M Ở ĐẦ U
3.2.1.1. Từ thân cây
Thân cây Na rừng sau khi thu hái vềđược rửa sạch, phơi khô, chặt và nghiền nhỏ thu được 5,5 kg bột khô. Bột này được chiết với methanol 80% (6 L x 3 lần) ở nhiệt
độ phòng trong 48 h. Dịch chiết methanol được cô quay dưới áp suất giảm thu được 320 g cặn chiết. Cặn chiết này được hòa vào 2 L nước và chiết phân bố lần lượt với
n-hexane (1 L x 3 lần), ethyl acetate (1 L x 3 lần), phần còn lại là nước. Các dịch chiết tiến hành cô quay dưới áp suất giảm thu được các cặn chiết tương ứng, cặn H (78 g) và cặn E (165 g).
Phân đoạn ethyl acetate được sắc ký cột pha thường với chất hấp phụ silica gel, rửa giải bằng hệ CH2Cl2/MeOH (từ 0% đến 100%) thu được 12 phân đoạn nhỏ
(KCE1-KCE12) dựa vào dữ liệu sắc ký bản mỏng của chúng.
Phân đoạn KCE3 (7,5 g) được tiến hành sắc ký cột pha đảo RP18, rửa giải bằng hệacetone/MeOH/nước (1/1/1,5) thu được 6 phân đoạn nhỏ (KCE3A-KCE3F).
Phân đoạn KCE3B (320 mg) được tinh chế trên cột Sephadex LH-20, rửa giải bằng methanol thu được hợp chất KC13 (5,6 mg).
Phân đoạn KCE3D (550 mg) được sắc ký cột pha thường rửa giải hệ
CH2Cl2/EtOAc (5/1) thu được hợp chất KC15 (6,1 mg).
Phân đoạn KCE3F (625 mg) được tinh chế trên sắc ký cột pha thường với hệ
36
Phân đoạn KCE5 (200 mg) được tiến hành sắc ký cột pha đảo RP18, rửa giải bằng acetone/H2O (1,2/1) đểthu được hợp chất KC1 (5,8 mg).
Sắc ký cột pha đảo RP18 phân đoạn KCE6 (8,3 g), rửa giải bằng hệ dung môi MeOH/H2O (1,5/1) thu được 5 phân đoạn nhỏ (KCE6A - KCE6E). Phân đoạn
KCE6B (350 mg) được tinh chế thêm bằng sắc ký cột silica gel với hệ dung môi
EtOAc/acetone (3/1,2) thu được KC2 (8,5 mg) và KC3 (5,5 mg). Hợp chất KC4
(6,2 mg) thu được từphân đoạn KCE6E (320 mg) bằng sắc ký cột RP18 và rửa giải bằng hệ dung môi acetone/H2O (1,3/1).
Như vậy, từ thân cây Na rừng đã phân lập được 7 hợp chất, từ KC1-KC4 và
KC13-KC15.
Hình 3.4. Sơ đồ phân lập chất từ thân cây Na rừng