energy ramp 20 − 50 V
mass resolution 30 000 total cycle time 1.768 s
40
a)
b)
c)
41
a)
b)
c)
Hình 3.2: Phổ khối, thời gian lưu difenoconazole isomer
42
a)
b)
c)
43
a)
b)
c)
44
a)
b)
c)
45
a)
b)
c)
46
3.1.2. Kết quả xây dựng đường chuẩn cho HCDN trên thiết bị LC-QTOF-MS-
SWATH
Sử dụng điều kiện vừa được xác định ở trên để xây dựng đường chuẩn cho phép định lượng hỗn hợp 6 HCDN (carbendazim, difenoconazole isomer 1&2, hexaconazole, thiophanate-methyl, trifloxystrobin và azoxystrobin) 6 HCDN với khoảng nồng độ: từ 0,1 ppb – 1000ppb (0,1 ppb; 0,5ppb;1 ppb; 2 ppb; 4 ppb; 10 ppb; 20 ppb; 40 ppb; 100 ppb; 200 ppb; 400 ppb; 1000 ppb) trong MeOH, đo trên thiết bị LC-QTOF-MS-SWATH.
Từ các kết quả phân tích thu được các đường chuẩn của 6 HCDN (carbendazim, difenoconazole isomer 1&2, hexaconazole, thiophanate-methyl, trifloxystrobin và azoxystrobin) có dạng (hình 3.7 - hình 3.13): - Carbendazim: y = 0,00591x + 0,00107 với R = 0,97626; R2 = 0,95308 - Difenoconazoleisomer1&2: y = 0,00381x + 0,0000599 với R = 0,9866; R2 =0,97338 - Hexaconazole: y = 0,00275x + 0,00039186 với R = 0,97948; R2 = 0,95938 - Thiophanate-methyl: y = 0,00496x + 0,000154333 với R = 0,98428; R2 = 0,9688 - Trifloxystrobin: y = 0,00743x + 0,00018046 với R = 0,99501; R2 = 0,99005 - Azoxystrobin: y = 0,00724x + 0,00045283 với R = 0,99373; R2 = 0,98750
47
Hình 3.7: Đường chuẩn carbendazim
Hình 3.8: Đường chuẩn difenoconazole Isomer
48
Hình 3.10: Đường chuẩn thiophanate-methyl
Hình 3.11: Đường chuẩn trifloxystrobin
49
3.1.3. Giới hạn phát hiện xác định (MDL) và giới hạn định lượng LOQ của 6
HCDN trên LC-QTOF-MS-SWATH
Phương pháp xác định 6 HCDN (carbendazim, difenoconazole isomer 1&2, hexaconazole, thiophanate-methyl, trifloxystrobin và azoxystrobin) sử dụng LC-QTOF-MS-SWATH đã được Kadokami và Ueno (2019) mô tả chi tiết. Giới hạn phát hiện phương pháp (MDL) và giới hạn định lượng (LOQ) của mỗi chất được xác định dựa trên mối quan hệ của chúng với giới hạn phát hiện thiết bị (IDL) và MDL và LOQ theo tỷ lệ (IDL: MDL: LOQ = 1: 4: 10) (SMEWW 1030C, 2017).
Các MDL và LOQ được tính theo IDL được chỉ ra ở bảng 3.5.