thí nghiệm
a) Kết quả khảo sát ảnh hưởng của tỷ lệtá dược tạo khung
Maltodextrin được sử dụng để hỗ trợ làm khô cho hệ liposome. Tiến hành làm khô hệ liposome đã phân tán sử dụng maltodextrin. Thực hiện khảo sát tỷ lệtá dược tạo khung với lipid lần lượt là 1:4; 1:3; 1:2; 1:1; 2:1.
Bảng 3.14. Tỷ lệtá dược tạo khung và lipid
Maltodextrin:lipid 2:1 1:1 1:2 1:3 1:4
Cảm quan sau bào chế Khô Không khô
Độổn định sau 1 tuần Khô Ẩm
Nhận xét: Liposome được không khô ở tỷ lệ maltodextrin:lipid là 1:1, 1:2, 1:3 và 1:4 có hiện tượng không khô. Hệliposome được đông khô ở tỷ lệ maltodextrin:lipid
62 là 2:1 cho bánh đông khô đẹp. Nghiên cứu chọn tỷ lệmaltodextrin:lipid là 2:1 để làm tá dược tạo khung và hỗ trợ làm khô.
b) Kết quả khảo sát tỷ lệ cao gừng và hệ liposome
Bảng 3.15. Kết quả khảo sát tỷ lệ liposome : cao gừng
Hình 3.17. Kết quả DLS hệ nano liposome chứa cao gừng tỉ lệ liposome:cao gừng 4:1. Công thức Tỉ lệ Liposome:cao gừng Kích thước tiểu phân trung bình (nm) PDI Thế Zeta (mV) CT1 6:1 83,7 0,758 -17,9 CT2 5:1 84,5 0,782 -20,0 CT3 4:1 113,4 0,28 -20,8 CT4 3:1 284,7 0,3 -18,6
63
Nhận xét: Kết quả DLS cho thấy tỉ lệ liposome:cao gừng là 4:1 cho kích thước hạt là 117.4 nm với PDI 0,290 và thế Zeta -20,8 mV phù hợp với điều kiện sử dụng như một chất mang thuốc kháng ung thư với kích thước nano.
Kết luận: Nghiên cứu sử dụng tỷ lệ hệ liposome:cao gừng là 4:1 để bào chế hệ nano liposome chứa cao gừng.
Quy trình tổng hợp hệ nano liposome chứa cao gừng quy mô phòng thí nghiệm
Hình 3.17. Quy trình tổng hợp nano liposome chứa cao gừng quy mô phòng thí nghiệm.
Cô quay áp suất loại dung môi hữu cơ 45oC trong 4 giờ
Hòa tan trong CHCl3:MeOH
(2:1, v/v) Lecithin:vitamin E
Cô quay tạo màng lipid Hydrat hóa tạo
liposome Siêu âm Đồng hóa Đông khô Nước cất chứa Tween 80 Maltodextrin Cao gừng Khuấy 400 rpm ở 60oC trong 2 giờ Thời gian 30 phút Tần số 37 kHz Số chu kỳ: 10 Áp suất 800 bar Khuấy 400 rpm trong 10 phút Bảo quản 2- 8 oC
Loại thuốc tự do Ly tâm (5000 rpm, 15 phút, 25 oC)
64 ▪ Mô tả quy trình:
- Cân chính xác 540 mg lecithin; 60 mg vitamin E và 150 mg cao gừng cho vào bình cầu 100 mL; hòa tan các thành phần vào 5 mL dung môi CHCl3:MeOH (2:1, v/v).
- Khuấy 400 vòng/ phút trong 10 phút cho hỗn hợp đồng nhất.
- Tiến hành cô quay ở nhiệt độ 45 oC trong 4 giờ, áp suất chân không được điều chỉnh để loại dung môi bằng cách cho dung môi bay hơi từ từ, không quá nhanh tạo màng lipid mỏng và trong suốt bám xung quanh thành bình.
- Khi đã tạo được màng lipid khô hoàn toàn, hỗn hợp được hydrat hóa với 10 mL nước cất chứa 50 mg Tween 80 ở nhiệt độ 60 oC trong 2 giờ cho đến khi lớp màng lipid mỏng bong ra hết khỏi thành bình.
- Hệ phân tán liposome được làm giảm kích thước hạt bằng phương pháp siêu âm trong 30 phút và đồng hóa 10 chu kỳ dưới áp suất 800 bar.
- Hệ phân tán liposome tiếp tục được ly tâm với tốc độ 5000 vòng/ phút trong thời gian 15 phút ở 25 °C. Shogaol tự do sẽ bị loại ra khỏi hệ chất mang và kết tủa dưới đáy.
- Cân chính xác 1,2 g maltodextrin hòa tan trong 10 mL nước cất và bổ sung vào hệ liposome.
- Sản phẩm được đông khô trong máy đông khô EYELA FDU-1200. - Sản phẩm được bảo quản ở nhiệt độ 2-8 oC.
▪ Kết quả đánh giá khả năng nang hóa thuốc của liposome
Hiệu suất nang hóa thuốc của liposome được xác định thông qua việc định lượng thuốc tự do bằng HPLC. Kết quảđịnh lượng thuốc tựdo được trình bảy trong Bảng 3.16.
Bảng 3.16. Khối lượng shogaol toàn phần và khối lượng shogaol tự do
Lần đo Khối lượng shogaol toàn phần (µg)
1 37481
2 36859
3 37721
Trung bình 37354
Lần đo Khối lượng shogaol tự do (µg)
1 2137
2 2259
3 2247
Trung bình 2214
Kết quảđịnh lượng shogaol toàn phần là 37,35 mg và shogaol không được nang hóa vào liposome là 2,21 mg. Lượng shogaol được nang hóa vào liposome, hiệu suất nang hóa thuốc của liposome như sau:
65 - Hiệu suất nang hóa thuốc = 35,1437,35 × 100 = 94,07 (%)
Kết luận: Kết quả cho thấy khả năng mang thuốc và hiệu suất nang hóa thuốc của hệliposome khá cao đạt 94,07%.